氟伐他汀對厄貝沙坦藥代動力學的影響研究*

周霞瑾，齊惠珍 ，王明霞 ，常 青，馬海飛

（1.河北醫科大學附屬第四醫院藥劑科，河北 石家莊 050011； 2.河北醫科大學藥學院，河北 石家莊 050017）

氟伐他汀是臨床常用的全合成的降膽固醇藥物，大劑量可抑制不穩定型心絞痛患者冠狀動脈病變的炎性反應［1］，常與降壓藥厄貝沙坦聯用，且與厄貝沙坦都經CYP2C9代謝。有報道氟伐他汀不僅是CYP2C9的底物，當與其他藥物聯用時，則成為CYP2C9抑制劑［2］。本試驗中選擇氟伐他汀和厄貝沙坦作為研究藥物，擬通過研究氟伐他汀對厄貝沙坦藥代動力學參數的影響，探討經同種酶代謝的藥物相互作用的規律，為臨床合理用藥提供參考。

1 材料與方法

1.1 儀器、試藥與動物

Waters高效液相色譜儀，515泵，474熒光檢測器，Empower色譜數據工作站；ZH－2型渦旋混合器（天津藥典標準儀器廠）；800型離心機（上海分析儀器廠）；梅特勒AE240型電子分析天平（瑞士）；SANYO低溫冰箱。替米沙坦標準對照品（美國Sigma－Aidrich公司，批號為Lot No T－8949）；厄貝沙坦標準對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號為100607－200301）；乙腈為色譜純，乙醚、二氯甲烷、磷酸為分析純，試驗用水為多效蒸餾水；羧甲基纖維素CMCS（化學純，天津市光復精細化工研究所，批號為20050815）；氟伐他汀片（北京諾華制藥有限公司，批號為X0669，規格為每片40mg）；厄貝沙坦片（賽諾菲安萬特＜杭州＞制藥有限公司，批號為0A020，規格為每片0.15 g）。新西蘭大白兔18只，均為雄性，體重2.5～3 kg，購于河北醫科大學動物中心，動物合格證號為709198，并通過河北醫科大學動物實驗倫理委員會批準。

1.2 試驗方法

1.2.1 動物處置

每只籠子裝1只新西蘭大白兔，編號，稱重，進入動物室，經1周以上適應性飼養后，隨機分為3組，即對照組、氟伐他汀低劑量（10mg ／kg）誘導組和氟伐他汀高劑量（50mg ／kg）誘導組，每組6只。對照組（A組）灌胃給予2%羧甲基纖維素溶液每只10mL，每日1次，連續3 d，于第4天晨8：00給予厄貝沙坦（50mg／kg）的2%羧甲基纖維素溶液灌胃。氟伐他汀低劑量誘導組（B組）動物前3 d給予氟伐他汀（10mg／kg）的2%羧甲基纖維素溶液灌胃，每日1次，于第4天晨8：00給厄貝沙坦（50mg／kg）的2%羧甲基纖維素溶液灌胃。氟伐他汀高劑量誘導組（C組）動物前3 d給予氟伐他汀（50 mg／kg）的2%羧甲基纖維素溶液灌胃，每日1次，于第4天晨8：00給予厄貝沙坦（50mg／kg）的2%羧甲基纖維素溶液灌胃。所有動物于灌胃厄貝沙坦的前1天晚8：00開始禁食不禁水，厄貝沙坦的給藥劑量按人／兔體重的等效劑量換算。

1.2.2 取血方法

預先給動物置留置針，分別于給藥前和給藥后0.25，0.5，1，1.5，2，3，5，7，9，12，24，36 h 從新西蘭大白兔的耳中動脈取血2mL，置肝素管中，以 10000 r／min的速率離心 10 min，取上清液，放入－80℃低溫冰箱保存，用于測定厄貝沙坦的濃度。

