摘要:目的 對尿液的干化學分析法檢測尿潛血反應和尿沉渣鏡檢紅細胞(RBC)兩種檢驗方法的結果進行對比分析。方法 對480例門診患者的尿樣按照儀器操作規程進行尿液干化學分析法檢測尿潛血和尿沉渣顯微鏡檢查紅細胞。結果 干化學分析法潛血反應陽性,同時鏡檢有紅細胞者191例,鏡檢無紅細胞者37例。干化學分析法潛血反應陰性,鏡檢有紅細胞者19例,無紅細胞者233例。兩種檢測方法結果出現差異。結論 臨床工作中尿液干化學分析法潛血反應與顯微鏡檢查紅細胞應聯合進行,尤其是顯微鏡檢查至關重要。
關鍵詞:干化學分析法;潛血反應;鏡檢紅細胞
尿液干化學分析法的快速,簡便,準確,使其在各級醫療機構的檢驗科得到了迅速普及,它不但使患者和臨床醫生在第一時間就能得到檢驗結果,更使檢驗人員的勞動強度大幅度降底。但干化學分析法檢測原理是尿中相應的化學成分使尿多聯試帶上相應試劑模塊發生顏色變化,顏色深淺與尿中相應物質濃度成正比[1]。而沉渣顯微鏡檢查則是通過顯微鏡的放大作用直接將細胞等有形成分直觀真實地呈現在鏡下,因此顯微鏡檢查更為直觀,準確,不應被忽視。現對干化學分析法檢測尿潛血和尿沉渣鏡檢紅細胞的符合程度進行對比分析,發現兩種結果出現顯著差異,因此,本研究對480例門診患者的隨機尿樣做了干化學分析法檢測尿潛血和尿沉渣鏡檢紅細胞對比分析。現報告如下:
1原理和方法
1.1兩種方法的原理干化學分析法中的尿潛血反應是根據血紅蛋白(Hb)中亞鐵血紅素的過氧化物酶樣活性可使過氧化物分解釋放出新生態,后者氧化底物鄰甲苯胺變成鄰聯甲苯胺發生由黃色→草綠色→深藍色的顏色變化,其顏色深淺與尿中血紅蛋白濃度成正比。尿液顯微鏡檢查則是通過顯微鏡的放大作用直接將細胞等有形成分直觀真實地呈現在鏡下,是對底物的真實反映。
1.2方法
1.2.1干化學分析法使用由山西亞森生產的FA-800尿液分析儀及儀器配套使用的尿分析試紙條。于混勻的10ml新鮮尿液浸入尿試紙條1s后取出,進行儀器測定。實驗測定后,自動打印結果。
1.2.2鏡檢方法于刻度離心管中加入混勻后新鮮尿液10ml,以1500r/min離心5min,棄去上清液,留沉淀0.2ml,輕搖使尿沉渣有形成分混勻后取0.02ml于載玻片上鏡檢,加蓋玻片(2.0cm×2.0cm),然后用較弱的光線以低倍鏡觀察全貌,以免漏掉量少而有意義的物體,再用高倍鏡辨認細胞[2]。結果報告為:х個/高倍視野(HP)。本方法所使用的顯微鏡是Olympus顯微鏡(日本奧林巴斯株氏會社)。
1.3統計學處理 采用x2檢驗。
2結果
見表1。
注:干化學分析法潛血反應+也歸為+
由表1可以反映出干化學分析法潛血反應和鏡檢紅細胞兩種檢驗結果存在一定差異。
3討論
由于尿液干化學分析法測潛血反應與鏡檢紅細胞的原理不同,所受各種干擾影響因素也不一樣,現討論分析如下:
