PD12890的含量測定方法的建立

趙 鈴 余春梅 王正鳳 吳 軍

(西南藥業股份有限公司，中國 重慶400038)

PD12890 化學名為（4aR，10bR）-（+）-3，4，4a，10b-四氫-4-丙基-2 H，5H-苯并吡喃 (4，3-b)-1，4-噁嗪-9-酚鹽酸鹽，性狀為類白色粉末，無臭，它是多巴胺D3受體選擇性激動劑，D3受體的選擇性是D2受體的1000倍和D4受體的10000倍[1]。

圖1 PD12890的化學結構式Figure 1 Structural formula of PD12890

多巴胺受體激動藥主要具有抗帕金森、抗精神分裂癥、治療藥物依賴和抗高泌乳素血癥的神經內分泌等作用[2]。基于D3受體選擇性激動劑可用于治療藥物依賴，PD12890可望進行相關制劑的研發，且具有廣闊的應用前景。

目前PD12890的質量標準在國內外藥典都未見收載，僅查閱到的相關文獻報道為工藝合成方面[3]，也無質量控制標準的文獻報道，為更好的控制本品質量，本文在2010年版中國藥典[4]的基礎上，采用高效液相色譜法，進行含量測定，為建立PD12890的質量標準提供參考。

1 材料與儀器設備

1.1 材料

PD12890 對照品（20130001）；PD12890 原料藥（自制，批號：09120，09255，09375）。乙腈和甲醇為色譜純；水為超純水。

1.2 主要儀器設備

Agilent 1100高效液相色譜儀，包括G1315B二極管陣列檢測器，G1313A自動進樣器，G1316A柱溫箱，Agilent 1100色譜工作站 （美國安捷倫科技有限公司）；AB204-E分析天平（瑞士METTLER TOLEDO公司）；BT-25S分析天平（北京賽多利斯儀器系列有限公司）。

2 溶液的制備

2.1 對照品溶液的制備

精密稱取經減壓干燥至恒重的PD128907對照品0.0550g置50mL容量瓶中，加流動相溶解定容作為儲備液（1.1mg/mL）。再精密量取儲備液5mL置10ml容量瓶中，加流動相稀釋配制成含PD128907為0.55mg/mL的對照品溶液。

2.2 供試品溶液的制備

精密稱取本品約55mg置100mL的容量瓶中，加流動相溶解定容至刻度，用0.45μm微孔濾膜過濾，取續濾液備用。

3 色譜條件

色譜柱：Agilent ZORBAX SB-C18（4.6×150mm，5μm）；流動相：乙腈-甲醇-水（20：50：30）；紫外檢測波長 293nm；柱溫：30℃；流速為1.0mL/min；理論塔板數按PD128907峰計算應不低于3000。對照品溶液和供試品溶液分別進樣20μL，記錄色譜圖（見圖2、圖3）。

圖2 對照品溶液Figure 2 Reference substance solution

圖3 供試品溶液Figure 3 The test solution

系統適用性實驗

在上述色譜條件下，精密量取2.1項下的對照品溶液品溶液20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。主峰PD128907與雜質峰的保留時間分別為：4.471和9.139min，分離效果良好，理論塔板數按PD128907峰計算不低于5000。

4 方法與結果

4.1 線性關系的考察

分別精密量取2.1項下的對照品儲備液，加流動相配制成一系列不同濃度的標準品溶液（n=6），分別進樣HPLC分析，每一對照品溶液進樣一針，記錄各色譜峰的峰面積。以進樣量濃度C（mg/mL）對峰面積A進行線性回歸，得到回歸方程：A=12379C-28.345，r=0.9998。結果表明PD128907進樣量在0.385-0.660mg/mL范圍內線性關系良好。

4.2 進樣精密度實驗

按3項下的色譜條件，精密吸取對照品溶液重復進樣5次，測定PD128907的峰面積平均值為 6756.8，PD128907峰面積的 RSD為1.24%，顯示儀器的精密度良好。

4.3 重復性實驗

按2.2項下方法，平行配制供試品溶液（批號：09120）6份，各吸取20μL按照3項下色譜條件進樣分析，記錄色譜峰面積變化，PD128907峰面積的RSD為1.36%，表明方法的重復性好。

4.4 穩定性實驗

新配制供試品溶液（批號：09120），分別于 0，2，4，6，8、12h 進樣，測定色譜峰面積的變化，計算PD128907峰面積的RSD為1.13%，表明供試品溶液在12h內穩定。

4.5 回收率實驗

精密稱取已知純度（99.7%）的PD128907樣品適量，加入流動相，配制成高、中、低3個不同的濃度，每個濃度3份，共9份，照2.2項下的方法制備供試品溶液，測定PD128907的含量，結果高、中、低3個濃度的平均回收率分別為99.4%，99.6%，99.8%，RSD分別為0.3%，0.2%，0.3%，結果見表 1。

表1 回收率實驗結果(n=9)Table 1 Results of recovery test(n=9)

4.6 樣品的測定

取本品3批，按2.2項下的方法制備各批號供試品溶液。精密量取對照品溶液和供試品溶液各20μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算含量，測定結果見表2。

表2 PD128907樣品測定結果Table 2 Results of PD128907 samples determination

5 討論

本文對色譜柱、溶劑、檢測波長、流動相組合及流速等分別進行考察，最終確定選擇色譜柱為 Agilent ZORBAX SB-C18（4.6×150mm，5μm），流動相組成為乙腈-甲醇-水（20：50：30）時，可將有效將主藥成分與雜質峰分離。選擇流速為1.5mL/min，可進一步縮短樣品的分析時間，但PD128907的峰形變寬，基線噪音增大，故選擇流速為0.8mL/min，所得峰形尖銳，基線噪音變小，這樣可節約流動相成本及分析時間。在200nm～400nm范圍內進行掃描，在293nm有最大吸收，因此選擇293nm為測定波長。

6 結論

經方法學考察，該方法簡單快速，專屬性強，重現性好，可用于PD128907原料藥的含量測定。

［1］朱愛芝.多巴胺D3受體配體研究現狀[J].國外醫學·放射醫學核醫學分冊，2002,26(2)：5-8.

［2］楊彤,陳怡祿.多巴胺受體激動藥的中樞神經藥理研究進展[J].醫藥導報，2009,8(9)：1177-1179.

［3］蔡進,李銘東,等.多巴胺D3受體選擇性激動劑PD12890的合成[J].江蘇藥學與臨床研究,2006,14(1)：21-24.

［4］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（二部）[S].北京：中國醫藥科技出版社,2010：附錄XC.