持續(xù)陰道超聲輻射后人胚早孕絨毛細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化研究

陳玉閣，孟軍，王海鷹，楊玉

(深圳市蛇口人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，廣東 深圳 518000)

·論著·

持續(xù)陰道超聲輻射后人胚早孕絨毛細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化研究

陳玉閣，孟軍，王海鷹，楊玉

(深圳市蛇口人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，廣東 深圳 518000)

目的探究持續(xù)陰道超聲輻射后人胚早孕絨毛細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化。方法選取我院2010年9月至2012年3月期間進(jìn)行人流的早孕患者80例，將其均分為兩組，試驗(yàn)組患者陰道超聲照射10 min，而對(duì)照組患者則照射5 min，然后在照射后24～30 h進(jìn)行人流并取絨毛組織進(jìn)行檢測(cè)，比較兩組患者照射后絨毛組織DNA及其超微結(jié)構(gòu)的變化情況。結(jié)果經(jīng)過(guò)檢測(cè)得到，試驗(yàn)組患者的絨毛組織單鏈DNA量為(0.19±0.06)μg/μl，雙鏈DNA量為(0.15±0.09)μg/μl，明顯低于對(duì)照組患者的(0.23±0.07)μg/μl和(0.19±0.07)μg/μl，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，試驗(yàn)組患者的絨毛組織超微結(jié)構(gòu)發(fā)生異常者40.00%，對(duì)照組為10.00%，差異也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論降低患者進(jìn)行陰道超聲輻射的時(shí)間可以減少患者絨毛細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變。

持續(xù)陰道超聲輻射；人胚早孕絨毛細(xì)胞；超微結(jié)構(gòu)；變化

近年來(lái)，隨著醫(yī)學(xué)的發(fā)展，超聲檢查越來(lái)越多地被應(yīng)用于醫(yī)學(xué)檢查方面，但是，這種超聲檢查會(huì)伴有一定的輻射，對(duì)人體造成傷害[1]。因此，為了探究持續(xù)陰道超聲輻射后人胚早孕絨毛細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響，我院選取80名意外懷孕，自愿要求終止妊娠的早孕患者進(jìn)行試驗(yàn)，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料選取我院2010年2月至2011年8月期間即將進(jìn)行人流的80例早孕患者為研究對(duì)象，根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分為兩組，試驗(yàn)組40例，年齡20～32歲，平均(25±1.3)歲，妊娠40～63 d；對(duì)照組40例，年齡21～34歲，平均(26±1.7)歲，妊娠42～63 d。所有患者在孕前均未進(jìn)行過(guò)超聲檢查，并且月經(jīng)規(guī)律，孕期無(wú)陰道流血癥狀，在懷孕半年以內(nèi)沒(méi)有服用過(guò)避孕藥，也都沒(méi)有流產(chǎn)史，懷孕近期內(nèi)均未發(fā)生感染現(xiàn)象，無(wú)吸煙飲酒的不良嗜好等。所有患者的一般資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。所有的患者均簽署知情同意書(shū)，了解并同意各自的治療方法。

1.2 方法①試驗(yàn)組患者在進(jìn)行人流前經(jīng)過(guò)陰道超聲照射10 min，對(duì)照組患者的照射時(shí)間為5 min，兩組患者的照射情況除了在時(shí)間長(zhǎng)短方面不同外，其他各項(xiàng)的條件均相同。采用百勝AU3 B型超聲診斷儀進(jìn)行檢查，將探頭的頻率設(shè)置為7.5 MHz，并且要求所有患者采取仰臥位，然后將經(jīng)陰道探頭置于陰道內(nèi)準(zhǔn)確找到妊娠囊，最后兩組患者進(jìn)行不同時(shí)間的照射。在經(jīng)過(guò)照射24～30 h后對(duì)所有患者進(jìn)行人工流產(chǎn)操作，取患者新鮮的絨毛組織，用生理鹽水沖洗后予2.5%的戊二醛和1%的四氧化鋨中固定。②細(xì)胞染色體的制備與測(cè)定：利用具有堿性解鏈作用的酶以及羥基磷灰石將絨毛細(xì)胞分離，然后通過(guò)紫外分光光度法對(duì)DNA單鏈斷裂(SSB)和雙鏈斷裂(DSB)進(jìn)行定量檢測(cè)。③觀察絨毛細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)：選取3～4根分枝較好的絨毛枝，放置在2.5%的戊二醛和1%的四氧化鋨中固定，然后用丙酮進(jìn)行梯度脫水，再用Epon812環(huán)氧樹(shù)脂進(jìn)行包埋，接著利用超薄切片機(jī)將其切片，并用醋酸雙氧鈾及檸檬酸鉛雙染色，最后通過(guò)透射電鏡觀察絨毛細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSSl5.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以百分比表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者經(jīng)過(guò)不同時(shí)間照射后絨毛組織DNA變化比較經(jīng)過(guò)定量檢查發(fā)現(xiàn)，兩組患者的單、雙鏈DNA含量的比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，表明試驗(yàn)組患者的DNA變異較大，而對(duì)照組患者經(jīng)照射后的變異較小，見(jiàn)表1。

