楊 鵬,呂 波,呂秀波,張文硯,王曉濤,吳 楊,劉 楊
(1解放軍第210醫院403臨床部,遼寧大連116021;2大連機車醫院)
溶血是臨床血樣檢測不可避免的問題,標本溶血對肝功能檢驗指標會有一定的干擾作用,影響檢驗結果的準確性,使之不能為臨床提供可靠的數據[1]。而標本溶血時主要影響哪些指標,測定結果是否真實可靠,是所有檢驗工作者需要了解的問題。本文觀察了8項肝功能檢驗指標在標本溶血前后檢測結果的變化,現報告如下。
臨床資料:隨機抽取我院2012年6~12月體檢者80例,其中男42例、女38例,年齡20~50(38.2±3.3)歲。經過臨床檢查,無肝腎功能障礙和血液系統疾病等,均為健康體檢者。
儀器與試劑:儀器為日本東芝120FR全自動生化分析儀,質控血清為英國朗道生化質控品,參數設置和校準均按廠家說明書嚴格操作。檢測時儀器性能良好,質控在可控范圍內。谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)生化分析試劑盒均購自日本世諾醫學科技有限公司,堿性磷酸酶(ALP)生化分析試劑盒購自上海復星長征公司,谷氨酰轉肽酶(GGT)、總膽紅素(TBIL)、直接膽紅素(DBIL)生化分析試劑盒均購自日本和光株式會社,總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)生化分析試劑盒均購自煙臺奧斯邦生物有限公司。
方法:對每名體檢者嚴格空腹12~14 h,在清晨同一時間抽取靜脈血4 mL,分別注入2支干燥試管,每支試管2 mL血液標本,并做標記。其中一支自然凝固,另一支在血液凝固前用金屬棒攪拌快速攪拌10 min使其溶血(血清中血紅蛋白水平為3~9 g/L),然后3 000 r/min離心10 min,均未產生肉眼可見的乳糜血和黃疸,直接進行肝功能8項的檢測,包括 ALT、AST、TP、ALB、ALP、GGT、TBIL、DBIL。采用SPSS19.0統計學軟件,計量資料用±s表示,組間比較采用配對t檢驗,P≤0.05為差異有統計學意義。
結果:80例體檢者的溶血標本和未溶血標本進行8項肝功能檢驗指標的檢測,未溶血標本和溶血標本GGT的檢測結果比較差異無統計學意義(P>0.05),而未溶血標本和溶血標本的 ALT、AST、TP、ALB、ALP、TBIL、DBIL的檢測結果比較差異有統計學意義(P 均 <0.05)。溶血標本 ALT、AST、TP、TBIL、DBIL的檢測結果比未溶血標本增高,ALB和ALP的檢測結果比未溶血標本降低。見表1。
表1 溶血標本和未溶血標本的肝功能檢驗結果比較(±s)

表1 溶血標本和未溶血標本的肝功能檢驗結果比較(±s)
t P ALT(U/L)檢驗指標 溶血標本 未溶血標本28.15 ±12.225 27.13 ±12.340 4.234 <0.05 AST(U/L) 70.41 ±32.483 23.41 ± 6.044 9.062 <0.05 TP(g/L) 85.62 ± 9.418 72.73 ± 5.421 9.177 <0.05 ALB(g/L) 43.16 ± 3.009 44.71 ± 2.593 -5.917 <0.05 ALP(U/L) 69.46 ±18.666 77.26 ±21.255 -5.862 <0.05 GGT(U/L) 27.31 ±17.867 27.85 ±18.069 -1.362 >0.05 TBIL(μmol/L)17.47 ± 3.559 12.46 ± 4.356 11.837 <0.05 DBIL(μmol/L)7.15 ± 1.986 4.24 ± 1.587 7.679 <0.05
