普濟拔毒膏體外抗菌活性的觀察

摘要：目的 觀察普濟拔毒膏對常見致病菌的體外抗菌活性，初步判定其體外抗菌譜。方法 精密稱取普濟拔毒膏1000mg，使用10ml DMSO將藥物溶解，使其終濃度為100mg/ml，備用。采用瓊脂擴散法（打孔法） 觀察其對大腸桿菌、表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、奇異變形桿菌、綠膿桿菌及化膿性鏈球菌的體外抗菌活性，同時設置DMSO陰性對照組、熱毒寧陽性對照組。 結果 普濟拔毒膏體外對大腸桿菌、表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌、綠膿桿菌及鏈球菌具有明顯的抗菌活性。結論 體外抗感染是普濟拔毒膏治療瘡瘍火毒的重要機理之一。

關鍵詞：普濟拔毒膏；體外；抗菌活性

普濟拔毒膏為王樓五官科門診部許永貴醫師祖傳外用秘方，臨床常將其制備成黑膏藥使用，具有清熱解毒、涼血消腫、化腐生肌之效，根據多年臨床觀察普濟拔毒膏對癰疽、疔瘡、癤腫、流痰、流注、瘰疬等瘡瘍相關性疾病及痄腮（流行性腮腺炎）具有良好效果，但對該方卻鮮有其現代化研究，為進一步說明其作用機理、促進其開發利用，筆者決定對其藥理作用展開研究。而根據現代醫學理論，痄腮是由腮腺炎病毒引起呼吸道傳染病[1]，火毒瘡瘍是由細菌感染引起的外科常見病多發病[2]，故筆者首先觀察了普濟拔毒膏體外對常見致病菌的抗菌活性，現將研究結果報告如下：

1 實驗材料

1.1實驗試劑及藥物 營養瓊脂：上海盛恩生化科技有限公司；營養肉湯：杭州微生物試劑有限公司； DMSO：濟南世紀通達化工有限公司；NS：哈爾濱同一堂藥業有限公司提供；林可霉素注射液：由浙江濟民制藥有限公司提供；普濟拔毒膏：由王樓五官科門診部提供。

1.2實驗儀器 FA1004電子天平：上海天平廠；孵箱：上海分析儀器廠；YXQ-2S-50SⅡ立式壓力蒸汽滅菌器：上海博迅實業有限公司醫療設備廠；生物安全柜BSC-1500ⅡA2-x：濟南鑫貝亞生物技術有限公司。

1.3實驗菌株 大腸桿菌、表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、奇異變形桿菌、綠膿桿菌及化膿性鏈球菌由漯河醫學高等?？茖W校醫學檢驗實訓管理中心提供。

2 實驗方法

2.1實驗用藥物配制 100mg/ml普濟拔毒膏溶液：精密稱取普濟拔毒膏1000mg，使用10ml DMSO將藥物溶解，使其終濃度為100mg/ml，備用。

林可霉素（30ug/ml）：取鹽酸林可霉素注射液一支（2ml：0.6g），無菌條件下取0.01ml，加入10ml蒸餾水中，即為30ug/ml的林可霉素，備用。

2.2增菌培養 取大腸桿菌、表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌、綠膿桿菌及鏈球菌菌株少許，接種于肉湯培養基中，37℃培養24h，取出用NS稀釋至比濁度為0.5麥比，即1.5×108CFU/ml，15min內接種于瓊脂平板中用于實驗。

2.3抗菌活性測定--瓊脂擴散法（打孔法）[3] 將瓊脂培養基熔化后傾注于平皿制備平板，每平皿20ml，待其凝固。用無菌注射器吸取2.2項下制備的試驗菌0.1ml均勻涂布于表面已干的上述肉湯瓊脂平板上。待其干燥數分鐘后用無菌鋼管打四個孔，每孔注入2.1項下所制備藥液0.1ml，每種藥物4個復孔，每塊平板涂布一種試驗菌，實驗時設置林可霉素陽性對照組和DMSO陰性對照組。37℃孵育24h后用直尺測量抑菌圈直徑，取抑菌圈直徑平均值，評價普濟拔毒膏對常見致病菌的抗菌活性。

