不同番茄中番茄皂苷A的含量比較

盧鳳來，陳思呈，2，顏小捷，李典鵬，*

（1.廣西植物功能物質(zhì)研究與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（廣西植物研究所），廣西桂林541006；2.廣西師范大學(xué)，廣西桂林541004）

不同番茄中番茄皂苷A的含量比較

盧鳳來1，陳思呈1，2，顏小捷1，李典鵬1，*

（1.廣西植物功能物質(zhì)研究與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（廣西植物研究所），廣西桂林541006；2.廣西師范大學(xué)，廣西桂林541004）

采用高壓液相色譜－蒸發(fā)光散射檢測法測定桂北地區(qū)不同品種、不同采收期番茄及桂林市市場上新鮮番茄中番茄皂苷A的含量。結(jié)果表明番茄中番茄皂苷A的含量與品種有較大的關(guān)系，其中大番茄的含量明顯低于櫻桃番茄的含量，同時(shí)不同櫻桃番茄中其含量也有顯著的差異，活力的含量最高，其含量占干粉含量的0.7%。市場上的新鮮番茄中番茄皂苷A的含量也差異明顯。

高壓液相色譜－蒸發(fā)光散射檢測法；番茄；番茄皂苷A

番茄（Lycopersicon esculentum Mill.），又名西紅柿，不少地區(qū)叫洋柿子、火柿子[1-2]，是茄科番茄屬植物。番茄具有豐富的營養(yǎng)成分[3]，與人類健康密切相關(guān)。目前國內(nèi)學(xué)者對番茄的研究主要集中在栽培育種，病蟲害防治以及番茄紅素等脂溶性化學(xué)成分的研究上[4-9]，有關(guān)番茄皂苷的研究報(bào)道還較少。2003年，日本野原等人首次從成熟番茄分離出了番茄皂苷A（esculeoside A），結(jié)構(gòu)式為3-O-β-石蒜四糖基（5S，22S，23S，25S）-23-乙酰氧基-3β，27-二羥基螺旋甾堿烷27-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，是番茄中主要的皂苷成分，其含量大約是番茄紅素的四倍[10]。藥理活性研究發(fā)現(xiàn)番茄皂苷A（esculeogenin A）及其苷元體外可抑制泡沫細(xì)胞的形成，可顯著降低動脈粥樣硬化癥ApoE缺陷小鼠血漿中膽固醇，甘油三脂，低密度脂蛋白水平，而無其它方面副作用，為一種較好的酰基輔酶A膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶抑制劑，是有前景的抗動脈粥樣硬化癥化合物[11]。另外研究還預(yù)計(jì)番茄皂苷A在體內(nèi)可代謝成具有抗骨質(zhì)疏松，抗更年期障礙，及抗腫瘤等生物活性的孕甾體激素[12]。因此除番茄紅素外，番茄中尚存在多種水溶性皂苷化合物，其活性也更值得我們研究和注意，番茄皂苷提取物在國際植物藥及保健食品市場也日益受到親睞[13]。

我國是世界上番茄最大的生產(chǎn)國之一。通過對桂林地區(qū)的番茄進(jìn)行初步的提取分離試驗(yàn)，我們發(fā)現(xiàn)桂林產(chǎn)的番茄都含有番茄皂苷A，但其含量高低與品種有很大關(guān)系。在已建立番茄皂苷A高壓液相色譜－蒸發(fā)光散射檢測法的含量測定方法的基礎(chǔ)之上[14]，我們首次比較了不同品種番茄中番茄皂苷A的含量，篩選出優(yōu)良品種。為番茄的加工利用開辟另一條新路，以更大地促進(jìn)番茄產(chǎn)業(yè)的發(fā)展奠定物質(zhì)基礎(chǔ)。

1材料與方法

1．1儀器和試劑

儀器：Agilent1200半制備型高效液相色譜儀；美國Alltech ELSD—2000ES型蒸發(fā)光散射檢測器；ZORBAX SB-C18分析柱：4.6 mm×150 mm，5μm）；BS110S賽多利斯電子天平：北京賽多利斯天平有限公司；B3500S-MT超聲清洗器：必能信超聲有限公司。

標(biāo)準(zhǔn)品與試劑：番茄皂苷A（esculeoside A）由本實(shí)驗(yàn)室從番茄中分離獲得，經(jīng)高分辯質(zhì)譜（HR－MS）和核磁共振譜（NMR）鑒定其結(jié)構(gòu)。甲醇為色譜純（美國TEDIA公司）；重蒸蒸餾水為自制，其他試劑均為AR級。

