巖黃連抗腫瘤及其他藥理作用的研究進展

安 然(綜述),王績英(審校)

(桂林醫學院附屬醫院呼吸內科，廣西 桂林 541001)

腫瘤是嚴重威脅人類生命健康的疾病，其中肺癌是目前全世界所有癌癥死因中位列第一的重大疾病，約占全部惡性腫瘤的19%。在男性腫瘤死因中已居首位，在女性中僅次于乳腺癌居第二位[1]。人們往往談癌色變，究其原因，一方面是癌癥患者的高病死率，另一方面是患者在癌癥的發生、發展以及治療過程中要承受巨大的痛苦，這種痛苦不僅僅來自于癌癥本身對患者的侵害，還有當前的治療手段給患者帶來的損害，因此廣大醫務工作者、研究人員都在積極尋找新的安全、高效、低毒的治療手段。中藥在抗腫瘤方面的獨特作用漸漸引起大家的關注，本文就巖黃連的藥理作用、臨床應用及前景作簡要概述。

1 植物資源及化學成分

巖黃連(corydalis saxicola bunting)又名石生黃堇，屬罌粟目罌粟科，多年生草本植物，高15～40 cm，生于山地林緣巖石隙縫中，生長條件要求較為苛刻，分布于我國甘肅、湖北、廣西、四川、貴州、云南等地，現已人工進行繁育培植[2-3]。巖黃連性涼，味苦，具有清熱解毒、利濕、止痛止血之功效，民間常用來治療急性黃疸型肝炎、肝硬化、肝癌、瘡癤腫毒、急性腸胃炎、口舌糜爛、火眼、目翳、痔瘡出血等疾病[2,4]。巖黃連全草含小檗堿，消旋卡維丁堿，脫氫卡維丁堿，消旋巖黃連堿，左旋-13β-羥基金罌粟堿，右旋四氫掌葉防己堿，左旋四氫非洲防己堿，原阿片堿，斯氏紫堇堿，白屈菜紅堿等生物堿[2]。王奇志等[5]采用反復硅膠柱層析和重結晶等方法分離巖黃連提取液并得到14種化合物，其中齊墩果酸、刺檗堿、胡蘿卜苷、別隱品堿、β-谷甾醇、白樺脂醇、環桉烯醇、白樺脂酸、β-香樹脂醇乙酸脂、巴馬汀等10種成分為首次從巖黃連中分離得到。胡芳等[6]采用高效液相色譜法測定巖黃連總堿中的脫氫卡維丁、鹽酸巴馬汀和鹽酸小檗堿含量，發現除3個主要有效成分外，還有2個未知成分，經初步鑒定為生物堿類似成分。夏稷子[7]參照黃連采用薄層色譜法試驗，從色譜圖中得出結論，巖黃連不含鹽酸小檗堿,但含有巴馬汀,表小檗堿。

