189株金黃色葡萄球菌中紅霉素對克林霉素誘導耐藥分析

摘要：目的 探討金黃色葡萄球菌臨床分離株對紅霉素和克林霉素的耐藥性及紅霉素對克林霉素誘導耐藥分析。 方法 采用紙片擴散方法測定金黃色葡萄球菌對紅霉素和克林霉素的耐藥性，并以D-試驗法測定紅霉素對克林霉素的誘導耐藥表型。結果 189株金黃色葡萄球菌中耐甲氧西林135株占71.43%，甲氧西林敏54株占28.57%。紅霉素和克林霉素均耐藥的105株占55.56%，紅霉素和克林霉素均敏感19株占10.05%，紅霉素耐藥而克林霉素敏感65株占34.39%。對紅霉素耐藥而克林霉素敏感的MRSA和MSSA誘導耐藥發生率分別為62%和66.67%。結論 檢測金黃色葡萄球菌中克林霉素誘導性耐藥可以指導臨床醫師合理選用抗菌藥物。

關鍵詞：金黃色葡萄球菌；紅霉素；克林霉素；耐藥率；誘導耐藥

金黃色葡萄球菌屬（MRSA）已成為引起醫院和社區化膿感染的重要病原菌，臨床金黃色葡萄球菌感染廣泛應用了大環內酯類、林可酰胺類和鏈陽菌素B類（MLSB）抗菌藥物治療，尤其是組織滲透強、價格低等特點的克林霉素常被作為對青霉素和頭孢菌素過敏的替代首選藥品。近年來，隨著耐藥性病原菌的不斷增加，大環內酯類藥物已呈現較高的耐藥性，且紅霉素具有誘導克林霉素耐藥的作用[1]。本文實驗通過D-試驗法對金黃色葡萄球菌中紅霉素對克林霉素的誘導耐藥作用進行檢測，以便指導臨床合理用藥，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料 本院2012年11月～2013年12月分離收集金黃色葡萄球菌標本189株作為研究對象，其中痰標本78株、分泌物62株、10株為血標本、23株為咽拭子、尿標本及導管標本等。紙片擴散法藥敏試驗的質控菌株為標準菌株金黃色葡萄球菌。

1.2 方法

1.2.1 儀器及藥敏紙片 德靈MicroScan-4細菌鑒定儀以及配套的鑒定卡PC20；MH瓊脂、頭孢西丁（FOX，30μg/片）、紅霉素（15μg/片）、克林霉素（2μg/片）紙片為英國OXOID公司產品。

1.2.2 藥敏試驗 采用紙片擴散法檢測紅霉素和克林霉素的耐藥性及用頭孢西丁確診MRSA，質控菌株金黃色葡萄球菌ATCC25923。

1.2.3 D-試驗 按2009年美國臨床實驗室標準化協會（CLSI）標準操作[2]。紅霉素耐藥而克林霉素敏感株，用生理鹽水成菌0.5個麥氏單位液均勻涂布在4mm厚的MH瓊脂平板上。間隔15～20mm貼上紅霉素和克林霉素紙片，置孵育箱孵育18～24h（恒溫35℃）。若鄰近克林霉素抑菌環出現\"截平\"現象，即D-試驗陽性；若克林霉素抑菌環不出現\"截平\"現象，即D-試驗陰性。

1.3統計學處理 數據采用WHONET5.3進行處理，計數資料采用χ2檢驗并比較二者差異有無統計學意義。

2 結果

2.1 MRSA的檢出率 189株金黃色葡萄球菌中MRSA 135株占71.43%，MSSA 54株占28.57%。

2.2 耐藥表型 135株MRSA中，紅霉素和克林霉素均敏感的7株，紅霉素和克林霉素均耐藥的78株，紅霉素耐藥而克林霉素敏感的50株。54株MSSA中，紅霉素和克林霉素均敏感的12株，紅霉素和克林霉素均耐藥的27株，紅霉素耐藥而克林霉素敏感的15株（見表1）。

注：Er為紅霉素；CI為克林霉素；R為耐藥；S為敏感

2.3 克林霉素誘導耐藥發生率 金黃色葡萄球菌中紅霉素耐藥克林霉素敏感65株，D-試驗陽性41株，誘導耐藥發生率為63.08%。其中50株MRSA試驗陽性31株發生率為62%；15株MSSA試驗陽性10株發生率為66.67%（見表2）。

3 討論

金黃色葡萄球菌是引起醫院和社區化膿感染各種感染的重要病原菌之一，可引起全身不同部位的感染。近年來，MRSA的感染率呈現逐年上升的趨勢，其嚴重的多重耐藥性已成為臨床上較為棘手的問題[3]。MRSA對大環內酯類抗菌藥物的耐藥機制主要有兩種[4]：前者由msrA基因編碼外排蛋白導致對大環內酯類和鏈陽霉素的耐藥，對克林霉素敏感。后者由msr基因編碼， 引起對具有相同靶位的大環內酯類、林可霉素類和B型鏈陽霉素同時耐藥（MLSB耐藥），耐藥可分為結構型（cMLS）和誘導型（iMLS）。

克林霉素由于具有組織滲透性強、價格低等特點，是葡萄球菌感染，特別是皮膚和軟組織感染及對青霉素過敏患者的首選藥物[5]。常規紙片擴散法藥敏試驗可鑒別結構型cMLS型耐藥的金黃色葡萄球菌，而誘導型iMLS型和MS型耐藥菌株則無法鑒別。應在所有臨床微生物實驗室內推廣D-試驗檢測紅霉素對克林霉素的誘導耐藥性。在克林霉素臨床治療中，如果克林霉素敏感而紅霉素耐藥的表型為誘導耐藥，且誘導試驗沒有做的情況下，會致使治療失敗。故在金黃色葡萄球菌耐藥性監測中，開展D-試驗可幫助臨床合理有效及時的使用正確的抗菌藥物。

參考文獻：

[1] 俞蕙，吳霞.耐甲氧西林金黃色葡萄球菌耐藥機制及研究進展[J].實用兒科臨床雜志.2012， 27（22）：1704-1706.

[2] National Committee for Clinical Laboratory Standards.Performance standards for anfimierobial susceptibilitytesting[S].M100-S19，CLSI，2009.

[3] 饒榮，劉志軍，譚東云.我院金黃色葡萄球菌的分布特點、耐藥性分析及治療對策[J].現代中西醫結合雜志.2011， 20（7）：874-875.

[4] 孫建文，萬新亮，任孔華.金黃色葡萄球菌對紅霉素和克林霉素誘導耐藥分析[J].檢驗醫學.2010， 25（9）：675-677.

[5] 李彥媚，李純厚，趙喜紅，等.金黃色葡萄球菌檢測方法的研究進展[J].安徽農業科學.2012， 40（16）：8927-8929.

編輯/王海靜