1．2樣品來源與樣品處理

23個(gè)不同品種的新鮮成熟番茄采自廣西桂林的資源，龍勝，永福等縣，并于不同月份在桂林市果蔬批發(fā)市場采集了17批次的櫻桃番茄樣品（樣品來源見表1和表2）。采集后取一定量樣品，切開，用榨汁機(jī)絞碎，準(zhǔn)確稱量150.0 g冷凍干燥，再粉碎，過40目篩，干燥保存?zhèn)溆谩?/p>

測定時(shí)精確稱取番茄粉末1.000 g，置100μmL具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50mL，搖勻，稱定重量，超聲處理1 h，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，以0.45μm的微孔濾膜濾過，濾液作為供試品溶液。

1．3色譜條件與標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制[14]

色譜條件：色譜柱：ZORBAX SB-C18柱（4.6mm× 150mm，5μm）；柱溫：30℃；流動相：甲醇-水（梯度洗脫：0→5min：15%→30%甲醇；5→12min：30%→60%甲醇；12→20 min：60%→80%甲醇）；檢測時(shí)間：25 min；流速：0.8mL/min。ELSD檢測器參數(shù)：漂移管溫度：100℃，空氣流速：2.7 L/min。在此條件下，目標(biāo)化合物能較短時(shí)間內(nèi)與其它化合物基線分離（見圖1）。

分別吸取對照品0.122mg/mL溶液5、10、12、15、20μL，注入液相色譜儀中，測定峰面積，以對照品進(jìn)樣量的自然對數(shù)為橫坐標(biāo)，以對照品峰面積的自然對數(shù)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。回歸方程為Y=1.648 5X+ 8.130 2，r=0.999 5，結(jié)果表明，番茄皂苷A在0.61mg～2.44mg內(nèi)的對數(shù)值與峰面積的對數(shù)值具有良好的線性關(guān)系。

圖1 標(biāo)準(zhǔn)品、活力番茄與大百利番茄色譜圖Fig．1 Chromatograms of reference substance，huoli tomato and dabaili tomato

2結(jié)果與分析

2.1 不同品種番茄中番茄皂苷A的含量檢測

通過采集桂北地區(qū)23個(gè)不同的番茄品種進(jìn)行檢測，結(jié)果見表1與圖2。

由表1和圖2表明，番茄皂苷A的含量與番茄品種有密切的關(guān)系，其中大番茄（大百利、巴頓、圣比利）含量明顯低于櫻桃番茄，這一結(jié)果與Hideyuki Manabe等[15]的研究結(jié)果一致。不同櫻桃番茄中其含量也有顯著的差異，活力的最高，其含量占干粉含量的0.7%，其次為亞蔬11號（0.674%）。

2.2 市場上新鮮櫻桃番茄中番茄皂苷A的含量檢測

為了了解市場上櫻桃番茄中番茄皂苷A含量情況，我們在2010年內(nèi)的不同月份，到桂林果蔬批發(fā)市場購買了適量的櫻桃番茄，檢測其中番茄皂苷A的含量，結(jié)果見表2與圖3。

表1 不同品種番茄中番茄皂苷A的含量檢測結(jié)果Table1 Determination result of esculeoside A in different species of Lycopersicon esculentum M ILL.samples

圖2 不同品種番茄中番茄皂苷A的含量檢測結(jié)果Fig.2 Determination result of esculeoside A in different speciesof Lycopersicon esculentum M ILL.samples

由表2、圖3表明，這些樣品中番茄皂苷A的含量高低不一。這跟其品種、產(chǎn)地、采收期有很大的關(guān)系。由于我們在市場上收集的番茄樣品，只知道其產(chǎn)地，但其品種名稱并不清楚。要研究不同時(shí)期番茄中番茄皂苷A的含量，樣品來源應(yīng)該固定品種固定產(chǎn)地。

表2 桂林市場上新鮮櫻桃番茄中番茄皂苷A的含量檢測結(jié)果Table2 Determination result of esculeoside A in Lycopersicon esculentum M ILL.samples coming from guilin market

圖3 桂林市場上新鮮櫻桃番茄中番茄皂苷A的含量檢測結(jié)果Fig.3 Determination result of esculeoside A in Lycopersicon esculentum M ILL.samples coming from guilin market

3結(jié)論

通過本實(shí)驗(yàn)，了解到不同品種番茄中番茄皂苷A的含量差異，有利于番茄產(chǎn)品加工時(shí)原料的選擇及番茄資源的綜合利用。以獲取番茄皂苷A為目的時(shí)，應(yīng)引種栽培番茄皂苷A含量高的品種，同時(shí)注意采收的時(shí)期，可有效提高其產(chǎn)品的品質(zhì)。篩選出高含量番茄皂苷A的品種，為開發(fā)一種番茄皂苷新型保健食品或藥品，綜合利用番茄中脂溶性成分和水溶性成分打下物質(zhì)基礎(chǔ)。

