芪芝甘草飲對蛋雞禽流感疫苗免疫效果的影響

劉琳琳 王 會 （山東省棗莊市畜牧獸醫局 277800）

芪芝甘草飲對蛋雞禽流感疫苗免疫效果的影響

劉琳琳 王 會 （山東省棗莊市畜牧獸醫局 277800）

為了解芪芝甘草飲對蛋雞免疫機能的影響。將400只蛋雛雞隨機分為2組，每組200只，A組為對照組；B組為芪芝甘草飲組，在飲水中加入300mg/kg的芪芝甘草飲，在每次接種H5N1禽流感雙價苗前后連續飲用7d。之后定期隨機采血檢測禽流感免疫抗體、淋巴細胞轉化能力、血清IgG含量，并測其脾臟指數、法氏囊指數。結果顯示，與對照組相比試驗組的各項指標均差異顯著(P＜0.05)或極顯著(P＜0.01)，表明自主研制的中草藥制劑芪芝甘草飲對蛋雞機體細胞免疫和體液免疫有顯著增強作用。

芪芝甘草飲 蛋雞 免疫增強

近年來，大量的研究證實，許多中草藥及其復方制劑都具有增強畜禽的免疫力，提高抗病能力，進而促進生長、提高生產性能，改善畜產品品質的作用。而且它們作用廣泛、毒副作用小、無抗藥性、無藥物殘留，沒有化學藥物及抗生素的多種弊端，在畜禽養殖業上的應用日趨廣泛。本試驗以蛋雞為研究對象，探討自主研制的中草藥制劑芪芝甘草飲對蛋雞免疫機能的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 電子天平(瑞士梅特勒-托利多)、離心機(上海安亭科學儀器廠)、恒溫培養箱(上海精宏實驗設備有限公司)、微量振蕩器(廣州儀科實驗技術有限公司)、微量移液器等(美國THERMO熱電)。

1.2 中草藥配方 芪芝甘草飲含有黨參、當歸、柴胡、甘草、黃芪多糖和云芝多糖等多種有增強免疫作用的中草藥。

1.3 試驗動物及分組 1日齡健康非免疫蛋雞400只(購自棗莊市孟莊鎮某雞場)隨機分成2組，每組200只。A組為對照組，B組為芪芝甘草飲試驗組，即飲水中加入終濃度為300mg/kg的芪芝甘草飲，在每次免疫前后加入飲水中連續飲用7d。2組均飼喂相同日糧，采用舍內籠養，自由采食、自由飲水。分別于20、50、110日齡3次免疫H5N1禽流感雙價苗。

1.4 檢測指標 在實驗開始后定期采血檢測禽流感免疫抗體、淋巴細胞轉化能力、血清IgG含量，并宰殺后，稱其脾臟、法氏囊重量。

1.5 數據統計 試驗數據采用SPSS 19.0中的單因素方法進行統計分析，用Dun-can法進行多重比較。

2 結果與分析

2.1 禽流感免疫抗體的跟蹤檢測 經統計，禽流感H5N1 Re-4株抗體滴度在35d以前，試驗組與對照組之間無明顯差異(P＞0.05)；自42d開始抗體水平出現與對照組不同程度的差異；85d以后均差異極顯著(P＜0.01)。可見芪芝甘草飲能顯著提高蛋雞禽流感免疫抗體水平(圖1)。

圖1 禽流感Re-4免疫抗體變化折線圖

2.2 血清中IgG含量 所有動物都有IgG、IgM、IgA[1]，其中IgG能調理、凝集和沉淀抗原，在體液免疫中最為重要。由表1可知，芪芝甘草飲能高效提高血清IgG含量。試驗組血清IgG含量在14d和21d時與對照組相比均差異不顯著(P＞0.05)；在28d～42d極顯著高于對照組(P＜0.01)。

表1 血清中IgG的比較 (mg/ml)

2.3 外周血淋巴細胞轉化能力 由表2可見，淋巴細胞轉化能力在第14d和21d時，試驗組與對照組之間無明顯差異(P＞0.05)；第28d時試驗組與對照組差異顯著(P＜0.05)；而到第35d和42d時2組之間差異極顯著(P＜0.01)。說明芪芝甘草飲能增強淋巴細胞的增殖分化能力。

