胡蘆巴對糖尿病大鼠腎皮質氧化應激損傷的影響

萬明 劉紅梅 吳燕倪

摘 要：目的 觀察胡蘆巴對糖尿病大鼠腎皮質氧化應激指標丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）水平，研究胡蘆巴對糖尿病大鼠腎皮質氧化應激損傷的影響。方法 將42只SD雄性大鼠應用1%鏈脲佐菌素（STZ）制造糖尿病大鼠模型。13周后將造模成功的24只大鼠隨機分為糖尿病組和胡蘆巴干預組，以12只健康大鼠作為對照組。給藥組大鼠給予胡蘆巴每日固定時間連續灌胃2周，糖尿病組和對照組用自來水連續灌胃2周，至第14周結束。第14周結束時，檢測3組大鼠的血糖、體重、血肌酐、血尿素氮。取腎組織，制石蠟切片做PAS染色觀察腎小球腎小管形態學變化。取10%腎皮質組織勻漿后測定丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）水平。結果 與對照組相比，糖尿病足大鼠血糖、血肌酐、血尿素氮均顯著升高（t=-50.018、-19.376、-19.613，均P<0.0167），胡蘆巴干預后，給藥組大鼠血肌酐、血尿素氮比糖尿病足有好轉趨勢（t=7.625、8.453，均P<0.0167），而給藥組體重和血糖與糖尿病組相比差異無統計學意義（t=-1.652、1.764，均P>0.0167）。與對照組相比，糖尿病組MDA水平明顯增加（t=-10.542，P<0.0167），而SOD、CAT水平降低（t=8.018、8.167，P<0.0167）；而與糖尿病足相比，給藥組SOD水平升高（t=-12.203，P<0.0167），MDA水平降低（t=4.368，P<0.0167），兩組CAT水平無統計學意義（t=-3.029，P>0.0167）。腎組織切片顯示對照組大鼠基底膜完整無增厚，糖尿病組大鼠腎小球系膜基質增多，系膜細胞增生，給藥組較糖尿病組減輕。結論 胡蘆巴對糖尿病大鼠腎皮質氧化應激損傷有一定的保護作用。

關鍵詞：復方胡蘆巴 糖尿病 影響 動物實驗

中圖分類號：R285.5；G64 文獻標識碼：A 文章編號：1672-3791（2014）11（a）-0194-02

糖尿病腎病是糖尿病最常見的慢性并發癥之一，也是糖尿病致死、致殘的主要原因之一。據統計，大約40%的糖尿病人發生糖尿病腎病。糖尿病腎病臨床缺乏有效的治療手段。因此，預防或延緩糖尿病腎病的發生和發展對提高糖尿病患者的生存、改善生活質量和減輕糖尿病帶來的沉重負擔具有十分重要的社會意義和經濟意義。胡蘆巴對糖尿病動物有降血糖活性，兼具磺酰脲類和雙胍類口服降糖藥的特點。近年來，胡蘆巴的抗糖尿病作用越來越受到關注，其他作者在不同糖尿病動物模型的研究結果也證實了胡蘆巴具有降低血糖的作用。

1 材料

1.1 動物

SD大鼠、清潔級、體重180±20 g，雌雄各半，由新疆醫科大學實驗動物中心提供，合格證號SCXK（新）2003-0001。

1.2 藥品、試劑與儀器

胡蘆巴（新疆特豐制藥廠，批號20130511）；鏈脲佐菌素（STZ，美國Sigma公司）；三諾安穩血糖測試儀；MDA、CAT、SOD試劑盒均購自南京建成生物公司。BECXMAN全自動生化分析儀（美國貝克曼公司），721分光光度計（上海第三分析儀器廠），高速離心機，組織勻漿器，電子分析天平等。

2 方法

2.1 動物給藥方法及模型的建立

將30只SD雄性大鼠應用1%鏈脲佐菌素（STZ）制造糖尿病大鼠模型。13周后將造模成功的24只大鼠隨機分為糖尿病組和胡蘆巴干預組，以12只健康大鼠作為對照組。糖尿病組大鼠給予胡蘆巴每日固定時間連續灌胃2周，糖尿病組和給藥組用自來水連續灌胃2周，至第14周結束。

