高致病性豬藍耳病毒及豬圓環病毒2型混合感染的診斷

摘要 [目的] 對湖北省某豬場發生的以體溫升高、部分病豬死亡等為主要特征的疾病進行診斷。[方法] 采集發病豬的脾臟、淋巴結等樣品，應用PCR方法進行實驗室檢測。[結果] 經實驗室檢驗，結合臨床癥狀，診斷為HPPRRSV及PCV2混合感染。高致病性豬藍耳病毒陽性率為40%，豬圓環病毒2型陽性率為90%。[結論]通過采取綜合防控措施，病情得到有效控制，減少了豬場的經濟損失。

關鍵詞 高致病性豬藍耳病毒；豬圓環病毒2型；混合感染；診斷

中圖分類號 S852.65+1 文獻標識碼 A 文章編號 0517-6611（2014）17-05495-02

Abstract [Objective] The research aimed to diagnose the disease with higher body temperature and death of some pigs as main characteristics in a pig farm in Hubei Province.[Method] The spleen and lymph node and other samples of diseased pigs were collected to make laboratory detection by PCR method. [Result] It was diagnosed as the mixed infection of HPPRRSV and PCV2 by laboratory detection based on the clinical symptoms. The positive rate of HPPRRSV was 40% and PCV2 positive rate was 90%. [Conclusion] The disease was effectively controlled by taking the comprehensive prevention and control measures， which reduced the economic loss of pig farm.

Key words HPPRRS V； PCV2； Mixed infection； Diagnosis

豬繁殖與呼吸綜合征（Porcine.reproductive and respiratory syndrome，PRRS）又稱豬藍耳病，是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）引起的，以母豬繁殖障礙和仔豬呼吸道疾病為主要癥狀的豬主要傳染病之一[1]。郭寶清等[2]于1996年從北京地區分離到PRRSV，首次證實了PRRS在我國的發生。2006～2007年豬“高熱病”在我國的大部分省區發生，給養豬業造成了巨大的經濟損失，其主要病原之一是變異的PRRSV，也稱為高致病性PRRSV（HPPRRSV）[3]。

豬圓環病毒?。≒CVD）是由豬圓環病毒2型（PCV2）引起的一種傳染病。PCV2可導致斷奶仔豬多系統衰竭綜合征的發生，也與豬的腎病、皮炎綜合征和仔豬先天性震顫相關[4]。PCV2不僅造成豬生長緩慢、飼料報酬降低，還可造成機體免疫抑制，引起其他疾病的爆發[5]，嚴重危害養豬業的發展。

2013年10月，湖北省某豬場發生了以體溫升高、食欲減退、咳嗽，部分病豬死亡為特征的疾病，剖檢采樣后經實驗室檢驗，結合臨床癥狀，診斷為HPPRRSV及PCV2混合感染。該豬場發病豬為3月齡以上育肥豬，初期發病豬30余頭，此后發病豬逐漸增多，發病豬約450頭；臨床癥狀主要為：病豬體溫41 ℃左右，咳嗽，食欲減退，部分病豬皮膚發紅，部分病豬皮膚蒼白，病重者呼吸困難，最后導致死亡。剖檢病變主要為肺部間質性肺炎，心包積液，腎臟有出血點，胃充血，脾臟稍有腫大，頜下淋巴結及腹股溝淋巴結腫大。采集脾臟、淋巴結等樣品以供實驗室檢驗。對發病豬曾用抗生素類藥物治療，療效不理想。該豬場于仔豬21日齡同時注射豬藍耳病疫苗和豬圓環病毒疫苗。采取綜合防治措施后，病情得到有效控制，減少了豬場的經濟損失。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試樣品為10份組織樣品。DNA、RNA提取試劑盒、Taq DNA聚合酶，均購自TaKaRa公司；RNA反轉錄試劑盒，購自Fermantas公司；引物均由上海Sangon生物工程公司合成。

1.2 檢測方法

高致病性豬藍耳病毒株與普通株鑒別采用反轉錄-聚合酶鏈式反應（RTPCR）方法，PCV2病原檢測采用聚合酶鏈式反應（PCR）方法，試驗方法均按照試劑盒說明書及分子克隆實驗指南（第3版）[6]操作。