3 實驗結果

見表1。

由結果可見：普濟拔毒膏藥液對皮膚及軟組織感染常見致病菌金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、化膿性鏈球菌、綠膿桿菌具有良好的抗菌作用，其對金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑為18.3mm，對表皮葡萄球菌的抑菌圈直徑為18.0mm，對化膿性鏈球菌抑菌圈直徑為11.4mm，對綠膿桿菌抑菌圈直徑為13.1mm。普濟拔毒膏除對皮膚及軟組織感染常見致病菌有良好抗菌活性外，對大腸桿菌及奇異變形桿菌也具有良好的抗菌活性，對大腸桿菌的抑菌圈直徑為15.1mm，對奇異變形桿菌的抑菌圈直徑為12.8mm。提示普濟拔毒膏對常見致病菌具有良好的抗菌活性。

4 討論

普濟拔毒膏為中醫外用方劑，臨床常將其制備成黑膏藥使用，具有涼血消腫、拔毒化腐生肌之效，對瘡瘍相關性疾病及痄腮（流行性腮腺炎）具有良好效果。其中火毒瘡瘍屬于中醫外科常見病群，包括癰、疔、癤、流痰、流注、瘰疬等，根據現代醫學機理該類疾病指一切體表外科疾病的總稱，狹義上指體表化膿性疾病，其常見致病菌包括金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、化膿性鏈球菌、綠膿桿菌等[4]，故該類疾病治療主要依靠抗菌藥物 。但部分患者因細菌毒素、局部炎癥等因素的影響，瘡口經久不愈，給患者的生活和工作帶來巨大的不便，西藥對此類疾病作用微弱[5]，而普濟拔毒膏在治療此類疾病時表現出明顯的優勢，根據臨床經驗和文獻顯示中藥外治法對此類疾病的治療是通過多種途徑共同產生作用，包括局部抗菌、增強機體全身及局部免疫功能、促進肉芽組織增生、促進瘡面血管再生改善瘡面微循環、調節瘡面分泌、促進上皮細胞生長等[6，7]。

筆者為闡明普濟拔毒膏的作用機理，促進其開發利用，初步觀察了其體外抗菌作用，根據實驗結果可見：普濟拔毒膏對皮膚及軟組織感染常見致病菌具有良好的抗菌活性，其對金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑為18.3mm，對表皮葡萄球菌的抑菌圈直徑為18.0mm，對化膿性鏈球菌抑菌圈直徑為11.4mm，對綠膿桿菌抑菌圈直徑為13.1mm、對大腸桿菌的抑菌圈直徑為15.1mm，對奇異變形桿菌的抑菌圈直徑為12.8mm，提示其體外具有良好的抗菌活性。但因實驗條件限制本次僅選取了金葡菌、表葡菌、化膿性鏈球菌、綠膿桿菌等為觀察對象，筆者將在今后工作中繼續觀察其對其他致病菌的抗菌活性以明確其體外抗菌譜，指導其在臨床中的合理應用。

參考文獻：

[1]張軍育，李曉波.仙方活命飲治療痄腮的臨床體會[J].中醫中藥指南，2013，11（6）：257.

[2]李曉黎，程春生.中藥外治法促進慢性感染性創面愈合機理進展[J].中醫正骨，2007，19（4）：74-76.

[3]王勇，種麗君，宮少 波，等.愈潰膏的藥效作用研究[J].實用中西醫結合臨床，2009，9（2）：86-87.

[4]曹育春，徐祖森，陳如，等.皮膚及軟組織感染分離菌對抗菌藥物的敏感性分析[J].醫藥導報，2007，21（7）：419-421.

[5]李應全，張萍，馬劍峰.生肌愈皮膏的實驗與臨床研究[J].中國現代應用藥學雜志，1998，15（2）：3-5.

[6]岳金換，張秦宏，孫忠人.中藥外治瘡瘍的臨床研究現狀及分析[J].中醫外治雜志，2013，22（4）：55-56

[7]張庚揚，李曉軍.瘡瘍疾病相關的外用中藥研究概述[J].環球中醫藥，2010，3（2）：101-105.

編輯/許言