癌癥組織中miR-100的表達變化和靶點研究進展

周韶梅，盛 望，曾 毅，李澤琳

(北京工業大學生命科學與生物工程學院病毒藥理室，北京100124)

1 miR-100簡介

miR-100位于11q24.1，miR-99a位于21q11.1，兩者的種子區序列完全相同，其余序列只一個堿基的差別，為同一家族。miR-100序列的種子區含有雙GC對，在另一末端以TA結束，這種特點決定了它的靶點基因種類非常少，種子區的結合力強［1］。

2 對不同組織器官的研究

不同的組織器官，在胚胎生長、分化的過程中，逐漸形成自身獨有的一套microRNA表達譜。在癌變過程中，microRNA的表達普會逐漸發生一些改變，但仍會保留來源組織的一些特征。所以不同組織來源的癌細胞會有它的特點microRNA表達譜。本綜述以組織器官歸類，對各研究組的報道進行分析。

2.1 食管癌

對101個術后組織樣本和3個細胞系檢測，在惡性組織中miR-100的表達量明顯低于正常組織［2］。

2.2 口腔癌

在口腔龕位癌［3］和10例頭、頸鱗狀細胞癌組織樣本中［4］，miR-100家族成員的表達量低調。

2.3 卵巢癌

10種人類挖空細胞卵巢癌細胞系中，miR-100表達量顯著降低［5］。

2.4 子宮癌

在子宮內膜癌報道中，采用46例癌組織樣本，31例非宮頸癌患者正常組織對照樣本，48例癌癥患者血液樣本和14例非宮頸癌血液樣本，發現miR-100、miR-99、miR-199b共表達性降低，癌組織與血漿中同步［6］。采用105個實驗樣本和20例對照樣本。其中在實驗樣本中，20例感染人乳頭瘤狀病毒(HPV)的正常宮頸組織，43例宮頸內皮異常增生，42例宮頸癌組織。miR-100在宮頸異常增生和宮頸癌組織中均出現表達降低，認為與病程進展相關。將4個HPV感染的細胞系與HPV陰性細胞系比較，miR-100明顯降低，但并未得到HPV的E6/E7會直接導致miR-100降低的實驗結果［7］。

2.5 乳腺癌

檢測12種細胞株，其中6種轉移性較低乳腺癌的細胞株、4種高侵襲性的乳腺癌細胞系和2種非致瘤性、永生化的乳腺上皮細胞系，結果在惡性度較高的細胞株中miR-100明顯升高，但未檢測到因miR-100的變化而出現相應表達變化的靶點mRNA［8］。而有報道小鼠乳腺癌細胞株中miR-100的表達缺失［9］。

2.6 腎臟腫瘤

40位腎細胞癌患者術后組織檢測miR-99a低表達［10］，但最近有報道miR-100的表達明顯高于鄰近正常組織，并且與腫瘤的進展、分期、轉移成正比。高表達miR-100的患者，5年生存率明顯降低［11］。

2.7 膀胱癌

126位患者的癌腫塊相對于臨近正常組織，miR-100表達量降低，與生存率正相關［12］。在64位膀胱癌患者的癌腫塊和臨近正常組織以及10個人的膀胱癌細胞株檢測中，發現miR-100降低最為顯著;不論侵潤性與否都顯著降低，有遠處轉移灶的明顯低于原位非轉移性的［13］。但有報道卻是miR-99a，miR-100在非肌層侵潤性的膀胱癌(non-muscle invasive bladder cancer:NMIBC)中降低，而在肌層侵潤性的MIBC中表達增高［14］。

2.8 前列腺癌

49位原發性未轉移患者的檢測中miR-100低表達，明顯低于良性前列腺腫瘤，與治愈率高度相關［15］。但有報道相比轉移性的前列腺癌，在非轉移性惡性度高的前列腺癌中，miR-100呈高表達狀態［16］。使用 Kaplan-Meier曲線和 COX回歸分析，發現高表達 miR-100的患者復發率是低表達的3 倍［17］。

