小兒牛黃清心散預(yù)防大鼠驚厥作用的研究

李文娟， 蔣 莉， 陳恒勝， 陳小璐

（重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院 兒童發(fā)育疾病研究省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 兒科學(xué)重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，重慶市兒童發(fā)育重大疾病診治與預(yù)防國(guó)際科技合作基地， 重慶 400014）

小兒牛黃清心散預(yù)防大鼠驚厥作用的研究

李文娟， 蔣 莉*， 陳恒勝， 陳小璐

（重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院 兒童發(fā)育疾病研究省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 兒科學(xué)重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，重慶市兒童發(fā)育重大疾病診治與預(yù)防國(guó)際科技合作基地， 重慶 400014）

目的 觀察小兒牛黃清心散對(duì)幼年大鼠驚厥的預(yù)防效果。 方法 將 130 只 21 d 的 SD大鼠隨機(jī)分為在體研究組和腦片組。 在體研究組分為 7 個(gè)亞組: 正常對(duì)照組、 空白對(duì)照組、 生理鹽水對(duì)照組， 安定對(duì)照組 (2.632 mg/kg·d)，小兒牛黃清心散低 (0.3 g/kg·d)、 中 (8 g/kg·d)、 高劑量組 (16 g/kg·d)， 每個(gè)亞組 10 只， 安定、 小兒牛黃清心散灌胃， 早晚 2 次灌胃， 給藥 1 d。 在第 2 次給藥結(jié)束后 30 min， 除空白對(duì)照組給予等體積的生理鹽水腹腔注射外，余各組腹腔注射戊四唑 (70 mg/kg)， 觀察各組驚厥發(fā)作的潛伏期， 發(fā)作程度， 持續(xù)時(shí)間， 死亡率， 同步腦電圖變化。組織水平研究的動(dòng)物分為6個(gè)亞組:正常對(duì)照組，生理鹽水對(duì)照組，安定對(duì)照組，小兒牛黃清心散低、中、高劑量組。 給藥方法同在體研究組。 在第 2 次給藥結(jié)束后 30 min， 制作急性腦片， 記錄在無(wú)鎂人工腦脊液中各組腦片皮層和海馬場(chǎng)電位出現(xiàn)的潛伏期，放電波出現(xiàn)的頻率，幅度。結(jié)果 小兒牛黃清心散中、高劑量干預(yù)組可明顯延長(zhǎng)戊四唑誘導(dǎo)大鼠驚厥的潛伏期， 縮短驚厥發(fā)作時(shí)間， 降低死亡率 (P＜0.01)， 改善腦電圖情況， 小兒牛黃清心散中、 高劑量干預(yù)組可明顯降低無(wú)鎂誘導(dǎo)腦片皮層和海馬 CA1 區(qū)的發(fā)作率， 延長(zhǎng)潛伏期， 降低場(chǎng)電位的頻率及波幅。 結(jié)論 小兒牛黃清心散有較好的預(yù)防幼年大鼠驚厥的作用，并呈劑量依賴性。

小兒牛黃清心散；驚厥；戊四唑；無(wú)鎂；幼年大鼠

驚厥是小兒時(shí)期最常見的神經(jīng)系統(tǒng)急癥，在兒童中的發(fā)生率高達(dá) 3% ～5%， 且與成人相比， 小兒驚厥更易出現(xiàn)嚴(yán)重驚厥和驚厥持續(xù)狀態(tài)，導(dǎo)致驚厥性腦損傷［1］。

目前臨床上主要采用苯二氮艸卓類與抗癲癇藥物 (anti-epilepsy drugs， AEDs) 控制及預(yù)防驚厥發(fā)作，但反復(fù)服用此類藥物可能影響兒童的認(rèn)知發(fā)育［2］，內(nèi)分泌功能［3］及骨骼的發(fā)育［4］。 中藥是我們的祖先在長(zhǎng)期的醫(yī)療實(shí)踐中積累起來(lái)的財(cái)富，受到國(guó)人的青睞，但由于缺少對(duì)藥物療效的科學(xué)評(píng)價(jià)，在臨床上使用受限。

