雙孢蘑菇多糖分散片的制備

張妍，解軍波，2，張彥青，2，*，張明春，2

（1.天津商業大學生物技術與食品科學學院，天津300134；2.天津市食品生物技術重點實驗室，天津300134）

雙孢蘑菇（Agaricus bisporus（J.E.Lange）Imbach）是一種傘菌目蘑菇科的草腐菌，又叫洋蘑菇、白蘑菇、圓蘑菇[1]。雙孢蘑菇含有豐富的蛋白質、多糖、維生素、微量元素等物質[2]，營養豐富，味道鮮美，因此成為世界上廣泛栽培和食用的真菌品種之一[3-4]。

現代研究表明，雙孢蘑菇具有多種生理活性，包括抗氧化[5]、免疫調節[6]、抗腫瘤[7]、抗肝性脂肪變性[8]等，其中，多糖被認為是雙孢蘑菇最主要的活性成分，在保健食品開發方面表現出較為廣闊的潛力[9]。近年來，雙孢蘑菇多糖已經逐漸成為當前真菌多糖研究的熱點，然而，目前市場上有關雙孢蘑菇多糖的保健產品仍不多見，大大限制了該寶貴資源的深入開發利用。

分散片是指在水中能迅速崩解并均勻分散的片劑[10]，與普通片劑、膠囊劑等固體制劑相比，具有制備簡單、服用方便、崩解迅速及吸收快等特點。本實驗采用正交試驗優選處方工藝，研究制備雙孢蘑菇多糖分散片，為雙孢蘑菇多糖的合理開發與利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

雙孢菇蘑菇多糖：天津商業大學自制；交聯羧甲基纖維素鈉、淀粉、乳糖：天津市雅博生物工程技術有限公司；微晶纖維素、滑石粉：北京鳳禮精求商貿有限責任公司。

旋轉蒸發器（RE-52AB）：上海亞榮生化儀器廠；BP211D電子分析天平：德國Sartoriμs公司；電熱恒溫干燥箱（202-2AB型）：天津市泰斯特儀器有限公司；DP30A型單沖式壓片機：北京國藥龍立科技有限公司；電熱恒溫水浴鍋：北京長風儀器儀表公司；ZBS-6G智能崩解實驗儀：天津大學無線電廠；YD-I片劑硬度測試儀：天津市鑫洲科技有限公司；UV7504紫外分光光度計：上海欣茂儀器有限公司。

1.2 方法

1.2.1 雙孢蘑菇多糖的制備

取雙孢蘑菇干品，粉碎，制成粒度為60目～80目的雙孢蘑菇粉。將上述雙孢蘑菇粉進行微波提取（微波功率600 W），提取時間為5 min，以水為提取溶劑，料液比為1∶100。將上述所得雙孢蘑菇水提液，冷卻至室溫，離心10 min（4 500 r/min）。收集上清液，加入4倍量無水乙醇，靜置過夜后分取沉淀，加水超聲溶解，采用三氯醋酸法進行除蛋白處理，所得溶液進行真空干燥，即得。

1.2.2 分散片的制備方法

按濕法制粒壓片法，將原輔料分別過100目篩，按處方比例稱取雙孢蘑菇多糖（100 mg）、和填充劑等，混合均勻后加入95%乙醇溶液為潤濕劑制成軟材，過18目篩制濕顆粒，60℃干燥箱干燥1.5 h，18目篩整粒，加入處方量的崩解劑（交聯羧甲基纖維素鈉）、潤滑劑（滑石粉），混合均勻后壓片，片重為400 mg。

1.2.3 崩解時限

按照2010年版《中華人民共和國藥典》二部附錄XA[11]崩解時限測定方法，隨機取6片分散片，置于（37±1）℃水中測定崩解時間，在3 min內崩解視為合格。

1.2.4 分散均勻性

按照2010年版《中華人民共和國藥典》二部附錄IA分散片項下要求，隨機取6片分散片，置100 mL水（15℃～25℃）中，振搖3 min，應全部崩解并通過二號篩為合格。

1.2.5 正交實驗設計因素與水平設計

以對雙孢蘑菇多糖分散片質量影響較大的交聯羧甲基纖維素鈉的用量、填充劑的種類和滑石粉的用量為因素，采用正交試驗法設計3因素3水平試驗，優化雙孢蘑菇多糖分散片的處方，因素和水平見表1。

