奶子藤莖的化學成分研究

李世源，楊春濤，曾曉麗，江志勇，田 凱，孫靜賢，黃相中,2

(1. 云南民族大學 云南省生物高分子功能材料工程技術研究中心，云南 昆明 650500；2. 中國醫學科學院北京協和醫學院藥物研究所 天然藥物活性物質與功能國家重點實驗室，北京100050)

奶子藤(Bousigoniamekongensis)是夾竹桃科(Apocynaceae)奶子藤屬的植物. 分布在我國云南等地，越南、老撾也有，生長于海拔500～800 m的地區，多生長在山地疏林中或河旁潮濕地方，目前尚未由人工引種栽培. 奶子藤是傣藥“雅解沙把”(百解膠囊)的重要成分之一，具有清熱解毒、定心安神的作用[1]. 目前，除了郝小江等[2]從奶子藤中分離得到2個吲哚類生物堿外，尚未見到有關奶子藤化學成分的其他報道. 本實驗運用多種色譜方法和波譜技術，對奶子藤的化學成分進行了研究，從中分離得到8個化合物，分別鑒定為：3,4-二羥基苯甲醛(1)，3,4-二羥基苯甲酸(2)，2,2-二甲基-7-羥基色滿(3)，齊墩果酸(4)，熊果酸(5)，β-谷甾醇(6)，5,7,3′,4′-四羥基黃酮醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(7)，5,7,3′,4′-四羥基黃酮醇-3-O-α-L-鼠李糖苷(8).

1 實驗材料與方法

1.1 實驗材料

材料于2012年9月采自云南省西雙版納景洪，由云南民族大學楊青松副教授鑒定為奶子藤(Bousigoniamekongensis)，標本現存放于云南民族大學化學與生物技術學院標本室. 柱層析硅膠為青島海洋化工廠生產的100～200和200～300目硅膠，薄層層析用硅膠為青島海洋化工廠生產的GF254薄層高效層析板，色譜反相硅膠為德國Merck公司生產的Lichroprep Rp-18 gel (40～63 lm)，凝膠為瑞典Pharmacia公司生產的Sephadex LH-20(20～150 lm)， MCI為日本東京Mitsubishi公司生產的 MCI gel CHP-20P (70～150 lm).

1.2 儀器

紫外分光光度計(Aglient 8453)；國產X-4數字顯微熔點儀(北京泰克儀器有限公司，未校正)；Nicoiet iS10型紅外分光光度計(美國賽默飛世爾科技有限公司)，KBr壓片；Bruker AV400核磁共振儀，TMS為內標；UltraScan ESI-MS (bruker)；制備色譜柱：Agilent ZORBAX SB-C1821.2 mm×250 mm, 7 μm；Agilent 1260制備色譜儀(包括單元泵，手動進樣器，二極管陣列檢測器DAD，Chemstation 色譜工作站)；半制備色譜柱：YMC-Pack ODS-A 10 mm×250 mm, 7 μm；Agilent 1260半制備色譜儀(包括二元泵，手動進樣器，多波長檢測器MWD，Chemstation 色譜工作站).

1.3 提取和分離

10 kg奶子藤莖粉碎后，采用90%的工業乙醇(80 L)冷提3次，收集提取液，減壓濃縮得到粗提浸膏，分別以石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，得石油醚部分40 g，乙酸乙酯部分440 g，正丁醇部分250 g.采用石油醚-乙酸乙酯、石油醚-丙酮、氯仿-甲醇等溶劑體系對各部分進行梯度洗脫，反復柱層析，最終分離得到化合物1～8.

1.4 結構鑒定

化合物(1)：C7H6O3, 白色晶體(丙酮), m.p. 130～131 ℃. ESI-MS (m/z)138[M]+.1H NMR(CD3OD, 400 MHz)δ:7.27(1H, d,J=2.0 Hz, H-2), 6.88(1H, d,J=7.8Hz, H-5), 7.25(1H, dd,J=2.0, 7.8 Hz H-6), 9.63(1H, s, CHO).13C NMR(CD3OD, 100 MHz)δ：129.4(C-1), 118.1(C-2), 145.8(C-3), 152.4(C-4), 118.1(C-5), 125.1(C-6), 191.9(C-CHO). 以上數據與文獻[3]對照一致， 鑒定該化合物為3,4-二羥基苯甲醛.

化合物(2)：C7H6O4, 白色針狀結晶(甲醇)，m.p. 211～213 ℃. ESI-MS(m/z)154[M]+.1H NMR(CD3OD, 400 MHz)δ:7.25(1H, s, H-2), 7.23(1H, d,J=7.8 Hz, H-5), 6.60(1H, d,J=7.8 Hz H-6).13C NMR (CD3OD, 100 MHz)δ：123.1(C-1), 117.7(C-2), 146.1(C-3), 151.6(C-4), 115.8(C-5), 123.9(C-6), 170.3(C-COOH). 以上數據與文獻[3]對照一致, 鑒定該化合物為3,4-二羥基苯甲酸.