2.9 胰腺癌

17例胰腺導管腺癌和11例導管內乳頭狀黏液瘤，15例癌旁無腫瘤贅生的正常組織，相對于良性贅生物，miR-100高表達于癌瘤組織中［18］。

2.10 肝癌

與周圍非癌組織比較，15位患者的癌組織中，miR-100明顯降低。對134個病例分析，降低的miR-100與病理等級、TNM分期、淋巴擴散、腫瘤復發等密切相關［19］。

2.11 肺癌

在非小細胞性肺癌中，miR-100表達降低。對110例患者的研究，臨床生存率和病理惡化程度與miR-100 的表達降低成正比［20］。

2.12 血液病

106位急性髓系白血病患兒和20位正常兒童的骨髓單核細胞miR-100檢測中，患兒的miR-100明顯升高。高表達miR-100的患兒與高復發率，短存活期顯著相關［21］。

3 miR-100的作用靶點和作用方式

目前檢測到并驗證的miR-100的靶點有:哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)［2，6，13，22］、polo 樣激酶1(PLK1)［2，7，20，23］、胰島素樣生長因子 2(IGF2)［9］、成纖維細胞生長因子受體3(FGFR3)［24］，以1-25雙羥基維生素D3依賴的作用方式抑制轉錄因子E2F3和PLK1［15］。觀察到miR-100對細胞產生的生物學上的作用有:抑制細胞增殖，促進調亡，使腫瘤細胞停留于G1期［13］，miR-99a也使腫瘤細胞停留于 G1期［10］，使癌細胞停留于 G2/M 期［7，20］，但也有報道未檢測到對細胞周期有調節作用［2］。在膀胱癌的實驗中，發現FGFR3在缺氧誘導因子HIF-1α的幫助下使缺氧的癌細胞保持活力。缺氧使miR-100表達降低，導致FGFR3增加，故而腫瘤細胞得以增殖、血管形成。反推之miR-100可以降低腫瘤細胞對缺氧的耐受力［24］。但最近有報道miR-100同時又是致癌基因，通過抑制SMARCA5、BAZ2A和THAP2，致使對細胞周期的控制削弱，基因的不穩定性增加，致使腫瘤的復發率增高［22］，抑制SWI/SNF蛋白的表達，促進腫瘤復發［17］。

急性髓系白血病中［25］，miR-100的靶點是RBSP3的mRNA。RBSP3抑制細胞增殖，促使細胞進入分化。高表達的miR-100促進早幼粒細胞增殖而抑制其向粒細胞和單核細胞系的分化，同時miR-100調節G1/S的轉化，阻止進入S期，通過抑制RBSP3阻斷終末分化。

4 對應用miR-100的看法

在疾病診斷中的應用:多個研究組得出與生存率相關的結果，反映了疾病的病理分期、進展和轉移，可做為預后診斷的參考指標［6，10－12，15］。但也有報道降低的miR-100雖與生存率的降低相關，但與腫瘤的TNM分期(國際通用的腫瘤分期系統)不相關［2］。同樣存在相反看法，認為 miR-100增高，生存期短［17］。體內實驗發現，miR-100抑制皮下和膀胱通道的腫瘤形成［13］。有報道與臨床血清AFP含量和腫瘤的大小不相關［19］。

miR-100通過抑制mTOR增加了癌細胞對放射治療的敏感性，增強癌細胞對RAD001(mTOR的抑制劑)的敏感度［5］。miR-100通過抑制 PLK1使肺腺癌細胞重建對Docetaxel(抗腫瘤藥物多西他賽)的敏感性［23］。

5 總結

對實體瘤的報道，多數顯示miR-100表達降低，人為調高miR-100的表達可以對腫瘤細胞起到抑制作用。但也有報道在腫瘤細胞中miR-100表達升高，且與腫瘤的復發正相關。在急性髓系白血病和胰腺癌中，目前對miR-100的報道都為表達量增高。miR-100表達量的多少與病理分期和病情進展的關系，不同研究組之間也存在著分歧。目前已被證實的miR-100的靶點有數種，對腫瘤細胞分別起到抑制增值、導致細胞周期停滯、促進調亡，增加癌細胞對放化療的敏感性等作用。

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