金銀花超微細粉與普通粉的比較研究

摘要[目的] 考察微粉化技術對中藥材金銀花的顯微特征以及溶出度的影響。[方法]顯微鏡下觀察金銀花普通細粉與超微細粉的顯微特征區別，并以綠原酸含量為指標，采用紫外分光光度法測定金銀花超微細粉與普通細粉的溶出度。[結果]2種金銀花粉末顯微鏡下觀察有明顯差異；綠原酸含量超微細粉（10 μm）>普通細粉（80目篩）。[結論]微粉化技術對金銀花粉末顯微特征和溶出度影響明顯。

關鍵詞微粉化技術；金銀花；超微細粉；普通粉；顯微特征；含量測定

中圖分類號S567文獻標識碼A文章編號0517-6611（2014）23-07736-02

基金項目山西省科技廳資助項目（20110321081-02）。

作者簡介張璐（1978- ），男，山西陽泉人，工程師，碩士，從事中藥提取、中藥制劑研究。

收稿日期20140709金銀花（Flos lonicerae）為忍冬科植物忍冬、紅腺忍冬、山銀花或毛花柱忍冬的干燥花蕾或帶初開的花。金銀花具有抗菌和增強機體免疫功能的作用，味甘、性寒、清熱解毒、涼散風熱[1]，其醫療作用十分廣泛。現代研究表明，綠原酸和異綠原酸作為金銀花的主要成分有多種藥理活性，具有顯著的清熱解毒、抗菌消炎和延緩衰老作用，對消化道的癌癥有明顯的抑制作用，還具有生育作用及對免疫系統的調節作用[2]。因此綠原酸含量的高低是目前金銀花品質優劣的主要指標。

微粉化技術是近年興起并應用于中藥領域的一項新技術。中藥材經過超微粉碎后，粒度均勻細密，并可使細胞壁破碎，增加了藥材的比表面積，理論上有利于藥物有效成分的溶出，增加藥材有效成分的提取率[3]。但每味中藥微粉化后是否都能達到上述效果，有待進一步研究。該試驗以金銀花綠原酸含量為指標，探求超微粉碎是否有利于中藥材金銀花有效成分的溶出。

1材料與方法

1.1試驗藥材與試劑金銀花藥材購于山西省雙鶴藥業有限公司，經普通粉碎過80目篩為普通粉，超微粉碎于江蘇華強納米科技有限公司；綠原酸對照品：中國藥品生物制品檢定所，批號110753200413；甲醇（分析純）：北京市化工試劑廠，批號20060233；無水乙醇（分析純）：北京市化工試劑廠，批號20030520；水合氯醛（分析純）；稀甘油（化學純）。

1.2試驗儀器離心機：802（上海分析儀器器械廠）；超聲波提取器：KQ250B（江蘇省昆山市超聲儀器廠）；電熱恒溫水浴鍋：HH4（常州市國華電器有限公司）；電子天平：JA1203（上海天平儀器廠）；高速萬能粉碎機（北京市科華永興儀器有限公司）；紫外可見分光光度計：UV757CRT（上海精密科學儀器有限公司）；生物光學顯微鏡：CHD212E（日本奧林巴斯株式會社）；OLMYPUS倒置熒光顯微鏡：IX7型（日本奧林巴斯株式會社）。

1.3試驗方法

1.3.12種不同粉末顯微比較觀察。

1.3.1.1超微細粉與普通細粉顯微裝片。分別取超微細粉與普通細粉少量置于載玻片上，加適量水合氯醛，于酒精燈上微熱進行透化，稀甘油固定后，蓋上蓋玻片，得到顯微裝片。

1.3.1.2顯微裝片的顯微鏡觀察[4]。 將制得的金銀花超微細粉與普通細粉裝片于顯微鏡下觀察，普通細粉觀察目鏡10X、物鏡40X， 超微細粉觀察目鏡10X、物鏡40X，比較2種粉末顯微特征的區別，并進行照相。

