對雞大腸桿菌病治療藥物的篩選試驗

摘 要：雞大腸桿菌病是由大腸埃希氏桿菌引起的急性敗血癥、心包炎、肝周炎、卵黃性腹膜炎、關(guān)節(jié)炎等為特征的傳染性疾病。通過藥敏試驗篩選出對大腸桿菌不同程度敏感的藥物，即硫酸多粘菌素B、硫酸新霉素、頭孢噻呋、硫酸慶大霉素，對300羽大腸桿菌病雞隨機分成五組，進(jìn)行飲服治療試驗。結(jié)果表明，硫酸多粘菌素B的治療效果最好，治愈率達(dá)91.7 %，頭孢噻呋治愈率為80 %，硫酸新霉素治愈率為76.6 %，硫酸慶大霉素治愈率為53.3 %。

關(guān)鍵詞：大腸桿菌病；硫酸粘桿菌素；頭孢噻呋；硫酸新霉素；硫酸慶大霉素

中圖分類號：S852 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：C 文章編號：1001-0769（2014）01-0043-01

雞大腸桿菌病一年四季均可發(fā)生，該病發(fā)病范圍廣，病死率高，各日齡雞均易感。大腸桿菌病可以單獨感染，但更多的是繼發(fā)感染；近年來與新城疫、傳染性支氣管炎、傳染性法氏囊病以及球蟲病等并發(fā)或繼發(fā)感染的病例明顯增多，從而使得雞因多重感染而迅速衰竭死亡，死亡率大幅增加，疫情難以從根本上得到控制。在生產(chǎn)中用于治療大腸桿菌病的藥物種類繁多，很多養(yǎng)殖戶在雞群發(fā)病后盲目、重復(fù)、超量用藥，造成該菌株產(chǎn)生耐藥性，使藥物治療達(dá)不到預(yù)期的效果。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

LB培養(yǎng)液；PBS緩沖液；麥康凱瓊脂、普通瓊脂、普通瓊脂斜面均按文獻(xiàn)配制；藥敏試紙購自上海藥物研究所；硫酸慶大霉素：590 IU，批號20090121；硫酸多粘菌素B片：20 000 IU，批號20090219；頭孢噻呋：600 IU，批號20090111；硫酸新霉素：750 IU，批號20090213；某養(yǎng)殖場30日齡發(fā)病羅斯308雞300羽；實驗室常用儀器。

1.2 病原菌的分離培養(yǎng)

無菌采取具有敗血癥、心包炎、肝周炎等病理變化的病死雞肝組織50份，研磨后用PBS液懸浮并進(jìn)行反復(fù)吹打，分別接種于普通瓊脂和麥康凱瓊脂養(yǎng)基上，37 ℃培養(yǎng)24 h，挑選麥康凱瓊脂平板上磚紅色菌落接種普通瓊脂斜面進(jìn)行純培養(yǎng)，培養(yǎng)后膠塞密封，置4 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 藥敏試驗

將分離純菌株接種于LB液中，經(jīng)37 ℃，230 r/min培養(yǎng)12 h；培養(yǎng)菌液在4 ℃，3 000 r/min離心，棄去上清液，用PBS液稀釋至10 mL，并反復(fù)吹打混勻，吸取100 μL稀釋液均勻涂布營養(yǎng)瓊脂平板，再放入藥敏紙片，置37 ℃培養(yǎng)24 h，觀察測量抑菌圈的大小并記錄結(jié)果。判定標(biāo)準(zhǔn)是抑菌圈直徑小于10 mm為抗藥，直徑在10～15 mm為中度敏感，直徑大于15 mm為高度敏感。

1.4 治療

試驗選取30日齡發(fā)病雞300羽 ，隨機分成5組，每組60羽，各組給藥情況分別采取自由飲水與采食。第I組飲服硫酸新霉素30 mg/L（H2O）；第II組混飼硫酸多粘菌素2 mg/kg（飼料）；第III組混飼頭孢氨芐膠囊20 mg/kg（飼料）；第IV組混飼硫酸慶大霉素片 30 mg/kg（飼料）；第V組為對照組，不做治療。每日投藥1次，連續(xù)用藥5 d。在投藥期間，觀察雞的各種臨床反應(yīng)，記錄其精神狀況、食欲、是否呼吸困難、拉稀、死亡情況；剖檢是否可見心包炎、肝周炎等。并進(jìn)行統(tǒng)計成活率、死亡率評價治療效果。

2 結(jié)果

2.1 藥敏試驗

2.2 藥物治療試驗

3 討論

通過藥敏試驗選擇高敏藥物，發(fā)現(xiàn)新分離的50株大腸桿菌對多粘菌素B的敏感性最高，高敏感株比達(dá)到 96 %，結(jié)合對雞大腸桿菌病進(jìn)行治療，能明顯觀察到病雞精神有所好轉(zhuǎn)，采食量上升，拉黃白稀糞便數(shù)量減少。在連續(xù)給藥5 d后，大多數(shù)雞的食欲恢復(fù)正常，拉黃白稀糞便數(shù)量明顯減輕或消失，根據(jù)治療效果顯示多粘菌素B的療效最好，治愈率達(dá)91 %，沒有出現(xiàn)死亡現(xiàn)象。頭孢噻呋、新霉素對大腸桿菌的藥敏感試驗雖然高敏感菌株比相對較高，但在治療中發(fā)現(xiàn)，治愈率相對較低，分別為80 %和76.6 %，死亡率分別是10 %和15 %，這可能與該養(yǎng)殖場長期使用這兩種藥物有關(guān)，從而造成該菌株的耐藥性。硫酸慶大霉素的藥敏試驗中敏感株比最低，結(jié)合治療試驗發(fā)現(xiàn)治愈率只有53.3 %，而死亡率達(dá)到31.7 %。說明上述四種藥物的藥敏試驗以及對應(yīng)的治療試驗相統(tǒng)一，因此在選擇治療雞大腸桿菌病的藥物上要充分考慮本場的實際用藥情況，對于經(jīng)常用于治療雞病的抗生素應(yīng)該做一些藥敏試驗，選擇敏感性較高的藥物進(jìn)行治療，以免造成疫病擴散或久治不愈，帶來不必要的經(jīng)濟損失。