高效液相色譜法測定鹽酸莫西沙星含量及其有關物質

高宏偉

摘 要：采用高效液相色譜法對鹽酸莫西沙星含量及其有關物質進行檢測，苯甲硅烷基鍵和硅膠色譜柱（250mm×4.0mm，5μm），流動相為甲醇-四丁基硫酸氫銨磷酸鹽緩沖液（34∶66），檢測波長為293nm，柱溫為45℃，流速為1.0mL/min。結果表明，所建立的方法專屬性、精密度、準確度、耐用性均較好，可用于鹽酸莫西沙星含量及其有關物質的測定。

關鍵詞：高效液相色譜法；鹽酸莫西沙星；檢測

1 材料

1.1 儀器

高效液相色譜儀（Hitachi Chromaster-5430檢測器，Hitachi Chromaster-5310 柱溫箱，Hitachi Chromaster-5110 泵），Chromaster色譜工作站，日本Hitachi公司；Intersil ph（250mm×4.0mm，5μm） 色譜柱； AR1140電子天平。

1.2 試劑

鹽酸莫西沙星對照品、鹽酸莫西沙星峰位對照品（美國藥典中雜質對照品，含有雜質A～E）、鹽酸莫西沙星雜質對照品，德國Bayer公司； 鹽酸莫西沙星片（規格： 400mg） ， 德國Bayer公司；甲醇為色譜純試劑； 其余試劑為市售分析純試劑。水為純凈水。

Moxifloxacin hydrochloride R1=F R2=OCH3

Impurity A：6，8-fluor-moxifloxacin R1=F R2=F

Impurity B：6，8-dimethoxy-moxifloxacin R1=OCH3 R2=OCH3

Impurity C：8-ethoxy-moxifloxacin R1=F R2=OC2H5

Impurity D：6-methoxy-8-fluor-moxifloxacin R1=OCH3 R2=F

Impurity E：8-hydroxy-moxifloacin R1=F R2=OH

Fig.1 Structure of moxifloxacin hydrochloride and its related substances

2 方法

2.1 色譜條件與系統適應性

色譜柱：Intersil ph（250mm×4.0mm，5μm）；流動相：四丁基硫酸氫銨磷酸鹽緩沖液（取磷酸二氫鉀1.0g與四丁基硫酸氫銨0.50g，加水溶解并稀釋成1000ml，用磷酸調節pH至2.5）甲醇（66：34）；流速：1.0ml/min；柱溫：40℃；檢測波長：293nm；進樣量：20μl。理論板數按鹽酸莫西沙星峰計算不低于2000。各物質間的分離度應大于1.5，拖尾因子應小于2.0。

2.2 溶液配制

對照品溶液：取鹽酸莫西沙星對照品約10mg，置10ml容量瓶中，加磷酸溶液（1→1000）溶解并稀釋至刻度，搖勻。供試品溶液：取本品5片，研細，精密稱取適量（約相當于莫西沙星100mg），置100ml容量瓶中，加磷酸溶液（1→1000）溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取適量用水稀釋成0.1mg/ml的溶液。

3 結果與討論

3.1 專屬性試驗

取供試品溶液分別進行酸、堿、氧化、熱及光照破壞試驗，分別加入1mol/L鹽酸5mL，1mol/L氫氧化鈉5mL，30%雙氧水5mL調節pH至中性，直火燒2h，在4500lx光照條件暴露24h后，取續濾液20μl進樣，記錄色譜圖。主要降解產物經與雜質峰位對照品比較均為雜質A～E，主成分峰與降解雜質峰分離良好。

3.2 線性相關性試驗

精密稱取鹽酸莫西沙星對照品適量，加流動相溶解并定量稀釋制成濃度約為1mg/ml的貯備液。精密量取貯備液0.2、0.4、0.8、1.0、1.2、1.5、2.0ml，置10ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，各進樣20μl，記錄色譜圖。得線性回歸方程，結果表明，莫西沙星在0.02mg/ml～0.2mg/ml范圍內與峰面積呈良好的線性關系。

3.3 儀器精密度試驗

取濃度約為0.1mg/ml的鹽酸莫西沙星對照品溶液，連續進樣6次，各進樣20μl，記錄峰面積。平均峰面積為6384032，RSD為0.34%。結果表明儀器精密度良好。

3.4 回收率試驗

精密稱取鹽酸莫西沙星對照品適量，加流動相溶解并定量稀釋制成濃度約1mg/ml的對照品貯備液。加流動相溶解并稀釋制成0.1mg/ml的溶液，作為對照溶液；精密量取對照品貯備液0.8、1.0、1.2ml各3份至10ml容量瓶，加入處方量混合空白輔料，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；計算莫西沙星的回收率，平均回收率為100.2%，RSD為0.87%。

3.5 樣品測定

取對照品溶液和供試品溶液，測定三批樣品含量及有關物質。批號BJ07725，含量99.6%，有關物質0.045%；批號BJ12685，含量100.1%，有關物質0.081%；批號BJ08256，含量99.8%，有關物質0.054%。

參考文獻

[1]Sunderland J， Tobin CM， Hedges A J， et al. Antimicrobial activity of fluoroquinolone photodegradation products determinated by parallel-line bioassay and high performance liquid chromatography[J]. J Antimicrob Chemother，2001；47

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