2 巖黃連對腫瘤細胞的作用

2.1巖黃連對肝癌的作用 趙一等[8]通過對小鼠肉瘤180(mice sarcoma 180，S180)、艾氏腹水癌(Ehrlich ascites carcinoma，EAC)、腹水型肝癌(hepatoma ascites carcinoma，HAC)及大鼠肉瘤256(Walker-256，W256)細胞進行半體內法抗腫瘤實驗發現，巖黃連堿在1∶300濃度下，對上述細胞均有顯著抑制效果，對S180、W256抑制率分別達99.4%、100%，對S180、EAC、HAC腹水型生命延長率分別達389.0%、216.9%、133.6%，在瘤細胞液內，巖黃連濃度越高抗腫瘤作用越好，在同一巖黃連堿濃度下(1∶300)，與瘤細胞培養接觸時間越長抗腫瘤效果越好，經過pH、滲透壓、不同批號、劑量與培養接觸時間的實驗分析，證實這種抗腫瘤作用并不是由于環境的作用所致。體內法實驗不易達到半體內法試驗直接抑制或殺滅瘤細胞的劑量水平，抗腫瘤作用較差。在體外抗腫瘤實驗中，用瘤細胞呼吸法檢測S180、HAC、EAC抗腫瘤效果，結果顯示巖黃連總堿濃度1∶300抑制瘤細胞耗氧效力比5-氟尿嘧啶1∶20強，且巖黃連總堿對瘤細胞的敏感性S180>EAC>HAC。陸桂祥[9]通過對S180、EAC、HAC三種瘤細胞呼吸耗氧量的觀察，發現巖黃連對上述三種瘤細胞均有不同程度的抑制作用，并通過對比得出結論，S180對巖黃連作用最敏感，HAC稍差，并且這種抑制作用并非制劑本身pH所致，而與其所含有效成分有關。謝沛珊等[10]用不同批號的巖黃連針劑對S180和EAC進行了篩選實驗研究,實驗結果表明,巖黃連對小鼠S180、EAC均有一定的抑制作用，對S180抑瘤率可達30.5%以上。另外，使用兩個不同批號的巖黃連加增噬力酸,抑瘤率均提高,說明增噬力酸與巖黃連聯合使用有增強抑瘤作用。王陽[11]、袁衛平等[12]用巖黃連配合介入療法治療肝癌患者肝損傷取得不錯療效，各項肝功能指標明顯好轉，表明巖黃連對介入治療所致的肝損害具有修復作用，尤其伴有膽紅素升高的患者應用巖黃連注射液優于常規保肝治療，并且巖黃連有明顯的消炎利膽作用，可使患者食欲增加，術后低熱癥狀改善，血清總膽紅素迅速下降。熊良庚等[13]用奧曲膚聯合巖黃連注射液治療晚期肝癌30 d，結果顯示，臨床癥狀好轉，食欲改善及上消化道出血控制率均有明顯提高，機體細胞免疫功能也有明顯提高，CD3+，CD4+細胞值升高，CD8+細胞減少，CD4+/CD8+明顯升高。

2.2巖黃連對舌部鱗癌的作用 李晉芳等[14]通過噻唑藍比色法檢測不同濃度巖黃連和空白對照組人舌鱗狀細胞癌Tca8113細胞增殖的情況，同時用聚合酶鏈反應為基礎的端粒重復序列擴增酶聯免疫吸附測定法檢測Tca8113細胞端粒酶活性的改變，結果顯示，巖黃連總堿能夠顯著抑制Tca8113舌癌細胞的增殖以及端粒酶的活性,并且呈時間和濃度依賴性。推測巖黃連總堿通過抑制端粒酶活性表達,導致癌細胞失去無限增殖能力,從而阻斷舌癌的發生、發展。雷珺等[15]在李晉芳等[14]的基礎上做了繼續研究，用western blotting法半定量檢測人端粒酶反轉錄酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)的表達，發現巖黃連有明顯的抑制Tca8113細胞hTERT的作用，western blotting條帶灰度值表明，巖黃連總堿對Tca8113細胞端粒酶hTERT表達的抑制隨濃度和時間的增加而增加，由于hTERT可直接參與腫瘤細胞的生長和增殖的表達，因此hTERT的表達水平可以間接反映端粒酶活性，由此推測巖黃連抗腫瘤機制可能是通過抑制hTERT蛋白表達，降低端粒酶活性，進而抑制腫瘤細胞的增殖，阻止腫瘤生長。朱頤等[16]用聚合酶鏈反應法和Western blot法檢測經巖黃連總堿作用后的Tca8113細胞中Bcl-2核酸水平以及蛋白水平的變化來檢測巖黃連對Tca8113細胞凋亡和Bcl-2表達活性的影響，結果顯示，巖黃連總堿能促進Tca8113細胞凋亡，并在核酸水平和蛋白水平抑制Bcl-2的表達活性，且隨作用時間的延長和藥物濃度的增高，抑制作用增強，推測巖黃連促進Tca8113凋亡，抑制Tca8113增殖的作用機制可能是通過抑制Bcl-2的表達活性，直接促進Tca8113細胞的凋亡，并間接抑制核因子κB的活化，進而抑制舌鱗癌細胞的增殖。尹俊凱等[17]用噻唑藍比色法檢測不同濃度的巖黃連總堿分別處理體外培養的Tca8113細胞24,48和72 h后的細胞增殖抑制情況，Hochest33258染色及DNA ladder檢測細胞凋亡，并用脫氧核苷酸轉移酶介導的脫氧三磷酸尿苷缺口末端標記法原位檢測細胞凋亡及細胞凋亡率，結果顯示，巖黃連總堿對Tca8113細胞增殖具有明顯抑制作用，且呈現出一定的時間和濃度依賴性；Hochest33258檢測發現巖黃連總堿作用48 h后可見凋亡細胞；DNA ladder檢測可見凋亡特有的180～200 bp整數倍DNA條帶；缺口末端標記法結果顯示巖黃連總堿處理組細胞凋亡率呈時間和濃度依賴性，據此得出結論，巖黃連總堿能明顯抑制人舌鱗癌Tca8113細胞增殖和誘導細胞凋亡。