因此，本實(shí)驗(yàn)擬通過(guò)戊四唑制備幼年大鼠在體急性驚厥模型，并以無(wú)鎂誘導(dǎo)制備腦片水平的驚厥模型，在整體和組織水平，探究小兒牛黃清心散預(yù)防幼年大鼠驚厥發(fā)作的作用，為其臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物 選用 21 日齡 SD大鼠 130 只， 雌雄各半， 體質(zhì)量 (45 ±5)g， 由重慶醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí) 驗(yàn) 中 心 提 供， 動(dòng) 物 許 可 證 號(hào):syxk (渝)20040001。

1.1.2 主要試劑及器材 小兒牛黃清心散 (山東方健制藥有限公司提供， 國(guó)藥準(zhǔn)字 Z37020495)；戊四唑 (pentylenetetrazole，PTZ) ，用 生 理 鹽 水 配成 1%的戊四唑溶液； 正常人工腦脊液 (artificial cerebrospinal fluid， ACSF， mmol/L) 配方［5］:NaCl 124，KCl2.8 ，NaHCO326，NaH2PO41.25， 維生素C 0.4， 丙酮酸鈉 2， 乳酸鈉 2，D-葡萄糖 10， CaCl22， MgSO41.2； 切片液配方 (mmol/L)［5］:KCl 3 ，NaHCO326， NaH2PO41.25， 維生素 C 0.4， 丙酮酸鈉 2， 乳酸鈉 2，D-葡萄糖 10， CaCl20.1， MgSO44，MgCl22， 蔗糖 220，( 上 述試劑均購(gòu)自 sigma公司)； 振 蕩 切 片 機(jī) ( 購(gòu) 自 World Precision Instruments) ， 放 大 器 (Axon Instruments multiClamp 700B)， 顯 微 鏡 (Nikon 公 司)， 微 電 極 拉 制 器(美國(guó) Sutter Instrument公司)， 腦電圖記錄儀 ( 美國(guó) IWORX公司)。

1.2 方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)分組與給藥 130 只 SD大鼠按照隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為在體研究組和腦片組2個(gè)大組，在體研究組分為7個(gè)亞組:正常對(duì)照組、空白對(duì)照組、生理鹽水對(duì)照組，安定對(duì)照組，小兒牛黃清心散低、 中、 高劑量組， 每個(gè)亞組 10 只。 除正常對(duì)照組外， 余各組分別給予生理鹽水 2 mL/次、安定2.632mg/(kg·d)(相當(dāng)于兒童 0.5 mg/kg的臨床用量)， 小 兒 牛 黃 清 心 散 0.3 g/(kg· d)， 8 g/(kg·d)， 16 g/(kg·d)灌胃［6］( 安定及小兒牛黃清心散均分別溶于等體積的生理鹽水中)。各組均于早晚2次灌胃，給藥1 d。 腦片組分為6個(gè)亞組:正常對(duì)照組、生理鹽水對(duì)照組，安定對(duì)照組，小兒牛黃清心散低、中、高劑量組。給藥方法同在體研究組。

1.2.2 模型的制作 在體研究中， 參照文獻(xiàn)方法，稍作改進(jìn)， 在動(dòng)物日齡 16 d時(shí)于皮層頂葉硬膜外放置電極［7-8］， 并繼續(xù)母乳喂養(yǎng)至 21 d 給藥［9］。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在第二次灌胃結(jié)束后 30min， 正常對(duì)照組不予處理，空白對(duì)照組給予等體積的生理鹽水腹腔注射， 其余各組動(dòng)物均給予腹腔注射戊四唑 (70 mg/kg)， 觀 察 各 組 動(dòng) 物 在 戊 四 唑 腹 腔 注 射 后30 min內(nèi)的行為學(xué)表現(xiàn)及死亡情況， 按照 racine［10］標(biāo)準(zhǔn)，記錄各組幼鼠驚厥發(fā)作的潛伏期，發(fā)作級(jí)別，發(fā)作持續(xù)時(shí)間。從腹腔注射生理鹽水或戊四唑后開始對(duì)各組動(dòng)物進(jìn)行同步腦電圖描記［7-9］。