表1 兩組患者絨毛細(xì)胞單雙鏈DNA含量比較（μg/μl，±s）

表1 兩組患者絨毛細(xì)胞單雙鏈DNA含量比較（μg/μl，±s）

2.2 兩組患者絨毛細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變異比較試驗(yàn)組患者的絨毛細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的異常率為40.00%，而對(duì)照組患者僅為10.00%，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2= 9.600 0，P＜0.05)，見(jiàn)表2。

表2 兩組患者絨毛細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變異情況比較（例）

3 討論

超聲波檢查是一種利用人體對(duì)超聲波的反射以及折射來(lái)對(duì)人體結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察的檢查方式，一般就是把較弱的超聲波照射到人的身體上，然后將人體內(nèi)部組織的反射波利用儀器轉(zhuǎn)化為不同的圖像或是曲線顯示出來(lái)，例如，B超就能夠清楚地顯示出人體內(nèi)部各個(gè)臟器和周?chē)M織的各種斷面像，并且顯示的圖像具有很好的實(shí)體感，能形象簡(jiǎn)便的將疾病的部位、形狀、大小等反映出來(lái)，非常近似真實(shí)的解剖結(jié)構(gòu)，因此可以利用超聲檢查來(lái)對(duì)疾病進(jìn)行早期的診斷，從而有利于疾病的治療[2-3]。但是有研究指出：通過(guò)對(duì)腹部被輻射后的早孕絨毛細(xì)胞進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，輻射的劑量過(guò)大、時(shí)間越長(zhǎng)，給胚胎造成的潛在危害就會(huì)越大[4]。孕婦在經(jīng)陰道超聲檢查時(shí)，選擇的探頭頻率要遠(yuǎn)超過(guò)經(jīng)腹檢查時(shí)探頭頻率的一倍，達(dá)到較高分辨率的目的，從而可以將患者診斷早孕的時(shí)間縮短[5]。但是由于進(jìn)行陰道超聲檢查時(shí)探頭距離胚胎的位置更近，所以其對(duì)胚胎產(chǎn)生的生物效應(yīng)就更加不容忽視[6]。絨毛是一種來(lái)源于滋養(yǎng)層的在受精卵有絲分裂過(guò)程中形成的衍生物，它攜帶與胚胎及胎兒一樣的遺傳物質(zhì)，是維持早孕胚胎發(fā)育的重要組織，一旦絨毛出現(xiàn)損傷，則將對(duì)胎兒有近期或遠(yuǎn)期影響，絨毛細(xì)胞受損勢(shì)必影響胚胎發(fā)育[7-8]。

本研究結(jié)果顯示，在被照射5 min后，進(jìn)行人流的患者絨毛細(xì)胞的DNA以及超微結(jié)構(gòu)的變異率為10.00%，明顯低于被照射10 min患者的40.00%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。并且絨毛細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)在胞質(zhì)內(nèi)空泡化現(xiàn)象、微絨毛的排列以及細(xì)胞核周?chē)拈g隙、線粒體形態(tài)、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)形狀等方面均無(wú)較大變化，說(shuō)明在進(jìn)行陰道超聲檢查時(shí)，持續(xù)的時(shí)間越長(zhǎng)對(duì)患者造成的損害就越大，對(duì)胚胎的影響越嚴(yán)重[9-10]。

綜上所述，持續(xù)陰道超聲輻射時(shí)間長(zhǎng)對(duì)人胚早孕絨毛細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)及絨毛細(xì)胞DNA會(huì)產(chǎn)生明顯的改變，因此，在進(jìn)行陰道超聲檢查時(shí)間不應(yīng)超過(guò)10 min，從而降低對(duì)胚胎早期的損傷，確保胚胎安全。

[1]余俏燕,孟軍,武艷玲,等.陰道超聲輻射對(duì)人類早孕胚胎絨毛超微結(jié)構(gòu)的影響[J].寧夏醫(yī)學(xué)雜志,2010,32(8):713-714.

