PD12890的含量測(cè)定方法的建立

趙 鈴 余春梅 王正鳳 吳 軍

(西南藥業(yè)股份有限公司，中國(guó) 重慶400038)

PD12890 化學(xué)名為（4aR，10bR）-（+）-3，4，4a，10b-四氫-4-丙基-2 H，5H-苯并吡喃 (4，3-b)-1，4-噁嗪-9-酚鹽酸鹽，性狀為類(lèi)白色粉末，無(wú)臭，它是多巴胺D3受體選擇性激動(dòng)劑，D3受體的選擇性是D2受體的1000倍和D4受體的10000倍[1]。

圖1 PD12890的化學(xué)結(jié)構(gòu)式Figure 1 Structural formula of PD12890

多巴胺受體激動(dòng)藥主要具有抗帕金森、抗精神分裂癥、治療藥物依賴和抗高泌乳素血癥的神經(jīng)內(nèi)分泌等作用[2]。基于D3受體選擇性激動(dòng)劑可用于治療藥物依賴，PD12890可望進(jìn)行相關(guān)制劑的研發(fā)，且具有廣闊的應(yīng)用前景。

目前PD12890的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)在國(guó)內(nèi)外藥典都未見(jiàn)收載，僅查閱到的相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道為工藝合成方面[3]，也無(wú)質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)的文獻(xiàn)報(bào)道，為更好的控制本品質(zhì)量，本文在2010年版中國(guó)藥典[4]的基礎(chǔ)上，采用高效液相色譜法，進(jìn)行含量測(cè)定，為建立PD12890的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供參考。

1 材料與儀器設(shè)備

1.1 材料

PD12890 對(duì)照品（20130001）；PD12890 原料藥（自制，批號(hào)：09120，09255，09375）。乙腈和甲醇為色譜純；水為超純水。

1.2 主要儀器設(shè)備

Agilent 1100高效液相色譜儀，包括G1315B二極管陣列檢測(cè)器，G1313A自動(dòng)進(jìn)樣器，G1316A柱溫箱，Agilent 1100色譜工作站 （美國(guó)安捷倫科技有限公司）；AB204-E分析天平（瑞士METTLER TOLEDO公司）；BT-25S分析天平（北京賽多利斯儀器系列有限公司）。

2 溶液的制備

2.1 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取經(jīng)減壓干燥至恒重的PD128907對(duì)照品0.0550g置50mL容量瓶中，加流動(dòng)相溶解定容作為儲(chǔ)備液（1.1mg/mL）。再精密量取儲(chǔ)備液5mL置10ml容量瓶中，加流動(dòng)相稀釋配制成含PD128907為0.55mg/mL的對(duì)照品溶液。

2.2 供試品溶液的制備

精密稱取本品約55mg置100mL的容量瓶中，加流動(dòng)相溶解定容至刻度，用0.45μm微孔濾膜過(guò)濾，取續(xù)濾液備用。

3 色譜條件

色譜柱：Agilent ZORBAX SB-C18（4.6×150mm，5μm）；流動(dòng)相：乙腈-甲醇-水（20：50：30）；紫外檢測(cè)波長(zhǎng) 293nm；柱溫：30℃；流速為1.0mL/min；理論塔板數(shù)按PD128907峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。對(duì)照品溶液和供試品溶液分別進(jìn)樣20μL，記錄色譜圖（見(jiàn)圖2、圖3）。

圖2 對(duì)照品溶液Figure 2 Reference substance solution

圖3 供試品溶液Figure 3 The test solution

系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)

在上述色譜條件下，精密量取2.1項(xiàng)下的對(duì)照品溶液品溶液20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。主峰PD128907與雜質(zhì)峰的保留時(shí)間分別為：4.471和9.139min，分離效果良好，理論塔板數(shù)按PD128907峰計(jì)算不低于5000。