腦片研究組， 在第 2 次灌胃結(jié)束后 30 min， 制作急性腦片［11］(切片液和記錄液配方如前所述)，記錄各組腦片的皮質(zhì)區(qū)和海馬 CA1 區(qū)從無(wú)鎂誘導(dǎo)至場(chǎng)電位放電波出現(xiàn)的時(shí)間及放電波的波幅，頻率，放電持續(xù)時(shí)間，正常對(duì)照組腦片用于記錄正常人工腦脊液環(huán)境下的場(chǎng)電位的基線情況。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用 SPSS 17.0 軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，所有計(jì)量資料符合正態(tài)分布者用表示， 組間比較采用單因素方差分析， 方差齊者用 LSD法， 不齊者， 采用 Tamhane's T2(M)法， 不符合正態(tài)分布者用四分位間距 M(Q) 表示， 等級(jí)資料采用非參數(shù)的秩和檢驗(yàn)， 以 α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 在體觀察小兒牛黃清心散預(yù)防戊四唑誘導(dǎo)驚厥的效果 以戊四唑注射后各組幼鼠驚厥發(fā)作的潛伏期，發(fā)作持續(xù)時(shí)間，發(fā)作程度，死亡數(shù)為指標(biāo)，比較藥物的療效， 結(jié)果如表1。 結(jié)果顯示， 與生理鹽水對(duì)照組相比，中、高劑量的小兒牛黃清心散組的動(dòng)物的驚厥發(fā)作級(jí)別明顯降低，持續(xù)時(shí)間顯著減少， 死亡率明顯降低 (P＜0.05)。 高劑量組與中劑量相比，高劑量組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物驚厥發(fā)生的潛伏期顯著延長(zhǎng)，發(fā)作級(jí)別明顯降低，持續(xù)時(shí)間明顯減少(P＜0.05)， 高劑量組與安定組相比， 無(wú)顯著差異(P＞0.05)。

2.2 各組動(dòng)物腦電圖的比較 各組發(fā)作持續(xù)期的典型的腦電圖檢測(cè)情況如圖1， 正常組幼年大鼠的腦電圖為低幅的 α或 β波， 散在 θ 波。 注射 PTZ后，生理鹽水組動(dòng)物腦電圖異常，可見尖波、棘波、 棘-慢、 尖-慢波等癲癇波發(fā)放， 波幅較高， 安定組及清心散高劑量組動(dòng)物腦電圖未見明顯異常。而使用中、低劑量組腦電圖可見散在中、高波幅的尖、棘波、尖 (棘) 慢綜合波。

表1 戊四唑誘導(dǎo)后各組大鼠急性驚厥潛伏期、 驚厥持續(xù)時(shí)間、 驚厥發(fā)作程度的比較 M （Q）Tab.1 Com parison of the latent period and seizure time and seizure scores of each group after the injection of PTZ M （ Q）

2.3 腦片水平研究小兒牛黃清心散預(yù)防無(wú)鎂人工腦脊液誘導(dǎo)驚厥的效果 在組織水平研究組中，以腦片為對(duì)象，比較各組無(wú)鎂人工腦脊液誘導(dǎo)后驚厥發(fā)生的潛伏期，發(fā)作率，波幅，頻率，結(jié)果如表2， 圖 2、3 所示。 正常對(duì)照組的腦片在正常的人工腦脊液環(huán)境中，皮層和海馬組織均不能誘導(dǎo)驚厥發(fā)生， 場(chǎng)電位基線平穩(wěn)， 波幅為 0mv。 在無(wú)鎂誘導(dǎo)的驚厥模型中，隨著無(wú)鎂誘導(dǎo)的潛伏期的延長(zhǎng)，小兒牛黃清心散低、中劑量組、生理鹽水對(duì)照組均可誘導(dǎo)癇性放電發(fā)生，表現(xiàn)為場(chǎng)電位的頻率及波幅增高。而生理鹽水組、中劑量干預(yù)組、高劑量干預(yù)組， 三者比較差異有顯著意義 (P＜0.05)， 提示中劑量和高劑量干預(yù)組均可以縮短無(wú)鎂誘導(dǎo)驚厥發(fā)生的潛伏期，降低腦片場(chǎng)電位的頻率及波幅，高劑量效果較中劑量明顯，高劑量干預(yù)組可顯著降低發(fā)作率，而中劑量對(duì)發(fā)作率的改善并不明顯。中劑量干預(yù)組與低劑量干預(yù)組相比，腦片放電發(fā)作的潛伏期、頻率、波幅均顯著低于低劑量干預(yù)組 (P＜0.05)。 而低劑量干預(yù)組與生理鹽水組在上述指標(biāo)的比較未見顯著差異 (P＞0.05)。