3 討論

（1）根據實驗室檢驗結果，HPPRRSV陽性率為40%（4/10），PCV2陽性率為90%（9/10），結合臨床癥狀、剖檢變化，診斷該豬場發生的疾病為HPPRRSV及PCV2混合感染。

（2）針對診斷結果，通過采取綜合防控措施，病情得到了有效控制。

①隔離消毒。對發病豬群立即采取隔離措施，并且由專人負責飼養管理。加強豬場內消毒，每2～3 d全場消毒1次，最大限度消滅豬場內的傳染源，降低豬群感染PRRSV、PCV2及其他病原繼發感染的概率；適當調整豬群飼養密度，保持場內環境清潔衛生，保證給予豬群舒適干凈的生長環境。豬場的飼養員嚴禁交叉串棟。對病死豬嚴格進行無害化處理。

②對癥治療。治療手段以控制細菌繼發感染和增強豬體的免疫機能為主。選用替米考星、鹽酸多西環素等抗菌藥物，配合使用黃芪多糖、電解多維等藥物，保證充足飲水，必要時可采取輸液等方法進行治療，加強護理，促進機體康復。

③免疫接種。對未發病豬群使用豬高致病藍耳 病疫苗和豬圓環病毒疫苗進行緊急免疫接種，2種疫苗免疫 時間要有一定的間隔，注射疫苗保證免疫到位，提高豬群整體的免疫力，防制疾病繼續發生和擴散。

（3）此次疾病的發生可能是因為該豬場同時免疫豬藍耳病疫苗和豬圓環病毒疫苗2種疫苗，導致免疫失敗而引起。眾所周知，高致病性豬藍耳病是一種免疫抑制疾病，是目前困擾養豬正常生產的重要傳染病之一。由于PRRSV侵害免疫系統后能形成持續性感染，豬場感染后的帶毒率較高，有的豬場即使已進行疫苗免疫，仍然可能零星發生或隱形帶毒。因此，在實際生產中防治豬藍耳病，不僅要選用高效安全的疫苗，進行科學免疫接種，還應做好生物安全規范、加強飼養管理、完善預警監測等其他綜合防控措施。

（4）豬圓環病毒病也是一種免疫抑制疾病，病原可破壞機體的免疫系統，導致機體抗病力降低。PCV2經常與PRRSV、豬偽狂犬病毒、副嗜血桿菌等病原發生混合感染或繼發感染，如果豬場發病后，疫情會更加嚴重，病死率也大大增加。當PCV2與PRRSV同時感染時，PRRSV可以促進PCV2在體內的增殖。目前對豬圓環病毒病的防制主要是使用滅活疫苗對豬群進行免疫預防，同時結合生物安全、飼養管理和藥物預防等綜合防控措施，以達到防治該病的目的。

綜上所述，對豬藍耳病和豬圓環病毒病的防制，應采取健全生物安全措施、科學免疫接種、定期病原監測和加強飼養管理等綜合防控措施，才能有效控制疾病的發生。若要消除PRRSV和PCV2，可考慮清除帶毒豬，以達到凈化疾病的目的，凈化實施過程中由于涉及大量種豬的淘汰和引進更新，投入的時間和經濟成本都會很高，可考慮先由原種豬場實施。

參考文獻

[1]DEA S，ROSSOW R.Current knowledge on the structural proteins of porcine reproductive and respiratory syndrome virus（PRRSV）：comparision of the North American and European isolates[J].Arch Virol，2000，145：659-688.

[2] SHEN S，MENG X，WESLY R，et al.Determination of the cornplete nucleotide sequence of a accine strain of porcine reproductive and respiratory syndrome virus and identification of the Nsp2 gene with a unique insertion[J].Arch Virol，2000，145：871-883.

[3] 何世成，鄒敏，劉道新，等.高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒RT—PCR檢測方法的建立[J].動物醫學進展，2009，30（7）：10-13.

[4] 周繼勇，陳慶新，葉菊秀，等.豬圓環病毒2型感染的血清學分析[J].中國獸醫學報，2004，24（1）：1-3.

[5] 郭銳，曹宏云，田永祥，等.豬圓環病毒病的綜合防制[J].國外畜牧學-豬與禽，2010，30（6）：90-92.

[6] 趙德明，張中秋，沈建中，等.豬病學[M].9版.北京：中國農業大學出版社，2008：332-333.