2.3巖黃連對宮頸癌的作用 楊啟洪[18]曾用巖黃連配合其他中草藥治療宮頸癌患者，治療數月后患者宮頸癌各種癥狀消失而健康如常，回訪4年多無復發現象。

3 其他藥理作用

3.1免疫調節作用 柯珉珉等[19]在1982年就曾報道巖黃連總堿在小鼠試驗中有顯著增強小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的作用。童鯤等[20]研究巖黃連總堿對小鼠免疫功能的調節作用,發現巖黃連總堿腹腔注射可顯著增加溶血空斑實驗中小鼠細胞的溶血空斑數、增強小鼠的遲發型超敏反應，巖黃連總堿在體外能增強同種異型小鼠脾細胞的混合培養反應和增強絲裂原對脾細胞的刺激作用,提高小鼠的免疫功能，是很好的免疫增強劑。畢明剛等[21]研究發現巖黃連總堿提取物可增強脾臟淋巴細胞增殖反應，并增強T細胞絲裂原伴刀豆球蛋白A誘導的脾T淋巴細胞增殖反應，提示巖黃連可促進T細胞增殖。

3.2抗炎抑菌作用 巖黃連生物堿有效成分之一，脫氫卡維丁堿對金黃色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌、白喉桿菌有抑制作用，對耐青霉素的白色和金黃色葡萄球菌也有抑制作用[19]。李麗[22]研究發現，巖黃連注射液能顯著抑制炎癥早期的毛細血管通透性增加、滲出及水腫,對炎癥晚期的纖維結締組織增生也有一定的抑制作用；鄧雯等[23]發現巖黃連總堿可以通過清除自由基來減少對肝細胞的損傷作用，減輕肝臟炎癥反應，起到保肝的作用。

3.3中樞抑制作用 黃燮南等[24]通過研究發現，巖黃連總堿皮下注射0.05 g/kg具有抑制小鼠“扭體反應”的傾向，皮下注射0.1 g/kg抑制作用十分明顯。在大鼠“甩尾法”實驗中，巖黃連總堿0.1 g/kg也能提高大鼠對熱刺激的“痛閾”。吳春福等[25]研究發現，巖黃連總堿對黑質-紋狀體多巴胺能神經通路中多巴胺的更新率有一定抑制作用，能對抗苯丙胺誘發的動物活動增多，提示可能抑制中樞多巴胺能神經系統，其中樞抑制的作用機制與氟哌啶醇不同，不是單純通過對紋狀體突觸后多巴胺受體阻斷而起作用。