圖1 各組腦電圖檢測(cè)情況Fig.1 EEG of each group

3 討論

小兒牛黃清心散是我國(guó)民間廣泛應(yīng)用的一種中藥復(fù)方制劑，主要含有天麻、膽南星、黃連、赤芍、 大黃、 全蝎、 水牛角濃縮粉、 僵蠶 (麩炒)、牛黃、 琥珀、雄黃、 冰片、朱砂、 金礞石 (煅)等14味中藥。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為其主要用于小兒內(nèi)熱、急驚痰喘、四肢抽搐、神志昏迷的治療。

關(guān)于小兒牛黃清心散的配方中單一藥物成分的抗驚厥的藥效及機(jī)制的研究比較多見，如天麻有抗驚厥的作用［12］，天然冰片可能通過(guò)調(diào)節(jié)腦內(nèi)氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)的水平來(lái)改善模型小鼠的驚厥行為［13］。 根據(jù)中藥配伍應(yīng)用的特色， 對(duì)中藥復(fù)方的研究更能體現(xiàn)中醫(yī)學(xué)的整體療效［14］， 針對(duì)目前國(guó)內(nèi)尚缺乏對(duì)小兒牛黃清心散復(fù)方制劑預(yù)防驚厥作用的藥效評(píng)價(jià)的研究。本研究通過(guò)制作急性驚厥模型，在整體和組織層面觀察小兒牛黃清心散的止驚療效。

表3 各組無(wú)鎂誘導(dǎo)腦片海馬 C A1 區(qū)及皮層場(chǎng)電位的情況 （）Tab.3 Field potential of CA1 region of the hippocam pus and the cortex of brain slice in each group induced by the M g2+ free artificial cerebrosp inal fluid（）

表3 各組無(wú)鎂誘導(dǎo)腦片海馬 C A1 區(qū)及皮層場(chǎng)電位的情況 （）Tab.3 Field potential of CA1 region of the hippocam pus and the cortex of brain slice in each group induced by the M g2+ free artificial cerebrosp inal fluid（）

注:與生理鹽水組、清心散低劑量組比較，*P＜0.05

組別海馬 CA1區(qū)場(chǎng)電位皮層場(chǎng)電位腦片數(shù) 潛伏期 /min發(fā)作率 /%頻率 /Hz波幅 /mV腦片數(shù)潛伏期 /min發(fā)作率 /%頻率 /Hz波幅/mV生理鹽水組1050.24 ±6.441008.59 ±1.260.640 ±0.0751029.57 ±2.871007.89 ±0.160.228 ±0.055正常對(duì)照組10---------安定對(duì)照組10-0- - 10-0- -清心散低劑量組1049.58 ±5.211008.67 ±1.160.648 ±0.0991029.75 ±3.041007.95 ±0.220.209 ±0.037清心散中劑量組1095.47 ±2.74*100*3.89 ±0.73*0.298 ±0.067*1082.88 ±13.28*100*3.92 ±0.21*0.176 ±0.012*清心散高劑量組10-0- - 10-0--

戊四唑誘導(dǎo)的急性驚厥模型是復(fù)制急性全身性驚厥發(fā)作的一種常用模型［15］。 被廣泛應(yīng)用于癲癇發(fā)病機(jī)制的研究、抗癲癇藥物的篩選以及治療方法的探索等［6］。 因此， 我們采用戊四唑所致驚厥模型，在動(dòng)物整體水平，從行為學(xué)角度研究小兒牛黃清心散的止驚療效，結(jié)果提示小兒牛黃清心散可呈劑量依賴性地對(duì)抗戊四唑誘導(dǎo)的急性驚厥，降低發(fā)作率，延長(zhǎng)驚厥發(fā)作的潛伏期，降低發(fā)作級(jí)別，縮短驚厥發(fā)作的持續(xù)時(shí)間，降低死亡率，其中，高劑量干預(yù)組可有效改善腦電圖的癇性放電，與驚厥發(fā)生的行為學(xué)變化一致。高劑量干預(yù)組與安定組預(yù)防驚厥的效果比較沒有顯著差異。

