ER、PR和AR在子宮內膜異位癥組織中的表達及其意義*

郭歡任藝婷李曉燕李兆艾

ER、PR和AR在子宮內膜異位癥組織中的表達及其意義*

郭歡①任藝婷①李曉燕①李兆艾②

目的：研究ER、PR及AR在內異癥異位內膜、在位內膜和正常對照子宮內膜組織中的表達，闡述性激素及其受體與子宮內膜異位癥發生機制的關系，探究治療EMs的新途徑。方法：利用免疫組織化學的方法檢測50例EMs患者異位內膜、在位內膜及20例正常對照子宮內膜組織中ER、PR及AR的表達情況。結果：ER在EMs患者在位子宮內膜組織中的表達均明顯高于異位內膜及正常對照子宮內膜，比較差異均有統計學意義（P＜0.05）；PR在EMs患者異位內膜組織中的表達明顯低于在位內膜及正常對照子宮內膜，比較差異均有統計學意義（P＜0.05）；AR在EMs患者異位內膜組織中的表達明顯低于在位內膜及正常對照子宮內膜，比較差異均有統計學意義（P＜0.05）。結論：EMs患者異位內膜PR及AR表達的相對增高可能在內異癥的發生與發展中起著一定的作用。

子宮內膜異位癥； 雌激素受體； 孕激素受體； 激素受體； 免疫組織化學

子宮內膜異位癥（EMs）是常見婦科疾患之一，其發病率有逐年增加的趨勢。其發病機制不清，治療效果不理想。子宮內膜異位癥是一種雌激素依賴性疾病，其發病于育齡期，卵巢激素對它的發生發展有著重要的作用，子宮內膜作為性激素的靶器官，存在著性激素的受體，性激素與其受體結合發揮作用。本研究采用免疫組織化學的方法檢測三種性激素受體在EMs患者的在位及異位內膜的表達，以探討內異癥的發病機理及激素治療等問題。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2011年6月-2013年8月在山西省婦幼保健院行手術治療的70例患者，經過患者的知情同意，研究對象年齡在20～45歲之間。其中研究組50例為經腹腔鏡檢查確診的子宮內膜異位癥患者，標本為腹腔鏡手術切除卵巢囊腫的囊皮及其在位子宮內膜。按美國生育協會修正（r-AFS）的分期標準，均為Ⅲ～Ⅳ期子宮內膜異位癥。對照組20例為因卵巢冠囊腫或子宮中隔行手術治療的非內異癥患者，標本為患者的子宮內膜。所有術中取得組織立即用10%甲醛固定，常規脫水及石蠟包埋，置-20 ℃冰箱保存備用。所有患者月經周期規律，無其他內分泌、免疫和代謝性疾病，術前常規化驗肝、腎功能均正常，檢查腫瘤標記物以排除惡性腫瘤，術前3個月內未接受激素治療。

1.2 實驗方法 采用免疫組織化學方法檢測ER、PR及AR表達。操作嚴格按照試劑盒說明書進行。主要步驟：石蠟切片，常規脫蠟；滅活內源性過氧化物酶；抗原修復；山羊血清孵育；滴加一抗，4 ℃過夜；滴加二抗，37 ℃孵育30 min；滴加辣根酶標記鏈霉卵白素，37 ℃孵育30 min；DAB顯色；自來水充分沖洗，復染；脫水，封片。

1.3 檢測方法 由顯微攝像機將免疫組織化學取得的切片圖像輸入計算機，應用BI-2000醫學圖像分析系統（成都泰盟科技有限公司）對圖片進行灰度定量分析。每個樣本隨機選取5個不重疊400倍視野進行測量，計算每視野的ER、PR及AR的平均灰度值。利用平均灰度值代表ER、PR及AR在子宮內膜中的表達水平。指標表達的強弱與灰度值呈負相關，灰度值越小則陽性表達越強，灰度值越大則陽性表達越弱。

1.4 統計學處理 采用SPSS 16.0軟件對所得數據進行統計分析，計量資料用（±s）表示，比較采用t檢驗，計數資料采用 χ2檢驗，采用LSD-t法進行多重比較，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 ER在子宮內膜組織中的表達 EMs患者在位子宮內膜ER的灰度值為（111.88±6.01），均明顯低于EMs患者的異位內膜灰度值（137.88±3.73）及正常對照子宮內膜灰度值（140.35±6.24），比較差異均有統計學意義（P＜0.05）。ER 在EMs患者的異位內膜及正常對照子宮內膜中的表達差異無統計學意義（P＞0.05）。

2.2 PR在子宮內膜組織中的表達 EMs患者異位子宮內膜PR的灰度值為（154.12±5.77），高于EMs患者的在位內膜灰度值（134.29±4.84）及正常對照子宮內膜灰度值（132.40±4.01），比較差異均有統計學意義（P＜0.05）。PR 在EMs患者的在位內膜及正常對照子宮內膜中的表達差異無統計學意義（P＞0.05）。

2.3 AR在子宮內膜組織中的表達 EMs患者異位子宮內膜AR的灰度值為（149.26±5.12），高于EMs患者的在位內膜灰度值（132.88±2.89）及正常對照子宮內膜灰度值（131.87±6.25），比較差異均有統計學意義（P＜0.05）。AR 在EMs患者的在位內膜及正常對照子宮內膜中的表達差異無統計學意義（P＞0.05）。