1.2.3 血漿樣品處理［3］

取血漿400μL，置10mL具塞玻璃離心管中，精密加入內標工作液 40 μL（5 μg／mL），渦旋混勻 15 s，加入 100 μL 磷酸溶液（1mol／L），渦旋 30 s，使其酸化，加入乙醚 － 二氯甲烷（7 ∶3）［4］混合液 5mL 提取，渦旋振蕩 5 min，離心（1500 r／min）5 min，取有機層4.5mL于潔凈干燥具塞玻璃離心管中，加入200μLNaOH溶液（0.05 mol／L），渦旋震蕩 3 min，離心 （1500 r／min）5 min，于－80℃低溫冰箱中冷凍15min，棄去上層未凍有機相，待下層融化后，用微量取樣器取150μL于1mL的Ephendroff管中，加入 100μL 磷酸溶液（0.2mol／L）酸化，渦旋混勻 30 s，進樣 50 μL分析。

1.2.4 色譜條件［3］

色譜柱：Diamonsil C18柱（200 mm ×4.6 mn，5μm）；流動相：水－乙腈（57∶43），三乙胺0.1%，磷酸調節 pH至3.00；流速：1.0mL／min；柱溫：室溫；熒光檢測波長：激發波長為254 nm，發射波長為 371 nm［5］。內標物：替米沙坦；進樣量：50 μL。在該色譜條件下，替米沙坦和厄貝沙坦的保留時間分別為4.2 min和6.0 min，分離效果良好，空白血漿的內源性物質對藥物和內標物無干擾。

1.2.5 標準曲線制備［3］

用空白血漿將質量濃度為100μg／mL的厄貝沙坦貯備液配制成質量濃度為 5，2，1，0.5，0.2，0.1，0.05 μg／mL 的系列標準曲線工作液。精密量取替米沙坦內標溶液（5μg／mL）40μL置10 mL具塞玻璃離心管中，分別加入400μL上述系列濃度的標準曲線工作液，按2.3項下方法進行處理，用高效液相色譜（HPLC）－熒光檢測法測定，以厄貝沙坦峰面積與內標峰面積的比值（Y）為縱坐標、厄貝沙坦質量濃度（X）為橫坐標進行線性回歸，得回歸方程Y＝0.0032＋0.192X（r＝0.9996）。結果表明，在0.05～5μg／mL質量濃度范圍內，厄貝沙坦峰面積與內標峰面積的比值與血漿中厄貝沙坦濃度呈良好線性關系，厄貝沙坦的最低檢測限為0.023μg／mL，其日內RSD為3.21%，日間RSD為 4.37%（n＝5）。

1.2.6 藥代動力學分析

每只新西蘭大白兔的血漿厄貝沙坦濃度值均用DASVersion 3.0（Bontz Inc.，北京，中國）藥代動力學軟件進行智能化數據處理，模擬血藥濃度－時間曲線，并計算非房室模型統計矩參數，Cmax和Tmax為實測值。分析采用SPSS 13.0統計軟件，計量資料采用，多組比較采用方差分析（ANOVA），P＜0.05時再用Dunnett檢驗，Tmax采用秩和檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

各組的平均血藥濃度－時間曲線見圖1。各組的血藥濃度－時間數據經DAS 3.0軟件處理后的非房室模型統計矩參數見表1。經單因素方差分析，與A組比較，氟伐他汀低劑量（10mg／kg）誘導對厄貝沙坦的藥代動力學無影響；氟伐他汀高劑量（50mg／kg）誘導，厄貝沙坦的主要藥代參數0～36 h藥時曲線下面積（AUC0～36），0 ～ ∞ 藥時曲線下面積（AUC0～∞），0 ～ ∞ 平均駐留時間（MRT0～∞）雖有變化，但經單因素方差分析均無統計學差異，氟伐他汀高劑量（50mg ／kg）誘導組的半衰期 （t1／2）和 0 ～36 h 平均駐留時間（MRT0～36）顯著延長（P＜ 0.05），且表觀清除率（CL）顯著降低（P＜0.05）。