1.3.2含量測定[5]。

1.3.2.1對照品的制備。精密稱取五氧化二磷真空干燥24 h的綠原酸對照品2.0 mg溶于2 ml甲醇，用移液管吸取0.5 ml，置于10 ml棕色容量瓶中，加50%甲醇至刻度，制成50 μg/ml的對照品溶液。

1.3.2.2樣品溶液的制備。取金銀花細粉及超微粉粉末樣品各0.5 g，精密稱定，置具塞三角瓶中，加入50%甲醇50 ml，稱定重量，超聲30 min，擦干外壁水分，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液5 ml于25 ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，制成樣品溶液。

1.3.2.3測定波長的選擇。吸取對照品溶液1.0 ml置于10 ml容量瓶中，加甲醇稀釋值刻度，紫外掃描顯示327 nm處有最大吸收，每隔1 h復測，結果10 h內無變化。

1.3.2.4標準曲線的繪制。分別吸取對照品0.5、0.8、1.0、1.5、1.8、2.0 ml置于10 ml容量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，制成濃度分別為2.5、4.0、5.0、7.5、9.0、10.0 μg/ml的溶液，在327 nm波長處測其吸光度，繪制標準曲線。

1.3.2.5樣品含量測定。將超微細粉樣品與普通細粉樣品溶液分別稀釋10倍，超微細粉標為1號樣品，普通細粉標為2號樣品，分別在327 nm波長處測定其吸光度。

2結果與分析

2.1超微細粉與普通細粉顯微觀察結果與分析從 OLMYPUS IX7型倒置熒光顯微鏡拍攝的圖片（a）可以看出，金銀花細粉中的花粉粒多見完整細胞，而超細粉中的花粉粒多見破壁細胞；從金銀花細粉和超細微粉非腺毛（b）可以看出，金銀花細粉中非腺毛多見細長完整細胞，而超細粉中的非腺毛多為破碎細胞。

2.2樣品含量測定通過“1.3.2.4”方法，繪制標準曲線，注：a1、b1為細粉；a2、b2為超細微粉。

金銀花細粉超細微粉花粉粒（a）、非腺毛（b）發現金銀花超微細粉與普通細粉在2.5～10.0 μg/ml內呈線性，其線性回歸方程為：A=0.086 4C+0.005 3（R=0.994）。利用紫外分光光度法分別測定了金銀花普通細粉（80目）、超微細粉粉末綠原酸的含量，結果表明，經過超聲提取后，金銀花的有效成分綠原酸含量超微細粉比普通細粉（80目）提高14.4%（）。

金銀花超微細粉與普通細粉在327 nm波長處的吸光度

測定次數1號樣品（超微細粉）2號樣品（普通細粉）A（第一次）0.3890.358A（第二次）0.3880.362A（第三次）0.3890.363A（平均值）0.3890.361

3結論與討論

顯微特征比較和含量測定表明，金銀花連翹經過超微粉碎后，細胞破壁明顯，大部分細胞已沒有完整結構，藥物的有效成分不需要經過細胞壁和細胞膜的交換過程而被溶提出來，中藥有效成分的釋放量大幅度提高，超微粉碎非常有利于中藥材金銀花有效成分的溶出，且可大大簡化提取工藝過程，有利于降低生產成本。

參考文獻

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[S].北京：化學工業出版社，2005：117-118.

[2] 任兵，陸蘊如.我國藥用金銀花資源，化學成分及藥理研究進展[J].中國藥學雜志，1999，34（11）：724-727.

[3] 王宏潔，司南，邊寶林.飲片超微粉碎前后主要有效成分溶出量的對比研究[J].中國中藥雜志，2004，29（11）：1111-1112.

[4] 中華人民共和國衛生部藥典委員會.中華人民共和國藥典-中藥粉末顯微鑒別彩色圖集[M].廣州：廣東科技出版社，1999.

[5] 韓梅海，成愛華.復方大青葉合劑中的靛玉紅、綠原酸含量測定方法的研究[J].