在整體研究的基礎(chǔ)上，我們進(jìn)一步采用腦片觀察小兒牛黃清心散的止驚療效。無(wú)鎂誘導(dǎo)腦片的驚厥模型是常見的經(jīng)典腦片驚厥模型之一［11］。 有研究表明無(wú)鎂誘導(dǎo)的腦片異常放電的起源自內(nèi)嗅皮層， 繼而向顳葉皮層及海馬結(jié)構(gòu)傳播擴(kuò)散［16］， 因此，皮層和海馬作為癲癇發(fā)作的易感區(qū)域，參與了癲癇電活動(dòng)的起源、傳播及擴(kuò)散，而皮層和海馬細(xì)胞外場(chǎng)電位是皮層和海馬結(jié)構(gòu)神經(jīng)環(huán)路興奮性的總體體現(xiàn)。本實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)小兒牛黃清心散可呈劑量依賴性預(yù)防無(wú)鎂誘導(dǎo)腦片的癇性放電，且高劑量的小兒牛黃清心散對(duì)無(wú)鎂誘導(dǎo)的腦片有較好的抗驚厥作用，效果與安定組相當(dāng)。

圖2 各組無(wú)鎂誘導(dǎo)腦片海馬 CA1區(qū)場(chǎng)電位情況Fig.2 Field poten tial of CA1 region of the hippocampus of brain slice induced by the M g2+free artificial cerebrospinal fluid in each group

圖3 各組無(wú)鎂誘導(dǎo)腦片皮層場(chǎng)電位的情況Fig.3 Field poten tial of the cortex of brain slice inducedby the M g2+free artificial cerebrospinal fluid in each group

本研究雖在動(dòng)物水平和腦片水平均證實(shí)了小兒牛黃清心散高劑量組有較好的預(yù)防驚厥的作用，在動(dòng)物水平的研究結(jié)果可以為臨床的進(jìn)一步大樣本前瞻性的研究提供一定的指導(dǎo)，但由于中藥起效較慢，故不適用于驚厥急性發(fā)作的處理，只可能作為預(yù)防驚厥發(fā)作的選擇藥物之一。其具體預(yù)防驚厥的機(jī)制也有待進(jìn)一步深入研究。

［ 1 ］ Haut SR， Velísková J， MoshéS L.Susceptibility of immature and adultbrains to seizure effects［ J］ .Lancet Neurol， 2004， 3 (10):608-617.

［2］ 朱海霞，蔡方成， 張曉萍.長(zhǎng)程服用苯巴比妥、氯硝安定、 丙戊酸和托吡酯對(duì)未成熟腦發(fā)育影響的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中華兒科雜志， 2007， 45(2):121-125.

［ 3 ］ Mikkonen K， Vainionp??L K ， Pakarinen A J， et al.Longterm reproductiveendocrine health in youngwomen with epilepsy during puberty［ J］ .Neurology， 2004， 62(3):445-450.

［ 4 ］ Lee R H， Lyles KW， Colón-Emeric C.A Review of the effect of anticonvulsantmedications on bonemineral density and fracture risk ［ J］ .Am J Geriatr Pharmacother， 2010， 8(1): 34-46.

［ 5 ］ Walz W.Patch-Clamp Analysis:Advanced Techniques［ M］. Totowa:Humana Press Inc， 2002:136-137.

［ 6］ 徐叔云， 卞如濂， 陳 修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)［M］.3版.北京: 人民衛(wèi)生出版社， 2002:871.

［ 7］ 荊玉君.左旋四氫巴馬汀對(duì)戊四氮致癇大鼠的影響［D］.南寧: 廣西醫(yī)科大學(xué)， 2007.

［ 8 ］ Ghosh T K， Copeland R L， Gear JC， et al.Effects of toluene exposure on the spontaneous cortical activity in rats［ J］. Pharmacol Biochem Behav， 1989， 32(4):987-992.

［ 9 ］ Sahu S， Dutta G， Mandal N， et al.Anticonvulsant effect of Marsilea quadrifolia Linn.on pentylenetetrazole induced seizure:a behavioral and EEG study in rats［ J］ .J Ethnopharmacol， 2012， 141(1):537-541.

［10］ Racine R J.Modification of seizure activity by clecyrical stimulation.II.Motor seizure［ J］ .Electroencephalograph Clin Neurophysiol， 1972， 32(3):281-294.

［11］ Abdelmalik PA， Burnham W M， Carlen P L.Increased seizure susceptibility of the hippocampus compared with the neocortex of the immature mouse brain in vitro［ J］ .Epilepsia， 2005， 46 (3):356-366.