3.4抗病毒作用 巖黃連生物堿主要有效成分脫氫卡維汀對RNA病毒(甲型肝炎病毒)和DNA病毒(乙型肝炎病毒)有一定抑制作用，對丙型肝炎病毒也有一定的抑制作用[26]。王健等[27]通過對比用藥前后鴨血清中乙型肝炎病毒DNA，丙氨酸轉氨酶，天冬氨酸氨轉氨酶及鴨肝組織蘇木精-伊紅染色的變化情況，得出結論，巖黃連提取物在體內有明顯的抗乙型肝炎病毒作用，且作用大小與藥物劑量相關。任仲軒[28]通過臨床試驗研究發現巖黃連注射液可以有效地改善急慢性病毒性肝炎患者的臨床癥狀，使這些患者血清總膽紅素、1 min膽紅素、丙氨酸轉氨酶，天冬氨酸轉氨酶在較短的時間內下降在一定程度上改善蛋白代謝，有較好的護肝作用。

4 不良反應

巖黃連注射液可能引起特異體質的過敏反應，臨床表現為用藥后周身瘙癢、心慌、寒戰、高熱[29]。臨床上也有報道少部分慢性肝炎和肝硬化患者用藥后出現黃疸加深，丙氨酸轉氨酶，天冬氨酸轉氨酶持續不降[28]。

5 民間及臨床應用

5.1民間應用 民間治療火眼、翳子用巖黃連3 g，龍膽草3 g，上梅片1.5 g。共研末，裝瓷杯內蒸透后，用燈草蘸藥點入眼內。治療痔瘡出血及紅痢用巖黃連15 g，蒸酒60 g服[2]。

5.2治療肝炎、肝硬化、高膽紅素血癥 張薇薇等[30]通過用巖黃連聯合替比夫定治療40例慢性乙型重型肝炎，治療6周臨床總有效率達72.5%(29/40)，得出結論，替比夫定聯合巖黃連治療對慢性重型肝炎血清總膽紅素降低、凝血酶原活動度值升高、HBV DNA定量下降有較好療效。尹華[26]通過臨床試驗研究發現巖黃連和丹參注射液合用可以有效改善肝功能、減輕和抑制肝纖維化，并證實其能促進肝細胞再生。王丹等[31]應用生脈注射液和巖黃連注射液聯合治療肝硬化，在緩解癥狀、保肝、利膽等方面均取得了良好的療效。張薇薇等[32]通過用巖黃連聯合還原型谷胱甘肽治療110例高膽紅素血癥患者，對比天冬氨酸鉀鎂治療另外110例高膽紅素血癥患者，觀察癥狀、體征和肝功能檢測，得出結論，巖黃連聯合還原型谷胱甘肽治療高膽紅素血癥有較好的臨床療效，值得臨床推廣應用。

5.3治療肝癌及其他癌癥 王陽[11]和袁衛平等[12]應用巖黃連注射液配合介入療法治療肝癌患者，對比治療前發現用藥后肝功能明顯改善，表明巖黃連注射液能有效對抗及修復介入治療導致的肝功能損害，同時由于巖黃連注射液有明顯的消炎利膽作用，可使患者食欲增加，術后低熱癥狀改善，血清總膽紅素迅速下降。楊啟洪[18]用巖黃連配合其他中草藥治療宮頸癌患者，四年多隨訪無復發。

6 展 望

巖黃連具有多種藥理作用，但巖黃連及其制劑在臨床應用上目前還主要局限于肝臟疾病的治療及輔助治療，其他應用正處于實驗研究階段目前尚未應用于臨床或未見報道。隨著近年來引種栽培成功[3]，巖黃連大量人工繁殖，為臨床應用提供了足夠的藥源，以及實驗研究的進一步加深，中藥巖黃連在臨床其他腫瘤以及疾病的治療上也會有新的發現，巖黃連及其制劑也將會有更加廣泛、安全的應用。巖黃連制劑也將成為臨床治療腫瘤等疾病的新思路。

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