卡介苗多糖核酸穴位注射對支氣管哮喘患者T細胞亞群及哮喘控制測試評分的影響

蔣朱秀，江勁，李敏靜，陳利芳

卡介苗多糖核酸穴位注射對支氣管哮喘患者T細胞亞群及哮喘控制測試評分的影響

蔣朱秀，江勁，李敏靜，陳利芳

目的評價卡介苗多糖核酸穴位注射對支氣管哮喘患者T細胞亞群及哮喘控制測試評分的影響。方法將40例支氣管哮喘患者分為觀察組和對照組，各20例，觀察組以卡介苗多糖核酸穴位注射，取雙側足三里和定喘穴，每穴注射0.5 ml；對照組行肌肉注射，每次2 ml，兩組均隔天治療1次，14次為1個療程，連續治療3個療程。于治療前后對患者行哮喘控制測試問卷（ACT）評分以及T細胞亞群檢測。結果兩組治療后ACT評分差異有統計學意義（＜0.05）；治療后觀察組患者的CD4+下降、CD8+升高，與對照組差異均有統計學意義（均＜0.05），CD4+CD8+比值差異有統計學意義（＜0.05）。結論夏季卡介苗多糖核酸穴位注射足三里、定喘穴治療支氣管哮喘，可以有效提高哮喘患者的ACT評分，改善機體免疫功能，從而有效減少冬季哮喘的發作。

卡介苗多糖核酸；穴位注射；支氣管哮喘；T細胞亞群；哮喘控制測試問卷

支氣管哮喘是一種與T淋巴細胞功能失調有關的氣道慢性炎癥性疾病。哮喘肺組織中T淋巴細胞呈活化狀態，且與氣道高反應有關。T淋巴細胞是啟動、維持和擴大氣道炎癥的直接因素，并參與哮喘急性發作時的主要病理生理變化。CD4+T細胞根據其分泌的細胞因子可分為Thl和Th2兩個功能亞群，目前研究認為Thl/Th2型淋巴細胞數量及功能失衡與支氣管哮喘發病密切相關[1]。卡介苗多糖核酸（BCG-PSN）作為非特異性免疫調節劑，采用肌肉注射來防治支氣管哮喘已在臨床應用多年。筆者在夏季采用BCG-PSN穴位注射治療支氣管哮喘患者，觀察其對患者免疫功能及冬春季發病情況的影響。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 納入及排除標準支氣管哮喘診斷及分期標準參照文獻[2]；病情處于非急性發作期，年齡14～70歲，自愿加入本研究并簽署知情同意書。排除合并嚴重心、肝、腎相關的內科疾病或嚴重免疫相關性疾病；精神障礙、嚴重皮膚病和凝血功能異常者。

1.2 一般資料收集2013年7—9月浙江中醫藥大學附屬第二醫院、浙江中醫藥大學附屬第三醫院呼吸科與針灸科門診的支氣管哮喘患者40例，采用隨機數字表法分為觀察組和對照組，各20例。觀察組男8例，女12例；年齡15～70歲，平均（50.3±16.1）歲；病程3～25年，平均（11.7±9.9）年。對照組男10例，女10例；年齡16～68歲，平均（53.6±11.7）歲；病程4～23年，平均（9.55±6.69）年。兩組患者一般資料差異無統計學意義（＞0.05）。

1.3 方法所有患者在哮喘肺急性發作期給予布地奈德福莫特羅（阿斯利康公司生產）160/4.5 g，2次/d，每次1吸，作為基礎用藥，一旦有急性加重，必要時允許患者使用2受體激動劑（沙丁胺醇氣霧劑，每噴100 g，2噴/次，3次/d或4次/d）緩解癥狀，也可以根據醫囑選擇藥物，記錄所用藥物名稱，用法，服用時間。若患者癥狀仍不能緩解需入院治療者，長期使用糖皮質激素進行治療者與入院治療可能影響結果者，將該病例剔除。

觀察組穴位注射雙側足三里穴和定喘穴，腧穴定位標準參照文獻[3]。具體操作方法：患者坐位，先準確定位，并在雙側足三里和定喘穴處進行常規消毒，一次性注射器抽取BCG-PSN注射液2 ml（浙江萬馬藥業有限公司生產，規格：0.35mg/支，國藥準字S33020001），分別在上述穴位進行穴位注射，每穴0.5ml，操作時快速刺入皮下，行捻轉提插手法促使患者得氣，進針深度根據患者體型胖瘦在5～10 mm，患者產生酸脹感后緩慢推注藥液0.5 ml。隔天治療1次，14次為1個療程，共3個療程。

對照組一次性注射器抽取BCG-PSN注射液2ml，進行常規肌肉注射。隔天治療1次，14次為1個療程，共3個療程。

1.4 觀察指標哮喘控制測試問卷（ACT）評分參照文獻[4]進行，治療前及在接受治療的當年12月份對兩組患者進行ACT評分。T細胞亞群的測定：清晨空腹抽取2ml靜脈血抗凝，分離血清，置－20℃冰箱保存待測，采用全血直標法流式細胞術檢測T細胞亞群，分析CD4+、CD8+細胞百分率，并計算CD4+/ CD8+值。試劑盒購自蘇州卡爾文生物科技有限公司。

1.5 統計方法采用SPSS 15.0統計軟件進行數據分析，計量資料以均數±標準差表示，采用檢驗；計數資料以率表示，采用2檢驗。＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者治療前后ACT評分比較

