浙北地區過敏性疾病患者過敏原檢測結果分析

黃 佳 胡麗華 華海飛 潘 露 林 峰

·技術與方法·

浙北地區過敏性疾病患者過敏原檢測結果分析

黃 佳 胡麗華 華海飛 潘 露 林 峰

目的: 明確浙北地區過敏性疾病患者的過敏原種類。方法: 采用免疫印跡法，對該地區1809例過敏性疾病患者的血清進行吸入性過敏原和食入性過敏原檢測。結果: 浙北地區吸入性過敏原和食入性過敏原陽性率分別為87.7%和46.2%。結論: 浙北地區以吸入性過敏原為主。

過敏性疾病； 過敏原； 免疫印跡法

為了解浙北地區過敏性疾病過敏原情況，對1809例于2010年8月至2012年11月來我院就診的過敏性疾病患者進行過敏原分析，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 1809例過敏性疾病患者，其中女1127例(62.3%)，男682例(37.7%)，年齡1～83歲，平均33.24歲。疾病包括蕁麻疹、濕疹、特應性皮炎、過敏性鼻炎、哮喘。所有病例均經臨床確診。除外因壓力、日光、寒冷、運動等物理因素和藥物所致的蕁麻疹，無全身系統性疾病的損害，如結締組織病、病毒感染、細菌感染等，排除妊娠及哺乳期婦女。所有患者血液標本采集前均停用長效抗組胺藥1周以上，短效抗組胺藥3天以上，糖皮質激素或免疫抑制劑1個月以上。

1.2 方法 對所有的過敏性疾病患者靜脈采血5 mL，離心后取血清進行免疫印跡法檢測，試劑采用MEDIWISS Analytic GmbH公司生產的AllergyScreen過敏原診斷試劑。吸入性過敏原包括塵螨(粉塵螨、戶塵螨)、草組合(矮豚草、蒿草)、貓狗毛皮屑、蟑螂、霉菌組合(點青霉、交鏈孢霉、煙曲霉、分枝孢霉)、樹組合(柏樹、榆樹、梧桐、柳樹、三角葉楊)、葎草。食入性過敏原包括雞蛋、牛奶、魚蝦蟹、牛羊肉、堅果(腰果、花生、黃豆)、芒果、小麥。

1.3 操作步驟 嚴格按照試劑說明書進行操作。(1)將試劑恢復到室溫(20～22℃)，用經蒸餾水以1∶25稀釋的洗脫液濕潤硝酸纖維素膜；(2)棄去洗脫液，在檢測板上加入250μL的血清標本，在混勻器上室溫孵育45 min；(3)沖洗后加入250μL抗抗體，在混勻器上室溫孵育45 min；(4)沖洗后加250μL鏈霉親和素標記物，在混勻器上室溫孵育20min；(5)沖洗后加入250μL底物，在混勻器上室溫孵育20 min，發生顏色反應；(6)流水沖洗終止底物酶反應。

1.4 結果觀察 對于每種過敏原，試劑條上顏色的深淺同患者血清中的特異性IgE抗體含量成正比。完全干燥后將試劑條插入Rapidreader閱讀儀上讀取結果，連接計算機即可進行量化分析。

1.5 結果判斷 陽性對照(質控線)均為紫色，呈陽性反應。檢測結果分成0～6級:(1)把過敏原特異性IgE＜0.35 IU/m L，定為陰性反應，為0級；(2)＞0.35 IU/mL定為陽性反應，其中0.35～0.69 IU/mL為1級(低)；0.70～3.49 IU/mL為2級(增加)；(3)＞3.5 IU/ mL，定為強陽性反應；3.50～17.49 IU/mL為3級(顯著增加)；(4)17.50～49.90 IU/m L為4級(高)；(5) 50～100 IU/mL為5級(較高)；(6)＞100 IU/mL為6級(極高)。

1.6 統計學方法 所有數據經SPSS 21.0統計軟件分析，組間差異采用卡方檢驗，P＜0.05為有統計學意義。

2 結果

2.1 過敏原檢測情況 見表1。1809例過敏性疾病患者中過敏原陽性者881例，占48.7%，其中吸入性過敏原陽性474例，占26.2%，食入性過敏原陽性108例，占6.0%，兩組均陽性299例，占16.5%。吸入組過敏原陽性率高于食入組，兩組比較差異有統計學意義(P＜0.05)。

表1 1809例過敏原檢測情況

2.2 吸入性和食入性過敏原檢測陽性情況 見表2和表3。在吸入性過敏原中，塵螨(粉塵螨、戶塵螨)的陽性率最高，占31.2%，其余依次為蟑螂、草組合(矮豚草、蒿草)、樹組合(柏樹、榆樹、梧桐、柳樹、三角葉楊)、葎草、霉菌組合(點青霉、交鏈孢霉、煙曲霉、分枝孢霉)和貓狗毛皮屑，陽性率依次為13.1%、12.9%、9.7%、9.1%、6.7%和4.5%。在食入性過敏原中，以牛奶、小麥、堅果(腰果、花生、黃豆)、芒果為主，陽性率分別為9.9%、9.6%、9.2%、8.7%，魚蝦蟹、雞蛋(雞蛋白、雞蛋黃)和牛羊肉的陽性率比較低，分別為3.9%、2.6%和1.3%。

2.3 同一患者可多種過敏原同時陽性 過敏性疾病可能是由1種過敏原引起，也可以是由2種或2種以上過敏原引起。同一患者同時多種過敏原陽性情況見表4。881例陽性患者中，對2種及以上過敏原有陽性反應有472例，占53.6%。

