Ets-1在宮頸腺癌組織中的表達及預后研究

高 榮

(尚義縣醫院 婦產科，河北 尚義 076750)

宮頸腺癌是宮頸腺上皮細胞發生的惡性腫瘤，較宮頸鱗狀細胞癌少見，占子宮頸癌的5%～8%[1]。宮頸腺癌的發生是各種致病因素相互作用的結果，其主要體現在抑癌基因與癌基因的失衡。資料顯示，transformation specific-1(Ets-1)基因是一種原癌基因[2]，其在多種腫瘤(如胃癌、肺癌和結直腸癌等[3-5])中呈過度表達，但是在宮頸腺癌組織中的表達情況未見相關報道。現將Ets-1在宮頸腺癌組織中的表達、其與臨床病理因素的關系以及對患者預后的影響進行研究。

1 資料和方法

1.1臨床資料 收集2006年3月至2008年2月在尚義縣醫院就診的80例宮頸腺癌患者的資料，所有資料均經臨床病理醫師審核。患者年齡38～66(45.0±2.0)歲，其中≥45歲者41例、<45歲者39例。黏液腺癌75例、漿液性腺癌2例、子宮內膜型腺癌3例；腫瘤直徑≥2 cm者66例、<2 cm者14例；TNM分期：Ⅰ～Ⅱ期33例、Ⅲ～Ⅳ期47例。淋巴結轉移者55例、無轉移者25例；癌組織遠處轉移者33例，無遠處轉移者47例。患者之前均未接受過放化療治療。電話隨訪5年，其中5例失訪。同時從選取的80例患者中選出40例獲取其距腺癌0.3 cm處的癌旁組織。

1.2試劑和方法 即用型Ets-1兔抗人單克隆抗體及配套試劑購自福州邁新生物技術有限公司。免疫組織化學法采用EnVisionTM兩步法，具體操作步驟參照試劑盒說明書進行。陽性對照切片由福州邁新生物技術有限公司提供，陰性對照采用磷酸鹽緩沖液代替一抗制作。

1.3結果判斷 以細胞質和(或)細胞核出現黃色或黃褐色顆粒為陽性染色，根據著色范圍及強度進行判斷[5]。①選取5個高倍視野，計數陽性細胞所占的百分比、陽性細胞數<5%計0分、陽性細胞數5%～25%計1分、陽性細胞數26%～50%計2分、陽性細胞數>50%計3分；②按染色強度評分，不著色計0分、黃色計1分、棕黃色計2分、黃褐色計3分。兩種評分相加：0～2分為“-”；3～4分為“+”；5～6分為“++”。

1.4統計學方法 應用SPSS 17.0統計軟件分析處理相關數據，計數資料的比較采用χ2檢驗，采用Kaplan-Meier法進行生存分析，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1Ets-1蛋白在宮頸腺癌組織中的表達 Ets-1在宮頸腺癌組織中以細胞核著色，未見胞質著色(圖1)，Ets-1在癌旁組織中的正常宮頸腺體呈陰性表達，未見胞核或胞質著色(圖2)。在80例宮頸腺癌組織中，Ets-1呈陽者42例，陽性率為52.5%；在40例癌旁組織中陽性表達3例，陽性率7.5%，兩者比較差異有統計學意義(χ2=23.04，P<0.05)(表1)。

表1 Ets-1蛋白在宮頸腺癌組織中的表達 (例，%)

圖1 圖2

圖1Ets-1在宮頸腺癌組織中的陽性表達，著色定位于細胞核(免疫組織化學染色×100)圖2Ets-1在癌旁組織中的陰性表達，胞核或胞質均未著色(免疫組織化學染色×100)

2.2Ets-1在宮頸腺癌組織的表達與臨床參數的關系 Ets-1的表達與腫瘤大小、淋巴結轉移、遠處臟器轉移、TNM分期有關(χ2=6.57，6.13，6.67，3.87，P<0.05)，與患者年齡、腫瘤組織學類型無關(χ2=1.23，0.23，P>0.05)(表2)。

表2 Ets-1的表達與宮頸腺癌臨床病理因素的關系 (n=80)

2.3宮頸腺癌患者的生存分析 5年隨訪期間，80例宮頸腺癌患者中有5例失訪(包括2例陽性、3例陰性)，失訪率為6.25%。40例Ets-1表達陽性的患者中11例患者存活，生存率為27.50%；在35例Ets-1表達陰性的患者中有16例患者存活，生存率為45.71%，Ets-1蛋白陰性患者的生存率顯著高于陽性患者，差異有統計學意義(χ2=4.18，P=0.04)(圖3)。

圖3 Ets-1在宮頸腺癌患者生存分析

3 討 論

人類Ets-1基因位于染色體11q23上，編碼相對分子質量為54×103的蛋白質，其結構域位于C端，結構域的兩側是具有負性調節Ets-1與DNA結合的兩個抑制性結構域，中央為反式激活結構域。在正常的生理過程中，Ets-1參與了組織的發育，細胞的增殖分化、遷移、凋亡及新生血管的形成等[6-8]；在病理過程中，Ets-1不僅在腎小球硬化及間質纖維化進程中與基質金屬蛋白酶3關系密切，并可能通過Ets-1誘導基質金屬蛋白酶3蛋白的表達上調參與腎組織損傷及基質重塑過程[9]，而且其在多種惡性腫瘤中呈現過表達[10-13]。本研究顯示，Ets-1在宮頸腺癌組織中的表達遠遠高于癌旁組織，表明Ets-1的高表達一定程度上誘導了宮頸腺癌的發生。Ets-1的表達與年齡、組織學類型無關，而與腫瘤大小、淋巴結轉移、遠處臟器轉移、TNM分期有關，這與鄭麗娟等[14]研究結果類似。淋巴結及遠處臟器轉移是患者病情嚴重的表現，而這種情況與Ets-1的高表達有關，說明Ets-1可通過某種機制或途徑實現癌組織的浸潤轉移。有資料顯示，Ets-1能誘導活化基質金屬蛋白酶、尿激酶型血漿酶原激活因子等降解細胞外基質進而發生浸潤轉移[15]。可見，在宮頸腺癌發生及浸潤轉移的過程中，Ets-1的高表達不是單獨事件，而是多種因素相互作用的結果。生存分析結果顯示，Ets-1蛋白陰性患者生存率顯著高于陽性患者，說明Ets-1表達越高，患者生存越差。因而推測，Ets-1可作為判斷宮頸腺癌患者生存預后的指標。

總之，Ets-1在宮頸腺癌組織中呈現過表達，其表達水平越高，患者發生浸潤轉移的概率越大，其生存預后越差。因此，建議在評估宮頸腺癌患者生存預后方面，不僅要參考臨床相關指標，也可檢測組織中Ets-1的表達來間接推測。

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