益精靈口服液大鼠長期毒性實驗研究

王林麗，李卓恒，呂金勝，盧來春

（中國人民解放軍第三軍醫(yī)大學大坪醫(yī)院藥學部，重慶 400042）

益精靈口服液根據(jù)中醫(yī)藥理論組方原則，以何首烏、枸杞子、菟絲子、懷牛膝、補骨脂、當歸、茯苓、陳皮組方，方中藥材大多具有增強免疫、改善記憶、營養(yǎng)神經(jīng)、延緩衰老等作用。為給臨床安全用藥提供科學依據(jù)，筆者采用益精靈口服液對大鼠進行了灌胃30 d的毒性試驗研究，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 試藥與動物

益精靈口服液（由中國人民解放軍第三軍醫(yī)大學第三附屬醫(yī)院提供，批號為 101216，規(guī)格為每支 10 mL）。SD大鼠，體重（117±6）g，由中國人民解放軍第三軍醫(yī)大學大坪醫(yī)院實驗動物中心提供，動物受試環(huán)境為中國人民解放軍第三軍醫(yī)大學大坪醫(yī)院實驗動物中心，試驗設(shè)施使用合格證號SYXK－（軍）SYXK－（軍）2010－032，動物質(zhì)量合格證號 SCXK － （軍）2010－008。飼料、飲水和墊料均符合試驗動物質(zhì)量控制標準。

1.2 試驗動物分組及給藥方法［1］

SD大鼠，先留察1周，然后選出健康大鼠80只益精靈口服液，隨機分為4組，每組雌雄各10只。將4組大鼠隨機分為對照組及益精靈口服液低劑量［0.5 mL／（kg·d）］組、中劑量［2.5mL ／（kg·d）］組、高劑量［5mL ／（kg·d）］組，分別相當于臨床患者每日用量的1，5，10倍［按照臨床人體用藥30mL／d，成人體重以 60 kg／d 計算，相當于 0.5mL ／（kg·d）］服用量，連續(xù)灌胃30 d，對照組采用等量生理鹽水灌胃。

1.3 檢測指標［2］

每周稱量體重1次，并根據(jù)體重變化調(diào)整給藥量，于每日晨給藥，給藥前12 h禁食不禁水，給藥后觀察記錄動物的飲食、糞便、行為等一般狀態(tài)。給藥30 d后各組隨機處死雌雄大鼠各5只，取尾靜脈血進行血常規(guī)檢查，包括測定血紅蛋白（Hb）、白細胞計數(shù)（WBC）、紅細胞計數(shù)（RBC）；血液生化指標檢查，包括天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、總膽紅素（TBil）；并取大鼠的心、肝、肺、腎作組織病理學檢查。其余大鼠停藥繼續(xù)喂養(yǎng)觀察10 d，于停藥后第11天處死作組織病理學檢查。

1.4 統(tǒng)計學處理

采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件，組間兩兩比較采用t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 一般狀況

試驗期間有個別大鼠死亡，其中對照組無大鼠死亡，低、中、高劑量組各死亡1只，死亡率均為5.00%，經(jīng)解剖未見異常，低、中、高劑量組大鼠每次給藥后其攝食飲水、大小便、活動情況均未見異常。結(jié)果表明，各組動物的死亡并無劑量反應關(guān)系，經(jīng)解剖證實應屬自然疾病或其他原因所致。

2.2 體重增長

對照組和各試驗組大鼠每給藥7 d后稱重1次，平均體重變化見表1。可見，各組平均體重均有增長，但各劑量組的平均體重變化與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義。

表1 各組大鼠平均體重變化比較（ ± s，g，n ＝20）

表1 各組大鼠平均體重變化比較（ ± s，g，n ＝20）

組別 給藥前7 d 14 d 21 d 30 d對照組低劑量組中劑量組高劑量組117.05±3.73117.70±3.48117.55±3.65119.20±3.43118.15±3.17118.95±3.19118.00±3.09119.00±3.45118.55±1.76118.55±3.30117.85±2.99119.15±2.94118.10±2.27118.95±2.87117.65±3.50119.30±3.18118.65±2.89118.90±3.13118.40±3.02119.10±3.13

2.3 肝腎功能生化指標

結(jié)果見表2。各劑量組主要肝腎功能生化指標與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義。

表2 各組大鼠主要肝腎功能生化指標比較（ ± s，n＝20）

表2 各組大鼠主要肝腎功能生化指標比較（ ± s，n＝20）

組別 AST（IU ／L） ALT（IU ／L） TBil（μmol／L）雌雄雌雄雌雄對照組低劑量組中劑量組高劑量組0.39±0.010.40±0.010.39±0.020.39±0.020.40±0.010.37±0.010.39±0.020.39±0.023.78±0.193.89±0.203.78±0.243.87±0.023.82±0.353.86±0.313.72±0.273.8±0.180.75±0.040.73±0.050.71±0.050.74±0.050.72±0.040.77±0.050.74±0.040.77±0.06

2.4 血常規(guī)指標

結(jié)果見表3。各劑量組血常規(guī)與對照組比較未見異常。

2.5 組織病理學檢查

連續(xù)給藥30 d后，對照組及各劑量組動物的心、肝、腎、肺未見明顯的病理改變。停藥11 d后，對照組及各劑量組動物的心、肝、腎、肺也未見明顯的病理改變。

3 討論

本試驗采用益精靈口服液以灌胃法給藥30 d進行大鼠長期毒性試驗研究，根據(jù)總投藥量計算各組每天平均投藥劑量，分別為低劑量［0.5mL ／（kg·d）］、中劑量［2.5mL ／（kg·d）］、高劑量［5mL ／（kg·d）］，相當于臨床每日用藥量的 1，5，10 倍。試驗期間，各劑量組體重增長情況與對照組相比無明顯差異，血常規(guī)未發(fā)生明顯變化，結(jié)果表明，以相當于臨床患者每日用量1，5，10倍的劑量，連續(xù)給予大鼠益精靈口服液灌胃30 d，并無毒性反應，說明其臨床用藥較安全。

表3 各組大鼠血常規(guī)指標比較（ ± s，n＝20）

表3 各組大鼠血常規(guī)指標比較（ ± s，n＝20）

組別Hb（g／L） WBC（105／L） RBC（1012／L）雄雌雄雌雄雌對照組低劑量組中劑量組高劑量組158.6±2.97159.0±2.45159.4±3.05160.0±2.12159.0±4.74160.4±2.88160.4±1.82158.2±4.506.00±0.346.11±0.285.95±0.275.96±1.605.95±0.236.15±0.295.91±0.216.00±0.246.69±0.156.78±0.066.63±0.166.49±1.786.54±0.096.55±0.076.56±0.176.60±0.15

參考文獻：

［1］袁伯俊，王治喬.新藥臨床前安全性評價與實踐［M］.北京：軍事醫(yī)學科學出版社，1997：23－36.

［2］王林麗，李卓恒，呂金勝，等.乳寧口服液對大鼠的長期毒性試驗研究［J］. 中國藥業(yè)，2013，14 （22）：14 －15.