[1]趙蘭生．營養(yǎng)健身說番茄[J]．食品與健康,2001(7）：24

[2]陳月英．番茄的加工利用現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢[J]．農(nóng)產(chǎn)品加工,2005 (3)：55-56

[3]曾獻(xiàn)春,劉金寶,李曉華．番茄、胡蘿卜乳酸菌發(fā)酵飲料的研制[J]．食品科學(xué),2005(11)：137-140

[4]李曉蕾,李景富,康立功,等．番茄品質(zhì)遺傳及育種研究進(jìn)展[J]．中國蔬菜,2010(14)：1-7

[5]李文甲,李建設(shè),高艷明．番茄側(cè)枝扦插研究進(jìn)展[J]．長江蔬菜：學(xué)術(shù)版,2010(12)：4-7

[6]高建昌,杜永臣,王孝宣,等．番茄抗蟲育種研究進(jìn)展[J]．中國蔬菜,2007(3)：38-42

[7]邱夷鵬,張子君,李海濤,等．番茄晚疫病抗病育種及分子生物學(xué)研究進(jìn)展[J]．中國蔬菜,2009(10)：1-6

[8]葉青靜,楊悅儉,王榮青,等．番茄抗黃化曲葉病育種研究進(jìn)展[J]．中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2009,42(4)：1230-1242

[9]鄒禮平,高和平,鐘亞琴．植物番茄紅素生物合成相關(guān)基因的表達(dá)調(diào)控研究進(jìn)展[J]．安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2009,37(33)：16232-16233, 16242

[10]Yukio Fujiwara,Ayumi Takaki,Yukie Uehara,etal.Tomato steroidal alkalid glycosides,esculeosides A and B,from ripe fruits[J].Tetrahedron,2004,60(22)：4915-4920.

[11]Yukio Fujiwara,Naoko Kiyota,Masaharu Hori,et al.Esculeogenin A,anew tomatosapogenol,ameliorateshyperlipidemiaandatherosclerosis in ApoE-deficientmice by inhibiting ACAT[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol,2007,27(11)：2400-2406.

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[13]徐滿珍.番茄中新的皂草精醇類化合物isoesculeogenin A和esculeogenin B[J].國外醫(yī)藥(植物藥分冊）,2006,21(4)：168.

[14]盧鳳來,劉金磊,陳月圓,等．高壓液相色譜－蒸發(fā)光散射檢測法測定番茄中番茄皂苷A的含量[J]．色譜,2010,28(9)：908-911

[15]Hideyuki Manabe,Yoshihiro Murakami,Mona El-Aasr,et al., Content variations of the tomato saponin esculeoside A in various processed tomatoes[J]．JNatMed,2011,65(1)：176-179

Determination Result of Esculeoside A in Different Lycopersicon esculentum M ILL.samples

LU Feng-lai1，CHENSi-cheng1，2，YANXiao-jie1，LIDian-peng1，*
（1.GuangxiKey Laboratory of Functional Phytochemicals Research and Utilization，Guangxi Institute of Botany，Chinese Academy of Sciences，Guilin 541006，Guangxi，China；2.Guangxi Normal University，Guilin 541004，Guangxi，China）

The content of esculeoside A in Lycopersicon esculentum MILL.sample of different cultivated varieties，different harvest time in the north area of guilin and fresh fruits from guilin market were deternined by high performance liquid chromatography（HPLC）with evaporative light scattering detection（ELSD）.The results showed that the content of esculeoside A is strongly related to the cultivated varieties，which of big tomato is obviously lower than that of cherry tomato.And there was also obvious difference among different cherry tomato，esculeoside A's content of huoli was the highest，which was0.7%of dried power.Morever the obvious difference also exsited in the fresh tomato coming from market.

High performance liquid chromatography with evaporative light scattering detection；Lycopersicon esculentum MILL.；esculeoside A

10.3969/j.issn.1005-6521.2014.15.010

2012-12-27

廣西科學(xué)基金應(yīng)用基礎(chǔ)研究專項(xiàng)資助項(xiàng)目（合同編號：桂科基0991020）；桂林市科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目（20100103-3）

盧鳳來（1979—），女（壯），助理研究員，碩士，主要從事植物資源開發(fā)與利用研究。

*通信作者：李典鵬，研究員，博士，從事植物活性物開發(fā)與利用研究。