表2 淋巴細胞OD570轉化試驗的比較

表3 免疫器官指數的比較(x±S) (mg/g)

表3 免疫器官指數的比較(x±S) (mg/g)

項目 日齡 A組 B組14 1.36±0.12 1.48±0.09脾臟21 1.55±0.09 1.64±0.14 28 1.71±0.08a 1.86±0.08b35 1.87±0.05A 2.09±0.08B42 1.99±0.11A 2.22±0.14B14 2.52±0.07 2.45±0.09法氏囊(mg/g) 21 2.96±0.11 2.94±0.07 28 3.19±0.09a 3.42±0.13b35 3.34±0.07A 3.58±0.09B42 3.42±0.08A 3.70±0.09B

2.4 免疫器官指數 由表3可見，脾臟指數與法氏囊指數在14d和21d，試驗組和對照組差異不顯著(P＞0.05)；在28d時差異顯著(P＜0.05)；在35d和42d時差異極顯著(P＜0.01)。因此，芪芝甘草飲對蛋雞脾臟及法氏囊均有顯著促生長作用。

3 討論

（1）對禽流感抗體跟蹤檢測結果顯示，到250日齡時，對照組抗體水平已降至3.6log2，低于免疫保護的最低限4log2，說明超出疫苗免疫保護期，而此時試驗組的抗體滴度仍在6log2左右，仍可為雞群提供有效免疫保護。由此可以合理推測，―芪芝甘草飲”一定程度上可以延長疫苗的免疫保護期。（2）免疫器官指數是反映免疫器官的發育程度，間接指示機體的免疫狀態[2]的指標。試驗結果表明，飲用―芪芝甘草飲”后，28日齡的脾臟指數，法氏囊指數兩組差異顯著(P＜0.05)；在35d和42d時差異極顯著(P＜0.01)。說明―芪芝甘草飲”可以促進蛋雞免疫器官的發育。同時，脾臟和法氏囊都是B淋巴細胞增殖分化的主要基地，臟器指數的增加，促使B淋巴細胞的數量增加，致使抗體水平明顯提高。因此，淋巴細胞轉化率及抗體水平的提高，均與芪芝甘草飲具有促進法氏囊及脾臟的生長發育具有密切關系。另有研究認為，中草藥提高動物生長性能的作用可能也與其能夠促進免疫器官發育有密切關系[3]。（3）淋巴細胞轉化率是評價機體細胞免疫功能的一個重要指標，轉化率高低反映機體的細胞免疫水平[4]。試驗結果表明，淋巴細胞轉化能力在第14d和21d時，2組之間無明顯差異(P＞0.05)，第28d時差異顯著(P＜0.05)；而到第35d和42d時兩組之間差異極顯著(P＜0.01)。說明―芪芝甘草飲”可顯著刺激外周血淋巴細胞增殖，從而增強蛋雞細胞免疫功能。（4）芪芝甘草飲是一種純中藥綠色湯劑，短期使用可高效提高蛋雞的免疫機能，而且加入飲水中飲用方便。另外，由于中草藥源自天然，毒副作用小、無抗藥性，防治疾病的同時，又可避免藥物殘留，還能生產出安全、綠色的禽蛋產品，這對動物疫病防控乃至整個畜牧業發展都是一舉多得并具有深遠的意義的。

[1] 杜念興. 獸醫免疫學(第2版)[M]. 北京: 中國農業出版社. 1998.

[2] 王書全, 王曉玉. 左旋咪唑對雞新城疫La Sota疫苗免疫效果的影響[J]. 中國家禽, 2010, 32(19): 31-33.

[3] Kujimura K.Protective effect of astragali radix.by intraperitoneal injection against Japanese encephalitis virus infection in mice[J]. BioPharmBull, 1996, 19(6): 805-810.

[4] 常凱, 馬鳳龍, 單虎. 重組雞α-干擾素對雞免疫功能的影響[J]. 中國農業通報, 2009, 25(14): 15-17.

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