云南不同煙區(qū)紅花大金元煙葉中多酚含量的差異性研究

吳德喜　何潔　向麗紅　王超　吳文斗　楊應(yīng)明　李凡

摘要[目的]了解云南部分煙區(qū)種植的煙葉多酚含量及其差異。[方法]通過高效液相色譜定量分析法，對來源于昆明1區(qū)（石林縣、宜良縣）、大理、紅河、昆明2區(qū)（晉寧縣、安寧市、嵩明縣）4個煙區(qū)的紅花大金元（紅大）上部煙葉和中部煙葉的綠原酸、蕓香苷、咖啡酸和莨菪亭4種多酚類物質(zhì)進(jìn)行測定，并對不同部位、不同來源的煙葉多酚含量進(jìn)行差異性分析。[結(jié)果]試驗表明，不同煙區(qū)的紅花大金元煙葉多酚含量差異較大，4個受檢煙區(qū)中上部煙葉多酚含量從高到低依次是大理（38.21 mg/kg）、昆明1區(qū)（30.19 mg/kg）、昆明2區(qū)（29.07 mg/kg）和紅河（26.98 mg/kg），極差達(dá)35.63%；不同部位的紅花大金元煙葉多酚含量差異也較大，綠原酸在上部煙葉（B2F）的含量高出中部煙葉（C3F）12.22%～52.34%（平均33.31%），蕓香苷高出21.10%～55.03%（平均39.12%），多酚物質(zhì)總計高出27.62%～39.14%（平均34.17%）；紅花大金元中上部煙葉中綠原酸和蕓香苷2種主要多酚物質(zhì)占多酚總量的61%和37%左右，其余多酚約為2%左右。紅花大金元煙葉的多酚含量在不同栽培地區(qū)、不同部位上差異明顯，氣候冷涼、晝夜溫差大的煙區(qū)（大理）明顯高于氣候溫暖的煙區(qū)（紅河），而氣候條件居中的昆明的煙葉多酚含量也居中；同時，上部的煙葉多酚含量高于中部的煙葉。[結(jié)論]研究可為紅花大金元品種栽培區(qū)劃及卷煙工業(yè)提供參考。

關(guān)鍵詞煙草；多酚化合物；紅花大金元

中圖分類號S572文獻(xiàn)標(biāo)識碼A文章編號0517-6611（2014）22-07561-02

多酚類化合物在煙草的生長發(fā)育、調(diào)制特性、煙葉色澤、等級、煙氣香吃味和煙氣生理強(qiáng)度等方面起著重要作用，是衡量煙草品質(zhì)的一個重要因素[1]。測定煙葉中的多酚含量對于了解煙葉香氣質(zhì)量和指導(dǎo)卷煙配方具有重要意義。煙草中多酚主要有單寧類（綠原酸）、香豆素類（莨菪靈、莨菪亭）和黃酮類（蕓香苷、山萘酚糖苷）等，其中綠原酸和蕓香苷的含量較高，二者含量就基本上可以反映卷煙中多酚的總量[2-5]。為了解不同煙區(qū)種植的煙葉多酚含量的情況，筆者對具有清香風(fēng)格的云南特色烤煙品種紅花大金元進(jìn)行煙葉主要多酚物質(zhì)含量測定，比較其差異性。

1材料與方法

1.1樣品來源檢測煙葉樣品為2009年產(chǎn)自昆明1區(qū)（石林縣和宜良林的混打復(fù)烤煙葉）、大理、紅河、昆明2區(qū)（晉寧林、安寧市和嵩明林的混打復(fù)烤煙葉）不同煙區(qū)的紅大上部煙葉（B2F級）和中部煙葉（C3F級）。檢測指標(biāo)包括綠原酸、蕓香苷、咖啡酸和莨菪亭4種多酚類物質(zhì)。不同煙區(qū)煙葉采樣按照工業(yè)要求，分別對不同煙區(qū)B2F級、C3F級煙葉各采樣10個，最后每個煙區(qū)制成5個B2F混合樣、5個C3F混合樣送檢。

1.2檢測方法 根據(jù)煙草行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YC/T 202-2006，用 50%甲醇水溶液萃取煙草和煙草制品中的多酚類化合物，萃取液經(jīng)0.45 μm濾膜過濾后，通過高效液相色譜定量分析檢測其中多酚類化合物的含量。

1.2.1樣品處理。 稱取0.100 0 g煙末樣品，加入30 ml 80%的甲醇和4 ml 6 mol/L的鹽酸溶液，在35 ℃水浴中超聲提取15 min，取出上層清液；對剩余部分重復(fù)以上操作。過濾去除殘渣，合并2次提取液，在37 ℃水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、濃縮，用甲醇定容至25 ml，0.45 μm濾膜過濾，備用。

1.2.2樣品檢測。煙葉樣品多酚類物質(zhì)的測定參照谷勛剛等的方法[6]，用美國WATERS 2695高效液相色譜儀進(jìn)行HPLC分析。色譜柱：Waters XterraTM RP18（1.0×50 mm，2.5 μm）；流動相A：水∶甲醇∶乙酸=88∶10∶2（體積分?jǐn)?shù)），流動相B：水∶甲醇∶乙酸=10∶88∶2（體積分?jǐn)?shù)）；柱溫：30 ℃；梯度：0 min時A為100%，16.5 min時A為80%，B為20%，30 min時A為20%，B為80%；檢測波長為340 nm，參比波長為480 nm。

1.3數(shù)據(jù)分析根據(jù)文獻(xiàn)報道，不同部位煙葉中多酚含量有較大差異，同一類型煙葉中，上部葉中多酚含量最高，中部葉次之，下部葉最低[7-8]。該研究對不同煙區(qū)煙葉按照上部（B2F）、中部（C3F）煙葉分別求平均值進(jìn)行差異性比較。數(shù)據(jù)處理采用Excel 2003，統(tǒng)計分析采用SPPSS 19.0軟件。