［12］ Dai S L， Yu R.Protection of gastrodia elata against pentylenetetrazole-induced seizure inmice［ J］ .Chin JNew Drugs Clin Rem， 2002， 21(11):641-644

［13］ 陳瑞玉， 李偉榮， 宓穗卿， 等.天然冰片及其結(jié)構(gòu)修飾物對(duì)驚厥模型小鼠氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)的影響［J］.中藥新藥與臨床藥理， 2011， 22(3):282-285.

［14］ 郭立民， 王長(zhǎng)云， 顧謙群， 等.中藥復(fù)方效應(yīng)物質(zhì)基礎(chǔ)研究方 法 及 其 發(fā) 展 趨 勢(shì) ［ J］.中 成 藥， 2007， 29(1): 118-121.

［15］ Huang RQ， Bell-Horner C L， DibasM I， etal.Pentylenetetrazole-Induced Inhibition of recombinant gamma-aminobutyric Acid Type A(GABAA)Receptors:Mechanism and Acid type A(GABA(A))receptors:mechanism and Site of Action［ J］. JPharmacol Exp Ther， 2001， 298(3):986-995.

［16］ Buchheim K， Schuchmann S， Siegmund H， et al.Comparison of intrinsic optical signals associated with low Mg2+-and 4-aminopyridine-induced seizure-like events reveals characteristic features in adult rat limbic system［ J］ .Epilepsia， 2000， 41 (6):635-641.

Anticonvulsive effect of Child Niuhuang Qingxin Powder on seizures in infantile rats

LIWen-juan， JIANG Li*， CHEN Heng-sheng， CHEN Xiao-lu

(Ministry of Education Key Laboratory of Child Development and Disorders， Key Laboratory of Pediatrics in Chongqing， Chongqing International Science and Technology Cooperation Center for Child Development and Disorders， Children's Hospital of Chongqing Medical University， Chongqing 400014， China)

ABSTRACT:AIM To study the preventive effectof Child Niuhuang Qingxin Powder(CNHQX)on convulsant action in the infantile rats.METHODS One hundred and thirty infantile Sprague-Dawley(SD)rats were equally randomized into twomain groups including in vivo group and brain slice group and the former group were subdivided into 7 subgroups(normal control group，blank control group， saline control group， diazepam group(2.632 mg/kg·d)， low-dose， middle-dose and high-dose of CNHQX group［(300， 8 and 16 g/kg·d)］and each subgroup contained 10 rats.The rats were respectively orally pretreated with 2 mL)twice for one day， and were injected ip. with a dose of 70 mg/kg of pentylenetetrazole for30 min after the administration after the second time except rats in the normal controlgroup.The convulsive behaviors including the latentperiod， seizure time，seizure score，simultaneous EEG， mortality was observed for 30 min after each injection.The rats in the latter group were divided into 6 sub-groups including the normal control group ， saline control group， diazepam group， low-dose， middle-dose and high-dose of CNHQX group and the administrationsof the drugs in each group was the same as in vivo group.The rats in the brain slice group weremade into brain slices at30min after the administration the second time and the slices were induced by Mg2+free artificial cerebrospinal fluid(ACSF)for the record of field potential of the cortex and CA1 region of the hippocampus including the latent period， and frequency and amplitude of wave.RESULTS CNHQX significantly prolonged the onsetof seizures， delayed the seizure time， decreased the seizure score andmortality and improved the EEG athigh-dose andmiddle-dose(P＜0.01).It also decreased the seizure rate and prolonged the onset of seizures， decreased frequency and amplitude ofwave induced by the Mg2+free artificial cerebrospinal fluid of brain slice in high-dose and middle-dose.CONCLUSION CNHQX has possessed anticonvulsant activity against pentylenetetrazole-induced and Mg2+free artificial cerebrospinal fluid induced seizuresdose dependently in the developing rats.

Child Niuhuang Qingxin Powder(CNHQX)； zeizure； pentylenetetrazole； Mg2+free；infantile rat

R285.5

:A

:1001-1528(2014)02-0244-05

10.3969/j.issn.1001-1528.2014.02.006

2013-06-25

李文娟 (1987—) ， 女， 碩士生， 研究方向: 未成熟腦驚厥性腦損傷與腦保護(hù)作用。 Tel:13983467430， E-mail:627775752 @qq.com

*通信作者: 蔣 莉 (1964—) ， 女， 教 授， 研 究 方 向: 小 兒 神 經(jīng) 系 統(tǒng) 疾 病 基 礎(chǔ) 與 臨 床。 Tel:(023)63621892， E-mail:dr-jiangli @126.com