3.1假陽性即尿液干化學分析法潛血反應陽性,鏡檢陰性,其常見原因有:①血紅蛋白(Hb)尿液干化學分析法潛血反應既能與完整的RBC發生陽性反應,也可與RBC溶解釋放的Hb發生陽性反應,而顯微鏡只能檢出尿中未溶解的RBC。健康人尿中Hb含量極微,定性為陰性。疾病時,尿中Hb有兩個來源:一是發生血管內溶血,血漿Hb超過了結合珠蛋白的結合能力,游離Hb從尿中排出。另一個是尿路(尤其是上尿路)出血,RBC在高滲或(和)低滲時破壞Hb逸出。此時,尿液干化學分析法潛血反應陽性,但尿沉渣鏡檢不見RBC或僅見RBC碎片。②肌紅蛋白(Mb)分子中也含有血紅素基團,具有過氧化物酶活性。Mb主要存在于心肌和骨骼肌組織中,正常人尿中含量甚微,不能檢出。當心肌或骨骼肌發生嚴重損傷時,血漿Mb增高,經腎臟排泄,使尿液Mb含量增高,故潛血反應呈陽性,鏡檢RBC為陰性。③某些患者尿液中含有對熱不穩定酶,也可使試劑塊發生顏色改變,出現潛血反應陽性,鏡檢為陰性。④某些氧化性污染物,例如次氯酸鹽會導致潛血反應假陽性。⑤菌尿尿液是細菌良好的培養基,菌尿時有些細菌會產生氧化性物質,使得試劑塊發生顏色變化,導致潛血反應陽性,鏡檢RBC為陰性。此外,微生物過氧化酶的侵入也可引起假陽性。⑥長時間存放及高溫實驗證明,標本不新鮮,存放時間長或高溫存放,使潛血反應的陽性率相對增高,而RBC鏡檢相應減少,測試結果極有可能出現假陽性。因此,建議尿液標本存放時間不得超過2h。⑦尿試紙條的超期使用或被污染以及不妥善保存和操作方法的不正確,均可造成測試結果假陽性。⑧尿液分析儀靈敏度過高(0.2mg/dl出現++),\"級差\"范圍太大(0.8~50mg/dl級為+++),常會遇到儀器測試為++,而鏡檢測試紅細胞為陰性,臨床上又找不到任何導致血紅蛋白尿原因的情況。
3.2假陰性即鏡檢陽性,尿液干化學分析法潛血反應陰性,其常見原因有:①食物或藥物的影響:由于飲食或藥物使尿液呈堿性時,RBC溶解破裂,形成褐色顆粒,潛血反應呈陽性,而鏡檢呈陰性。②VitC尿液中大量存在時,能競爭性奪取反應產生的氧,引起假陰性反應。③高比重、高蛋白尿樣降低了試劑塊潛血反應的靈敏度,使潛血反應出現假陰性。④尿液中黏液成分增多,使RBC被包裹起來,試劑接觸不到Hb,而使潛血反應呈現假陰性。
3.3離心對結果的影響離心時,如速度過快,可使有形成分破壞;但速度過慢,當每毫升尿液中的RBC在5000以下時,沉渣中可能找不到RBC,以至把隱匿型腎小球腎炎漏掉,因而在對檢驗結果有懷疑時,可用潛血反應證實。
因此,兩種尿檢潛血的方法都并非完美無缺。干化學分析法能檢測到溶解的紅細胞,但干化學分析法檢測潛血假陽性較多,所以必須用顯微鏡法予以驗證,以保證報告的可靠性。顯微鏡法雖是尿液紅細胞檢驗的金標準,但對已溶解破壞的紅細胞卻不能檢出。兩種方法各有其優勢和弊端,只能說是優勢互補,絕對不能互相替代。尿沉渣鏡檢以其獨特的臨床價值仍是尿液分析中不可缺少的檢查手段。
參考文獻:
[1]熊立凡,劉成玉.臨床檢驗基礎[M].第4版.北京:人民衛生出版社,2007:191.
[2]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].第3版.南京:東南大學出版社,2006:297.
編輯/王海靜