3 討論

隨著分子生物學研究的進展，筆者發現性激素及其受體可能在EMs的發生、發展中起著重要作用。有研究顯示，EMs的發生可能與細胞凋亡的抑制而導致的腺體上皮過度增生存在相應聯系，說明EMs是性激素依賴性疾病，提示其發生與雌激素和孕激素有關[1]。盡管異位與在位內膜的結構和功能基本相同，但激素調節水平不同，其變化的幅度不如正常內膜明顯[2]。異位子宮內膜病灶的纖維化及組織分化的程度不同，局部生長環境不良，激素異構體的含量及其生物活性的不同以及腺體細胞中激素受體的變化等，造成了對激素反應的差異[3]。

研究表明，雌激素可以直接刺激異位病灶的細胞增殖，還可刺激多種因子參與卵巢子宮內膜異位癥的發病過程[4]。ER分為ERα及ERβ兩種亞型。有學者認為，卵巢子宮內膜異位組織上ER的表達可能是局部內異癥病灶種植和生長的必要條件。Matsuzaki等[5]運用RT-PCR及原位雜交的方法檢測發現在位及異位內膜腺上皮和間質細胞均有ER mRNA表達，異位內膜中ER的表達率均低于在位內膜。亦有研究顯示，子宮腺肌病患者在位內膜ER表達高于肌層異位內膜及對照組子宮內膜，異位內膜ER蛋白的表達高于對照組子宮內膜[6]。與Mehasseb等[7]的研究結果一致。同一EMs患者取自不同部位的異位內膜組織，其對雌激素的反應性也不同，提示了在位內膜特性的變化在某種程度上更能反映內異癥的病因[8]。本試驗結果顯示在位內膜中ER的表達，不僅顯著高于正常內膜，而且高于異位內膜。由此證明選擇性雌激素受體調節劑（SERM）的應用可延緩EMs的發生發展。孕激素與雌激素有相互協同的作用，同時，孕激素對雌激素又有拮抗作用，雌激素促進子宮內膜增生和修復。而孕激素則限制子宮內膜增生，并使增生的子宮內膜轉化為分泌期，孕激素類藥物是治療EMs的經典藥物，有研究推測其機制是通過使異位子宮內膜發生蛻膜樣改變，進而萎縮[9]。孕激素是通過孕激素受體（包括PRA和PRB）起作用的，PR的合成依賴于ER的合成通路。有研究顯示，在子宮內膜的增殖期和分泌期，EMs患者在位內膜PR表達均高于異位內膜，這種改變減輕了體內性激素周期性波動對在位子宮內膜細胞生長的影響，使在位子宮內膜細胞能夠持續低水平增殖[10]。亦有學者認為，腺肌病組ER、PR在腺肌病病灶的表達低于在位內膜[11]。本研究顯示，異位內膜中PR含量不僅低于在位內膜，且低于正常對照子宮內膜。相較于在位內膜，異位內膜上PR含量的相對減少，可能導致其降低或失去對雌激素控制的反應性，對揭示EMs的發病機制及選擇更有效的藥物治療方案具有一定意義。現階段孕激素受體調節劑（SPRM）如米非司酮在臨床上已得到很好的應用。

大量研究表明，雄激素過多會對雌激素產生拮抗作用，可減緩子宮內膜的生長和增值。對雄激素受體與子宮內膜異位癥的關系研究較少，王姝等[12]通過檢測人類雄激素受體基因多態性，對內異癥病灶的克隆特征進行了深入的檢測分析，結果顯示，內異癥病灶的腺上皮細胞具有單克隆性，從組織克隆性的角度佐證了內異癥是一種干細胞疾病的假說。本研究結果顯示，異位內膜中AR含量不僅低于在位內膜，且低于正常對照子宮內膜。推測增加EMs患者異位內膜中AR的含量，可延緩異位病灶子宮內膜的增長。

盡管EMs患者異位內膜的播散及種植受多種因素的影響，通過檢測其在位、異位內膜中三種性激素受體的表達，為探討其發病機制、選擇合理的治療方案提供了一種新的思路。

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The Expression and Significance of ER， PR and AR in Endometriosis Tissues

GUO Huan，REN Yi-ting，LI Xiao-yan，et al.//Medical Innovation of China，2014，11（12）：039-041

Objective：To explore the expression of ER， PR and AR in endometriosis ectopic endometrium， eutopic endometrium and normal endometrium tissues， describe the relationship between sex hormones and their receptors， and pathogenesis of endometriosis， and explore the new ways of treatment to EMs.Method：Immunohistochemistry was used to detect the expression of ER， PR and AR of 50 cases of ectopic endometrium and eutopic endometrium of patients EMs and 20 cases of normal endometrial tissue.Result：ER expression in eutopic endometrial tissue of EMs patients were higher than the normal endometrium and ectopic endometrium of patients， the differences were statistically significant （P＜0.05）.PR expression in ectopic endometrium tissue in EMs patients was less than the eutopic and normal endometrium， the differences were statistically significant （P＜0.05）. AR expression in ectopic endometrium tissue in EMs patients was less than the eutopic and normal endometrium， the differences were statistically significant （P＜0.05）.Conclusion：The relatively higher expression of PR and AR in EMs patients ectopic endometrium may play a role in the occurrence and development of endometriosis.

Endometriosis； Estrogen receptor； Progesterone receptor； Hormone receptor； Immunohistochemistry

10.3969/j.issn.1674-4985.2014.12.014

2014-02-13） （本文編輯：黃新珍）

山西省衛生廳科技攻關計劃資助項目（20100311102-2）

①山西醫科大學第二臨床醫學院 山西 太原 030001

②山西省婦幼保健院

李兆艾

First-author’s address：The Second Clinical Medical College of Shanxi Medical University，Taiyuan 030001，China