圖1 血藥濃度－時間曲線

表1 各組口服厄貝沙坦的非房室模型藥代動力學參數（ ± s，n＝6）

表1 各組口服厄貝沙坦的非房室模型藥代動力學參數（ ± s，n＝6）

注：與 A組比較，*P＜0.05。

藥代動力學參數表觀分布容積（V ／L，kg）半衰期（t1／2，h）0 ～ 36 h 平均駐留時間 （MRT0～36，h）0～∞平均駐留時間（MRT0～∞，h）0～36h藥時曲線下面積（AUC0～36，μg·h／mL）0 ～∞藥時曲線下面積（AUC0～∞，μg·h／mL）表觀清除率（CL／L，kg／h）達峰時間（T max，h）峰濃度（C max，μg／mL）A組B組C組68.10±49.564.52±2.055.14±1.356.13±1.629.88±9.0710.23±8.9911.48±8.371.34±0.222.38±2.5624.31±12.422.74±0.772.86±0.824.17±2.727.69±3.218.69±3.056.43±2.330.67±0.203.58±1.7036.31±22.358.73±2.65*8.31±2.38*10.86±4.3219.35±7.5020.49±7.722.79±1.15*0.89±0194.48±2.80

3 討論

厄貝沙坦不需經生物轉化就能發揮藥理作用，但有試驗證明其確實經 CYP2C9氧化代謝［2］。氟伐他汀是第 1個全合成的HMG－CoA還原酶抑制劑，其消除主要經CYP2C9代謝為N－去異丙基丙酸、5－羥基氟伐他汀和6－羥基氟伐他汀，氟伐他汀還被證明是CYP2C9酶的抑制劑［2］。本試驗結果顯示，氟伐他汀低劑量（10mg／kg）誘導組對厄貝沙坦的藥代動力學無影響，而高劑量（50mg ／kg）誘導組顯著延長了厄貝沙坦的t1／2（P＜ 0.05），說明氟伐他汀抑制厄貝沙坦的代謝，且與劑量相關。氟伐他汀屬親水性化合物，且在腸道具有高滲透性，因此口服后在小腸廣泛、迅速吸收［2］試驗設計氟伐他汀與厄貝沙坦服用時間相差12 h以上故不會對厄貝沙坦的吸收產生影響。P－gp底物唯一的特性是親脂性，氟伐他汀為親水性化合物，故推測氟伐他汀不是P－gp底物，也有試驗證實氟伐他汀不影響P－gp介導的轉運［6－7］，氟伐他汀對厄貝沙坦的吸收無影響。故推測氟伐他汀對厄貝沙坦藥代動力學的影響與抑制CYP2C9有關。

氟伐他汀的生物利用度很低，源于其首過效應，服用劑量的60% 被 CYP2C9 代謝［2］。Siekmeier 等［8］觀察到 10 mg 速釋膠囊的絕對生物利用度為（29±18）%。多次口服或單劑量口服劑量超過20mg時，生物利用度增加，峰濃度（Cmax）和AUC均不成比例地明顯增加。并認為這一結果可能因為多次口服或增加劑量時，肝臟上的轉運體或代謝酶達到了飽和，部分藥物逃逸了肝臟首關代謝，導致進入血液循環的藥量增加。本試驗結果與此研究結果一致，高劑量氟伐他汀影響厄貝沙坦的代謝。與對照組相比，其CL顯著降低（P＜0.05），這一結果與MRT0～36顯著延長一致。考慮CYP2C9酶具有飽和性，氟伐他汀通過競爭性與CYP2C9酶結合而抑制影響厄貝沙坦的代謝。

總之，氟伐他汀高劑量時通過競爭性抑制CYP2C9酶而影響厄貝沙坦的藥代動力學，顯著延長其t1／2和MRT，并且顯著降低其CL。因此，臨床上厄貝沙坦與氟伐他汀聯用時，尤其氟伐他汀劑量較大時，要進行監測，必要時調整厄貝沙坦的給藥間隔。

參考文獻：

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