表1 正交因素試驗水平表Table 1 Factors and levels of orthogonal test

2 結果與分析

2.1 雙孢蘑菇多糖分散片處方優化的正交試驗

根據表1中的因素和水平，制備雙孢蘑菇多糖分散片，以崩解時間和分散均勻性作為評判指標，篩選最佳處方，試驗結果見表2、表3。

表2 正交試驗結果Table 2 The results of orthogonal test

表3 正交試驗數據方差分析表Table 3 The analysis of variance

由表2的直觀分析和表3的方差分析結果可知，影響因素主次為B＞A＞C，結果顯示：最優處方為A1B1C3，即交聯羧甲基纖維素鈉60 mg，以微晶纖維素作為填充劑，滑石粉8 mg。

2.2 驗證實驗

按照優化處方，制備3批雙孢蘑菇多糖分散片，所得分散片淡黃色，形狀一致，外觀完整光潔，邊緣整齊，色澤均勻（見圖1）。

圖1 雙孢蘑菇多糖分散片Fig.1 The immediate release tablets Agaricus bisporus polysaccharide

分別測定3批分散片的分散均勻性和崩解時限，結果見表4。

表4 驗證實驗結果Table 4 The result of testing experiment

由試驗結果可知，根據優化處方制備所得的雙孢菇多糖分散片，分散均勻性和崩解時間均符合《中華人民共和國藥典》（2010版）分散片項下要求，且重現性良好。

3 結論

分散片設計的主要原則是使該制劑遇水后在短時間（小于3 min）內形成小顆粒，并分散成均勻混懸液[12]，因此，優化選擇處方中各組分的種類和比例是制備合格分散片制劑的關鍵。

采用濕法制粒壓片法制備雙孢蘑菇多糖分散片，以崩解時限，分散均勻性為考察指標，通過正交實驗設計篩選雙孢蘑菇多糖分散片的處方，優化得到了以交聯羧甲基纖維素鈉、微晶纖維素和滑石粉為主要輔料的制劑處方，最優處方為交聯羧甲基纖維素鈉60 mg，以微晶纖維素作為填充劑，滑石粉8 mg。該劑型與普通片劑相比，崩解迅速，服用方便，制備工藝簡單易行，成本較低，可以用于雙孢蘑菇多糖分散片的制備。

[1] 張強,宮璐嬋,孟凡榮,等.雙孢菇多糖抗氧化活性的研究[J].中國林副特產,2010(1):4-7

[2] 熊澤,邵偉,黃藝.雙孢磨菇多糖提取工藝優化研究[J].三峽大學學報:自然科學版,2007,29(4):367-370

[3] 高振鵬,袁亞宏,岳田利,等.超聲波輔助提取雙孢菇多糖的研究[J].西北農林科技大學學報:自然科學版,2012,40(7):215-220

[4]Tebo Masekoa,Damien L Callahanb,Frank R Dunshea,et al.Chemical characterisation and speciation of organic selenium in cultivated selenium-enriched Agaricus bisporus[J].Food chemistry,2013,141(4):3681-3687

[5] 常海蘭,殷鳳.雙孢蘑菇的抗氧化作用及對免疫功能影響的研究[J].山西醫科大學學報,2003,34(2):122-123

[6] Fhernanda R Smiderle,Giovana Alquini,Michelle Z Tadra-Sfeir,et al.Agaricus bisporus and Agaricus brasiliensis(1→6)-β-d-glucans show immunostimulatory activity on human THP-1 derived macrophages[J].Carbohydrate polymers,2013,94(1):91-99

[7] Sang Chul Jeong,Sundar Rao Koyyalamudi,Yong Tae Jeong,et al.Macrophage immunomodulating and antitumor activities of polysaccharides isolated from Agaricus bisporus white button mushrooms[J].Journal of Medicinal Food,2012,15(1):58-65

[8] Noriko Kanaya,Makoto Kubo,Zheng Liu,et al.Protective effects of white button mushroom(Agaricus bisporus)against hepatic steatosis in ovariectomized mice as a model of postmenopausal women[J].PLoS One,2011,6(10):e26654

[9] 班立桐,吳疆,楊紅澎.雙孢菇中活性成分與保鮮技術的研究進展[J].食品研究與開發,2010,31(4):185-186

[10]韓笑,季淑梅.金蓮花分散片的制備工藝研究[J].中成藥,2008,10(10):1542-1543

[11]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[S].2010年版.北京:中國醫藥科技出版社,2010:附錄IA,XA,

[12]盧智玲,劉華棟,汪國華.分散片的處方設計和工藝特點[J].中國藥業,2003,12(7):70-71