討論:溶血可分為體內溶血和體外溶血,體內溶血可由物理因素(如人工心臟瓣膜或大血管手術后)、生物因素(惡性瘧疾)、藥物因素、配血不合引起的輸血反應等因素引起;體外溶血可由物理因素(機械性破壞、凍瘡)、化學因素(如血樣接觸活性劑)和代謝因素(如遺傳性疾病引起的紅細胞脆性增加)等引起[2]。
溶血對不同肝功能檢驗項目結果的影響機制不同,主要表現為以下幾個方面:①細胞內外成分濃度差的干擾,如紅細胞內AST和ALT活性分別較血清中高38倍和7倍左右[3],溶血后細胞內濃度高的物質,如酶類、血紅蛋白、離子等順濃度差溢出,使測定值明顯高于正常標本;溶血后細胞內濃度低的物質,如脂蛋白、鈉等稀釋了血漿標本,反而使測定值明顯降低。②血紅蛋白對蛋白質的干擾使TP的分析濃度高于實際濃度[4]。③有色物質對吸收光譜的干擾,血紅蛋白的顏色影響原實驗最佳波長的選擇,造成吸光度和散光度產生較大誤差,尤其是終點法影響更大。干擾結果有正、負兩個方面,當被測溶液的顏色與有色物質的顏色接近時發生正干擾,而與有色物質的顏色相關較遠時產生負干擾。我們的試劑盒是用重氮法測定總膽紅素的,最后生成紫紅色的偶氮膽紅素,主要在波長為540~560 m處有光吸收。而血紅蛋白在波長540~550 nm處有光吸收,恰與偶氮膽紅素的比色波長相近。因此,溶血后紅細胞破裂時大量血紅蛋白進入血清,勢必造成總膽紅素測定值的升高。
為了減少標本溶血現象的發生,我們應該做到以下幾點:①掌握采集血標本的正確方法:臨床采血多選用肘正中靜脈或貴要靜脈,嬰幼兒多選用頸外靜脈或股靜脈,避免選擇過細的靜脈,更不要從輸液管處抽血;遇到抽血困難的患者,扎止血帶時間不可過長,亦不要反復拍打穿刺部位,以防機械刺激造成溶血。正確的靜脈采血方法是熱敷穿刺部位,等血管充盈后再抽血,無法抽取合格標本時,將抽取的帶泡沫的標本立即送檢,不要使其干燥而影響檢測。②嚴格按照標準操作規程操作:抽血時要選擇好穿刺部位,常規消毒待消毒液干燥后,找準血管,爭取一針見血,并徐徐轉動針栓抽取血液,向試管注血時,要沿著試管壁緩慢注入,不得將泡沫注入試管。③妥善保存標本:標本送入檢驗科后,應放在室溫下保存,以防發生溶血。在血標本的運輸過程中,防止過度振蕩而發生溶血。④嚴把注射器及試管的質量關:嚴格掌握一次性注射器、一次性試管的進貨渠道,杜絕有不合格產品流入市場和醫療單位,保證檢驗結果的準確性,減少患者不必要的經濟負擔和痛苦[5,6]。
檢驗人員發現有溶血現象的血樣時,應立即采取相應的措施,主動與臨床聯系,結合臨床首先排除體內溶血的可能。若不是體內溶血,檢驗人員要對溶血標本報告嚴格把關,要注有溶血程度說明,必要時不發報告,要臨床重新抽血復查;如因特殊情況不能重采,應在化驗單上注明,以便臨床醫生準確評價檢驗結果的可靠性。
[1]謝小文.標本溶血對生化檢驗結果的影響及處理對策[J].醫學檢驗,2012,19(4):90-91.
[2]王學秀.血液溶血原因及對策[J].檢驗醫學與臨床,2012,9(10):1279-1280.
[3]虞瑩,孫竹華.溶血對心肌酶譜測定指標的干擾和影響[J].檢驗醫學與臨床,2012,9(4):467-468.
[4]李恒.標本溶血對生化檢驗結果的影響及對策[J].海軍總醫院學報,2011,24(1):54-55.
[5]陳俊峰.11項血液生化指標測定值在溶血前后的比較[J].河南預防醫學雜志,2011,22(3):218-219.
[6]許慧嫻,曾裕微.探討溶血地臨床血生化檢驗的干擾[J].中國中醫藥,2012,10(10):159-160.