[2]王鶴,王海鷹,孟軍,等.經(jīng)陰道超聲致人胚絨毛細(xì)胞器損傷時(shí)序的研究[J].寧夏醫(yī)學(xué)雜志,2013,35(6):549-550.

[3]劉海濤,饒美蘭,劉國(guó)成,等.陰道超聲對(duì)人早孕絨毛細(xì)胞HSP70的影響[J].吉林醫(yī)學(xué),2013,34(23):4661-4663.

[4]楊玉,孟軍.陰道超聲對(duì)人早孕胚胎絨毛超微結(jié)構(gòu)的影響及其可復(fù)性的研究[J].中國(guó)社區(qū)醫(yī)師醫(yī)學(xué)專業(yè),2010,12(12):69-70.

[5]Barnett SB,Ter Haar GR,Ziskin MC,et al.Effect of transvaginal ultrasound irradiation on expression of Bcl-2 and Caspase-3 in human embryo cytotrophoblasts[J].Chinese Journal of General Practice,2011,9(7):1030-1031.

[6]王慧.官腔鏡檢查術(shù)在絕經(jīng)后出血中的診斷價(jià)值[J].中國(guó)婦幼保健,2010,25(20):2905-2906．

[7]呂濤,劉艷麗,呂曉玉,等.陰道超聲與宮腔鏡檢查診斷絕經(jīng)后出血的價(jià)值對(duì)比[J].中國(guó)老年學(xué)雜志,2013,33(15):3797-3798.

[8]馮曉云,楊玉,余俏燕,等.陰道超聲照射對(duì)人胚滋養(yǎng)細(xì)胞Bcl-2及Caspase-3蛋白表達(dá)的影響[J].中華全科醫(yī)學(xué),2011,9(7): 1030-1031.

[9]謝杏美,王玉霞,石曉藍(lán),等.血清β-HCG及孕酮聯(lián)合陰道超聲在異位妊娠保守治療中的價(jià)值[J].廣東醫(yī)學(xué),2010,31(9): 1144-1147.

[10]肖文惠.經(jīng)腹部與經(jīng)陰道超聲檢查對(duì)早期異味妊娠診斷價(jià)值的探討[J].中國(guó)醫(yī)藥指南,2012,10(23):132-133.

Study on changes of persistent vaginal ultrasound radiation on human embryonicvilli ultrastructure.

CHEN Yu-ge,MENG Jun,WANG Hai-ying,YANG Yu.The Obstetrics and Gynecology Department,Shekou People's Hospital of Shenzhen.Shenzhen 518067,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo explore the human embryonic villi ultrastructure changes by persistent vaginal ultrasound radiation.MethodsEighty cases of induced abortion in our hospital from Sep.2010 to Mar.2012 were selected as the study objects and divided into two groups,vaginal ultrasound radiation was performed in experimental group patients for 10 minutes,while the control group was irradiated for 5 minutes,after 24 to 30 hours of irradiation, induced abortion was adopted in two groups and detected their pile weave,pile weave DNA and changes of ultrastructure after irradiation in two groups were compared.ResultsAfter detecting,it showed that the ssDNA of pile weave of experimental group was(-0.19±0.06),dsDNA was(0.15±0.09),which were significantly lower than control group [(0.23±0.07)and(0.19±0.07)],differences between two groups were statistically significant(P＜0.05);in experimental group,the incidence of abnormal ultrastructure in pile weave was 40.00%,while in control group was 10.00%,difference was statistically significant(P＜0.05).ConclusionIt can reduce the changes of ultrastructure in pile weave that lower the time of vaginal ultrasound radiation.

Persistent vaginal ultrasound radiation;Human embryonic villi cells;Ultrastructure;Change

R714.12

A

1003—6350（2014）13—1927—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.13.0747

2014-02-10)

廣東省深圳市科技局立項(xiàng)（編號(hào)：201002175)

陳玉閣。E-mail：cyg_sz@sina.com