化合物(3)：C11H14O2，白色結晶(甲醇)，m.p. 67～68 ℃. ESI-MS (m/z)178[M]+.1H NMR(CD3OD, 400 MHz)δ:1.17(6H, s, Me-H), 1.65(2H, m, H-4), 2.60(2H, m, H-5), 6.70(1H, d,J=8.0 Hz H-7), 7.62(1H, d,J=6.8 Hz H-8), 7.70(1H, s, H-6);13C NMR(CD3OD, 100 MHz)δ：71.6(C-2), 44.7(C-3), 26.2(C-4), 133.0(C-5), 130.5(C-6), 161.0(C-7), 130.4(C-8), 161.1(C-9), 115.5(C-10), 29.1(C-Me). 以上1H NMR和熔點數據與文獻[4]對照一致，鑒定該化合物為2,2-二甲基-7-羥基色滿.

化合物(4)：C30H48O3，無色針狀結晶(氯仿)，m.p. 308～310 ℃. ESI-MS(m/z)456[M]+.1H NMR(CDCl3, 400 MHz)δ：5.27(1H, t,J=3.2 Hz, H-12), 3.24(1H, t,J=5.4 Hz, H-3);13C NMR(CDCl3, 100 MHz)δ：38.6(C-1), 27.0(C-2), 79.2(C-3), 39.2(C-4), 55.2(C-5), 18.7(C-6), 32.6(C-7), 39.6(C-8), 47.5(C-9), 37.4(C-10), 23.3(C-11), 122.7(C-12), 143.3(C-13), 41.6(C-14), 27.6(C-15), 23.4(C-16), 46.4(C-17), 41.5(C-18), 46.8(C-19), 30.6(C-20), 33.8(C-21), 32.9(C-22), 27.9(C-23), 15.4(C-24), 15.1(C-25), 26.6(C-26), 16.7(C-27), 182.8(C-28), 33.1(C-29), 23.9(C-30).以上數據與文獻[5]對照一致, 鑒定該化合物為齊墩果酸.

化合物(5)：C30H48O3，白色無定形粉末，m.p. 285～286 ℃. ESI-MS9(m/z) 456[M]+. 乙醇-硫酸噴霧后加熱顯紫紅色與烏蘇酸對照品混合熔點不下降，ESI-MS，1H NMR，13C NMR數據與文獻[6]中報道一致，故鑒定該化合物為熊果酸.

化合物(6)：C29H50O，無色針晶(氯仿)，m.p. 138～140 ℃. ESI-MS (m/z)414[M]+. 在薄層板上與β-谷甾醇對照品對照Rf相同，測定混合熔點不下降，故鑒定該化合物為β-谷甾醇.

化合物(7)：C21H22O12，黃色無定形粉末，m.p.170～172 ℃. ESI-MS (m/z) 466[M]+.1H NMR(400 MHz, CD3OD)δ：7.80(1H, d,J=2.0 Hz, H-2′), 7.52(1H, dd,J=8.4, 2.0 Hz, H-6′), 6.82(1H, d,J=8.4 Hz, H-5′), 6.35(1H, d,J=2.0 Hz, H-8), 6.15(1H, d,J=2.0 Hz, H-6), 5.12(1H, d,J=7.6 Hz, H-1″);13C NMR(CD3OD, 100 MHz)δ:157.7(C-2), 135.6(C-3), 179.0(C-4), 162.3(C-5), 99.2(C-6), 164.3(C-7), 94.4(C-8), 157.8(C-9), 106.2(C-10), 122.5(C-l′), 116.4(C-2′), 145.9(C-3′), 148.5(C-4′), 116.5(C-5′), 122.7(C-6′), 102.3(C-l″), 74.8(C-2″), 78.5(C-3″), 71.3(C-4″), 78.7(C-5″), 62.3(C-6″). 以上數據與文獻[7]對照一致，鑒定該化合物為5,7,3′,4′-四羥基黃酮醇-3-O-β-D-葡萄糖苷.

化合物(8)：C21H22O11，黃色無定形粉末，m.p. 172～174 ℃. ESI-MS(m/z) 450[M]+.1H NMR (400 MHz, CD3COCD3)δ：7.53(1H, d,J=1.5 Hz, H-2′), 7.42(1H, dd,J=8.0, 1.6 Hz, H-6′), 7.00(1H, d,J=8.0 Hz, H-5′), 6.49(1H, d,J=2.0 Hz, H-8), 6.28(IH, d,J=2.0 Hz, H-6), 5.54(1H, s, H-1″); 4.24(1H, m, H-2″), 3.75(1H, m, H-3″), 3.36(1H, m, H-4″), 3.46(1H, m, H-5″), 0.93(3H, d,J=6.0 Hz, H-6″)13C NMR (CD3COCD3, 100 MHz)δ:157.9(C-2), 135.8(C-3), 179.3(C-4), 162.9(C-5), 99.4(C-6), 164.9(C-7), 94.5(C-8), 157.9(C-9), 105.7(C-10), 122.8(C-l′),116.1(C-2′), 145.8(C-3′), 148.9(C-4′), 116.7(C-5′), 122.5(C-6′), 102.7(C-l″), 72.0(C-2″), 71.4(C-3″), 72.9(C-4″), 71.3(C-5″), 17.7(C-6″). 以上數據與文獻對照[8]一致，鑒定該化合物為5,7,3′,4′-四羥基黃酮醇-3-O-α-L-鼠李糖苷.

2 結語

從奶子藤的乙醇提取物中分離得到8個化合物，所有化合物均為首次從該植物中分離得到，其中化合物3為首次從植物中分離得到. 本研究可為該植物的進一步開發利用提供一定的參考依據.

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