4 方法與結(jié)果

4.1 線性關(guān)系的考察

分別精密量取2.1項(xiàng)下的對(duì)照品儲(chǔ)備液，加流動(dòng)相配制成一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液（n=6），分別進(jìn)樣HPLC分析，每一對(duì)照品溶液進(jìn)樣一針，記錄各色譜峰的峰面積。以進(jìn)樣量濃度C（mg/mL）對(duì)峰面積A進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程：A=12379C-28.345，r=0.9998。結(jié)果表明PD128907進(jìn)樣量在0.385-0.660mg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

4.2 進(jìn)樣精密度實(shí)驗(yàn)

按3項(xiàng)下的色譜條件，精密吸取對(duì)照品溶液重復(fù)進(jìn)樣5次，測(cè)定PD128907的峰面積平均值為 6756.8，PD128907峰面積的 RSD為1.24%，顯示儀器的精密度良好。

4.3 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

按2.2項(xiàng)下方法，平行配制供試品溶液（批號(hào)：09120）6份，各吸取20μL按照3項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣分析，記錄色譜峰面積變化，PD128907峰面積的RSD為1.36%，表明方法的重復(fù)性好。

4.4 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

新配制供試品溶液（批號(hào)：09120），分別于 0，2，4，6，8、12h 進(jìn)樣，測(cè)定色譜峰面積的變化，計(jì)算PD128907峰面積的RSD為1.13%，表明供試品溶液在12h內(nèi)穩(wěn)定。

4.5 回收率實(shí)驗(yàn)

精密稱取已知純度（99.7%）的PD128907樣品適量，加入流動(dòng)相，配制成高、中、低3個(gè)不同的濃度，每個(gè)濃度3份，共9份，照2.2項(xiàng)下的方法制備供試品溶液，測(cè)定PD128907的含量，結(jié)果高、中、低3個(gè)濃度的平均回收率分別為99.4%，99.6%，99.8%，RSD分別為0.3%，0.2%，0.3%，結(jié)果見(jiàn)表 1。

表1 回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果(n=9)Table 1 Results of recovery test(n=9)

4.6 樣品的測(cè)定

取本品3批，按2.2項(xiàng)下的方法制備各批號(hào)供試品溶液。精密量取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算含量，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 PD128907樣品測(cè)定結(jié)果Table 2 Results of PD128907 samples determination

5 討論

本文對(duì)色譜柱、溶劑、檢測(cè)波長(zhǎng)、流動(dòng)相組合及流速等分別進(jìn)行考察，最終確定選擇色譜柱為 Agilent ZORBAX SB-C18（4.6×150mm，5μm），流動(dòng)相組成為乙腈-甲醇-水（20：50：30）時(shí)，可將有效將主藥成分與雜質(zhì)峰分離。選擇流速為1.5mL/min，可進(jìn)一步縮短樣品的分析時(shí)間，但PD128907的峰形變寬，基線噪音增大，故選擇流速為0.8mL/min，所得峰形尖銳，基線噪音變小，這樣可節(jié)約流動(dòng)相成本及分析時(shí)間。在200nm～400nm范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，在293nm有最大吸收，因此選擇293nm為測(cè)定波長(zhǎng)。

6 結(jié)論

經(jīng)方法學(xué)考察，該方法簡(jiǎn)單快速，專屬性強(qiáng)，重現(xiàn)性好，可用于PD128907原料藥的含量測(cè)定。

［1］朱愛(ài)芝.多巴胺D3受體配體研究現(xiàn)狀[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)·放射醫(yī)學(xué)核醫(yī)學(xué)分冊(cè)，2002,26(2)：5-8.

［2］楊彤,陳怡祿.多巴胺受體激動(dòng)藥的中樞神經(jīng)藥理研究進(jìn)展[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2009,8(9)：1177-1179.

［3］蔡進(jìn),李銘東,等.多巴胺D3受體選擇性激動(dòng)劑PD12890的合成[J].江蘇藥學(xué)與臨床研究,2006,14(1)：21-24.

［4］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（二部）[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2010：附錄XC.