表2 吸入性過敏原檢測情況

表3 食入性過敏原檢測情況

2.4 不同季節過敏原情況 各季節吸入性過敏原的陽性率有區別，見表5。塵螨、草組合、貓狗毛皮屑、蟑螂和霉菌組合在夏秋季陽性率比春冬兩季高，樹組合和葎草陽性率則在春夏兩季較高。

表4 同一患者同時多種過敏原陽性情況

表5 不同季節吸入性過敏原的情況

3 討論

過敏性疾病病因復雜，發病機制中包括變態反應和非變態反應。IgE水平和細胞因子的變化一直是研究中的重點。通過特異性的IgE抗體檢測可幫助尋找過敏原。IgE抗體是親細胞性抗體，當機體遇到同一抗原時，則在肥大細胞表面發生抗原－抗體反應，引起肥大細胞等脫顆粒反應，釋放化學介質，導致各種相應臨床表現。

資料顯示，浙北地區1809例過敏性疾病患者中過敏原陽性者881例，占48.7%。過敏原陽性者以吸入性過敏原為主，其中排前3位的是塵螨(31.2%)、蟑螂(13.1%)、草組合(12.9%)，與國內報道基本相符。1浙北地區氣溫適中、雨水充沛、空氣濕潤，非常適合塵螨的滋生和蟑螂的繁殖。食入性過敏原以牛奶、小麥、堅果為主。小麥的陽性率高于其他地區，與國內報道不一致，2這可能與浙北地區是浙江小麥的主產區有關，對小麥的接觸機會比其他地區多。

資料顯示，同一患者可同時多種過敏原呈陽性，對3種及以下過敏原呈陽性反應的占75.1%，與當前國內報道基本相符，3提示大多數患者對多種過敏原呈陽性反應。可能是由于存在同時致敏，或者反應過程中許多炎癥因子及相關分子表達上調，患者處于高敏狀態，增加了新過敏原致敏的可能性；也可能是由于交叉過敏的存在，所以當一種過敏原致敏后，再接觸含有相同致敏蛋白質序列的物質也容易發生過敏。因此，患者可同時對多種變應原過敏，這種現象也提示單一變應原脫敏治療效果不佳的原因。4

資料顯示，吸入性植物過敏原中，草組合的陽性率在夏秋季較高，5樹組合、葎草的陽性率在春夏季較高，這與其各自的花期有關。草組合中的矮豚草花期在7～9月底、蒿草的花期在春末夏初。樹組合中的各樹木花期在3～7月，葎草的花期在6～10月。這時期花粉隨風飄在空氣中，極易誘導過敏者產生過敏反應。

AllergyScreen過敏原檢測系統其局限性仍不可避免，不能憑任何一個試驗結果作出最終臨床診斷。陽性結果并不能完全說明患者對該物質過敏，因為大量植物或動物類過敏原中含有低聚糖側鏈的糖蛋白類，由于它們結構的相似性，可引起很強的交叉反應。如草類與小麥、花生、瓜類等有交叉反應，樺樹與榛子、蘋果、胡蘿卜等有交叉反應。同樣，本試劑盒中只有幾十種過敏原，全部陰性也不能排除對不包括在這試驗內的其他過敏原的過敏反應，應積極尋找其他過敏原。因此，應由有經驗的醫生根據病史和檢測特異過敏原的試驗來結合分析病情。

引起過敏性疾病的過敏原種類繁多，常因環境、地理位置、生活習慣不同而有所差異，故對其防治應考慮差異性。對于螨蟲過敏患者要保持室內通風干燥，經常清潔除塵，勤洗勤曬衣被、床單，定期清洗消毒空調過濾網，對于因塵螨過敏而導致的疾病，目前可采用脫敏療法，可以減輕癥狀和疾病的發作。對于花粉過敏者，減少與各種花粉接觸，平時盡量減少高蛋白質、高熱量的飲食，少食用精加工食物。對于食物過敏患者，應盡量避免食用。準確地查找出過敏原，既可為臨床過敏性疾病的診斷和治療提供依據，又可提示患者在日常生活中避免接觸導致自身過敏的致病因素，具有重要的臨床意義。

1周海林，胡白，蔣法興，等.安徽省1062例慢性蕁麻疹過敏原檢測結果分析.安徽醫藥，2012，16(11):1615－1617.

2張玲，吳麗華，肖玲，等.廣東地區11728例過敏原檢測結果分析.檢驗醫學與臨床，2012，9(6):657－658，660.

3韋海鵬，鐘永軍，李曉華，等.變態反應性皮膚病過敏原檢測結果分析.右江醫學，2013，41(2):240－241.

4張燕，史學娟.808例變態反應性疾病敏篩過敏原檢測結果分析.重慶醫學，2013，42(10):1142－1145.

5張蕊娜，許穎，段曉涵，等.過敏性皮膚病1774例過敏原檢測結果分析.中國皮膚性病學雜志，2012，26(4):317－318，329.

(收稿:2013－09－09 修回:2013－11－24)

Analysis of the in vitro allergen testing of patients w ith allergic diseases in north areas of Zhejiang

HUANG Jia，HU Li-hua，HUAHai-fei，et al.Institute of Dermatology of Zhejiang Province，313200

Objective:To determine the allergens among the patients with allergic diseases in north areas of Zhejiang.Methods:The serum levels of inhaled allergens and food allergens of 1809 patientswith allergic diseaseswere detected by Western blotting.Results:The positivity rates of inhalation allerges and food allerges were 87.7%and 46.2%，respectively.Conclusion:The main allergens were inhalation allergens.in north areas of Zhejiang.

allergic disease；allergen；Western blotting

·經驗交流·

浙江省皮膚病防治研究所檢驗科，德清，313200