2.2 指標的檢測

第14周結束時，檢測3組大鼠的血糖、體重、血肌酐、血尿素氮。取腎組織，制石蠟切片做PAS染色觀察腎小球腎小管形態學變化。

2.3 數據處理

采用SPSS17.0統計軟件進行統計學處理。數據用均數±標準差（）表示，組間比較采用單因素方差分析和獨立樣本t檢驗，三組間的兩兩比較采用Bonferroni法進行調整，以P<0.0167為差異有統計學意義。

3 結果

3.1 胡蘆巴對各組大鼠的生化指標的影響

糖尿病組大鼠多尿、多飲、體重減輕較明顯。與對照組比較，糖尿病組和給藥組血糖顯著升高，差異有統計學意義（t=-50.018、-60.506，均P<0.0167）；給藥組血糖較糖尿病組低，但兩組間差異無統計學意義（t=1.764，P=0.088）；與對照組比較，糖尿病組和給藥組體重明顯下降，差異有統計學意義（t=5.768、9.605，均P<0.0167）；糖尿病組與給藥組體重差異無統計學意義（t=-1.767，P=0.108）（表1）。與對照組比較，糖尿病組和給藥組血肌酐顯著升高，差異有統計學意義（t=-19.376、-19.106，均 P<0.0167）；給藥組血肌酐較糖尿病組下降，差異有統計學意義（t=7.625，P<0.0167）。與對照組比較，糖尿病組和給藥組血尿素氮顯著升高，差異有統計學意義（t=-19.613、-10.454，均P<0.0167）；給藥組血尿素氮較糖尿病組下降，差異有統計學意義（t= 8.453，P<0.0167）（表1）。

3.2 胡蘆巴對各組大鼠MDA、SOD、CAT水平的比較

與對照組比較，糖尿病組和給藥組MDA明顯增加，差異有統計學意義（t=-10.542、-9.045，均P<0.0167）；給藥組腎組織MDA較糖尿病組有所下降（t=4.368，P<0.0167）。與對照組比較，糖尿病組SOD明顯下降，差異有統計學意義（t=8.018，P<0.0167），給藥組下降不明顯。給藥組SOD水平較糖尿病組增加，差異有統計學意義（t=-12.203，P<0.0167）。糖尿病組和給藥組CAT水平較對照組明顯下降，差異有統計學意義（t=8.167、4.733，均P<0.0167）；而給藥組CAT水平較糖尿病組有所增加，但兩組差異無統計學意義（t=-3.076，P=0.041）（表2）。

3.3 腎組織學病理變化

光鏡下顯示，正常組大鼠腎組織結構完整、清晰，無明顯病理學改變。糖尿病組大鼠腎小球系膜基質明顯增多，系膜細胞增生。給藥組腎小球膜細胞及基質較糖尿病組增生明顯減輕，基地膜增厚有減輕。

4 討論

氧化應激是糖尿病的重要病理生理改變，在糖尿病腎病發病機制中起重要作用，糖尿病時，以腎組織中糖代謝紊亂為主的多種因素綜合造成腎組織中化學性質活潑的反應氧產物產生過多，破壞腎組織正常的氧化＼還原反應的動態平衡，造成腎組織的氧化應激狀態，啟動糖尿病的發病并參與病情發展。抑制腎臟的氧化應激，可有效治療糖尿病腎病。

該實驗發現，糖尿病大鼠造模成功后，血糖、血尿素氮和肌酐、腎小球體積、腎小球系膜面積都比對照組大鼠要高，意味著糖尿病大鼠已經出現腎臟損害。經過胡蘆巴治療后，糖尿病大鼠的腎功能等各項指標得到了不同程度的改善。實驗中糖尿病大鼠腎皮質組織MDA活性顯著升高，SOD、CAT則顯著下降，胡蘆巴給藥組大鼠MDA含量較糖尿病大鼠低，而抗氧化酶SOD、CAT水平上升，說明胡蘆巴對糖尿病狀態下腎臟內氧自由基代謝具有調節作用，能提高機體的抗氧化能力。該實驗通過胡蘆巴降低血糖，改善其脂代謝紊亂過程，提高腎臟抗氧化酶的活性，抑制腎臟氧化損傷，對糖尿病腎病具有防治作用。

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