2.2 兩組患者治療前后外周血T細胞亞群比較治療前觀察組和對照組CD4+、CD8+及CD4+/CD8+比值差異均無統計學意義（≤0.606，＞0.05）；治療后兩組患者均出現CD4+下降、CD8+升高及CD4+/CD8+比值下降，與治療前比較差異均有統計學意義（≥3.151，＜0.05），治療后觀察組患者的CD4+下降、CD8+升高，與對照組差異有統計學意義（=2.311、2.641，＜0.05），CD4+CD8+比值差異有統計學意義（=3.423，＜0.05）。見表2。

2.3 不良反應試驗過程中觀察組和對照組各1例在BCG-PSN局部注射處存在輕微發紅、腫脹，但均在24 h內消退；局部注射后有時會有少量出血，經長時間按壓后可以止血；未見暈針患者；部分患者自覺注射過程中有疼痛感，但可以忍受；無嚴重不良反應發生。

3 討論

外周血中T細胞亞群及比值是反映機體免疫調節平衡狀況的重要指標，也是疾病嚴重程度和預后的重要標志之一[5]。T細胞在機體細胞免疫應答中起重要調節作用，依據表型和功能特性分為不同的類型及亞群，各亞群淋巴細胞的表型、生物學特征及其在免疫應答中所起的作用各不相同。CD4+T細胞具有輔助T、B淋巴細胞發生應答的功能；CD8+T細胞對非已抗原誘發的免疫應答具有抑制作用。T淋巴細胞亞群紊亂，輔助T細胞（CD4+）水平明顯降低，抑制T細胞（CD8+）水平明顯升高，CD4+/CD8+比值失調，最終導致IgE升高和氣道高反應性而誘導哮喘發作[6]。另外CD4+/CD8+比值一定程度上可直接了解機體細胞免疫功能情況，

所以檢測T淋巴細胞亞群可以更深刻的了解機體免疫功能。本研究顯示，經卡介苗多糖核酸穴位注射后患者的CD4+下降，CD8+升高，CD4+/CD8+比值下降，且觀察組優于對照組，從而推測其作用機制可能通過免疫調節增強哮喘患者Th1細胞功能，抑制其亢進的Th2反應，從而一定程度上調整Thl/Th2細胞失衡，改善機體免疫功能，減少哮喘發作次數、減輕哮喘發作程度，控制哮喘的發生。

表1 兩組患者治療前后ACT評分比較

表2 兩組治療前后CD4+、CD8+及CD4+CD8+比值的比較

BCG-PSN是卡介苗制劑中的一種，是卡介苗菌體成分提取物。實驗研究發現，BCG-PSN有很強的非特異性免疫刺激作用，能誘導機體產生TH1類型免疫反應，表現為促進TH細胞向TH1型細胞分化，并且活化TH1細胞、巨噬細胞及單核細胞，顯著增加細胞因子干擾素-（IFN-）、白細胞介素12（IL-12）等的分泌，阻斷IgE的合成，促使肺泡灌洗液中IL-4、IL-5等TH2型細胞因子的水平降低，降低氣道高反應[7]。臨床研究也發現卡介苗制劑能有效調節機體免疫功能，對支氣管哮喘患者采用卡介苗治療，可以誘導機體產生TH1類免疫反應，從而降低氣道高反應[8]。

支氣管哮喘祖國醫學稱之為“哮證”、“喘證”。肺為氣之主，腎為氣之根。發病機理不外乎肺、脾、腎虛損；脾為生痰之源，肺為貯痰之器；內有伏痰，復感外邪所致。冬病夏治，選擇三伏天刺激穴位易激發經氣，加上選用有增強免疫功能的BCG-PSN穴位注射，在藥物和穴位的雙重刺激下更能發揮調節陰陽、補腎納氣、宣肺平喘、健脾化痰的綜合效能。本研究證實，在夏季開展BCG-PSN穴位注射治療支氣管哮喘，可以明顯減少冬季節的哮喘發作次數，提高哮喘控制水平，改善哮喘患者生活質量。

[1]Elias JA,Lee CG,Zheng T,et al.New insights into the Pathogenesis of asthma[J]. J ClinInvest,2003,111(30):291-297.

[2]中華醫學會呼吸病學會哮喘學組．支氣管哮喘防治指南(支氣管哮喘的定義、診斷、治療和管理方案)[J]．中華結核和呼吸雜志,2008,31(3):177-185．

[3]國家質量監督檢驗檢疫總局,國家標準化管理委員會.腧穴名稱與定位[S]．北京:中國標準出版社,2006,6:23-25．

[4]Nathan RA.Sorkness CA.Kosinski M.et a1.Development of the Asthma Control Test:A survey for assesing asthma contro1[J].JAl-lergy Clin Inununol,2004, 113:59-65.

[5]SyjalaH,Surcel HM,HonenI.Low CD4/ CD8 T lymphocyte ratio inacute myocardial infarction[J].Clin Exp Immunol, 1991,83(2):326-328.

[6]吳祖群,沈華浩.T細胞在哮喘免疫調節中的作用[J].國外醫學:呼吸系統分冊, 2005,25(9):690-695

[7]李剛.哮喘患者血清TNF-、IL-13、IgE水平變化及意義[J].山東醫藥,2007,47 (20):57-58．

[8]周新.哮喘治療新藥研究進展[J].臨床肺科雜志,2009,14(6):711-713．

10.3969/j.issn.1671-0800.2014.12.021

R562.2+5

A

1671-0800(2014)12-1499-03

蔡宛如名老中醫傳承工作室建設經費資助項目（GZS2012012）；浙江省中醫藥管理局適宜技術項目（2010zs002）

310005 杭州，浙江中醫藥大學附屬第二醫院（蔣朱秀、江勁、李敏靜）；浙江中醫藥大學附屬第三醫院（陳利芳)

蔣朱秀，Email：5792673@qq.com