高危型人乳頭瘤病毒在宮頸病變篩查中的臨床價值

韓全貴，白寶琴，馬婷婷，李自潤

(1.大同市第三人民醫院病理科，山西大同037008；2.山西大同大學醫學院，山西大同037009)

子宮頸癌是婦女最常見的惡性腫瘤之一。我國每年大約有10萬子宮頸癌新發病例，占世界總數的1/5，子宮頸癌年死亡率為4.3/10萬。子宮頸癌的發病呈年輕化趨勢，已嚴重威脅到中青年女性的健康和生命[1]。利用宮頸液基細胞學篩查能發現宮頸的癌前病變，可減少癌癥的發生。

現已經明確高危型乳頭瘤病毒（HPV）持續感染是引起子宮頸癌的主要原因。目前已發現的HPV類別約有100種左右，其中13種可引起子宮頸癌，性接觸為其最主要的感染途徑。研究顯示，95%以上的子宮頸癌都曾感染HPV病毒。與沒有感染HPV病毒的婦女相比，感染者患子宮頸癌的危險性高達幾十倍甚至幾百倍。

HPV持續感染引起宮頸輕度病變，重度病變，最后發展為子宮頸癌。HPV感染的檢測已成為篩查和預防宮頸癌的關鍵。宮頸液基細胞學檢查是應用最廣泛的篩查技術，該技術大大提高了細胞學診斷的準確性和敏感性[2]。我們將宮頸液基細胞學檢查中4類宮頸病變陽性的病人篩查出來同時進行HPV-DNA檢查，探討這4類病人在宮頸癌前病變的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 研究對象

標本來自大同市第三人民醫院201201-201212期間運用TCT法查出意義不明確的非典型性鱗狀細胞病變（ASC-US）、高級別鱗狀上皮內病變（HSIL）、非典型性鱗狀細胞病變(不除外高級別鱗狀上皮內病變)（ASC-H）、低級別鱗狀上皮內病變（LSIL）4類宮頸病變病人共計388例,年齡在20～75歲。

1.2 方法

1.2.1 TCT法檢測宮頸病變

1）采樣：用宮頸脫落細胞專用采樣器采樣頭與宮頸口外側緊密接觸，順時針旋轉5周，抽出即可采集宮頸脫落細胞。

2）保存：將采樣頭浸入細胞保存液中，適度轉動，將細胞樣本脫離采樣器轉移至保存液中。擰緊保存液瓶蓋，記錄患者編號等相關資料。

3）制片報告：將標本送細胞學檢查室，按照液基細胞沉降法制片，用TBS分類法出具報告。篩查出2012年4類宮頸病變共計388例。

1.2.2 DNA基因雜交捕獲技術檢查（HC2）HPV陽性值

按照試劑盒說明書依次進行裂解、雜交、捕獲、反應、沖洗、信號收集。

2 結果

2.1 液基細胞學陽性與HPV檢測陽性符合率

利用TBS報告系統從2012年宮頸液基細胞學涂片中篩查出388例包括4種類型的鱗狀上皮細胞異常，其中ASC-US檢出率最高，占總陽性例數的77%。利用DNA基因捕獲技術檢查HPV陽性值,其中HSIL病人HPV陽性檢出率最高，見表1。

表1 2012年大同市第三人民醫院宮頸液基細胞學陽性與HPV檢測陽性統計表

2.2 利用DNA基因捕獲技術檢測HPV陽性值

利用DNA基因捕獲技術檢測HPV陽性值，結果顯示HSIL病人中，HPV陽性值最高，均數達到1 253.9，是正常人的1 000倍以上（正常人HPV值＜1），見圖1。

圖1 2012年大同市第三人民醫院利用DNA基因捕獲技術檢查HPV陽性值柱形圖

2.3 統計學分析

采用SPSS 19.0統計軟件處理，P＜0.05認為有統計學意義。利用多因素方差分析可知：ASC-US病人和HSIL病人HPV值差異具有統計學意義（P＜0.05）.

3 討論

宮頸癌是女性生殖系統最常見的惡性腫瘤之一，僅次于乳腺癌。早期發現各種癌前病變并進行及早的預防和治療能夠有效降低浸潤性宮頸癌的發生率，減輕婦女的身心痛苦，提高生活質量。目前利用宮頸液基細胞學制成的薄層涂片成份齊全，結構清晰，背景干凈，異常的細胞很容易被觀察和發現。與傳統的制片法比較，液基細胞學提高了宮頸病變檢出的敏感性[3]。

本研究首先利用宮頸液基細胞學檢查對門診及住院婦女進行檢查，從這些檢查結果中篩查中4類病人，包括ASC-US,HSIL，ASC-H和LSIL。大同市第三人民醫院2012年鱗狀細胞癌（ACC）及非典型腺細胞（AGC）患者檢出率分別為5例和8例，由于例數極少，所以沒有對這2類患者進行研究。

高危型人乳頭瘤病毒（HPV）持續感染是發生宮頸上皮內病變的必要因素，可以導致宮頸病變從LSIL，HSIL發展到SCC[4]。利用DNA基因捕獲技術能夠定量的檢查到HPV蛋白含量。在本研究中，HSIL病人HPV值明顯升高，而TCT正常人中HPV值一般小于4。高危險HPV-DNA檢查對宮頸液基細胞學檢查結果為ASC-US，HSIL ASC-H，LSIL的患者具有重要的價值，它可以進一步分流診斷，明顯提高宮頸病變的篩查能力。

在本研究中，HSIL病人HPV陽性率的值最高，達到86%，其它依次為LSIL，ASC-H，ASCUS，其中ASC-US病人HPV陽性率最低。從以上調查的結果可知宮頸病變的級別越高，HPV陽性率越高，本次研究與肖魏等人的觀點一致[5]。因此對于利用液基細胞學發現的高級別的宮頸病變，臨床醫師應該高度重視，對于這類病人必須要求陰道鏡取活檢以便發現早期的宮頸癌。

本研究利用DNA基因捕獲技術定量檢測HPV蛋白含量，結果發現HSIL病人的HPV-DNA含量均值最高，是正常人的1 000倍以上。HPV-DNA定量分析能更加準確地發現宮頸病變的早期改變[6]。這一技術不僅對液基細胞學檢測的有宮頸病變的病人能夠敏感地檢測出HPV-DNA的變化，而且對那些有潛在病變但在細胞學還沒有表現出來的病人具有早期篩查作用。因此，我們建議有性生活的35歲以上的婦女都應該做HPV檢查，以便早期從分子水平發現宮頸的潛在病變。

結論：對于利用宮頸液基細胞學檢查出有宮頸病變的病人再輔以HPV檢查，能明顯提高宮頸癌的早期檢出率。而對于有經濟能力的婦女做HPV檢測能提前預知是否存在宮頸癌的潛在危險性。

[1]郎景和.迎接子宮頸癌預防的全球挑戰與機遇[J].中華婦產科雜志,2002,37(3):129-131.

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[4]Roden R,Wu T C.How will HPV vaccines affect cervical cancer[J].Nat Rev Cancer,2006,6:753-763.

[5]肖魏，卞美璐，馬莉，等.子宮頸液基細胞學檢查異常的涂片中人乳頭瘤狀病毒L1蛋白的表達及其意義[J].中華婦產科雜志，2009，44（12）：887-891.

[6]Wright T V J,Denny L,Kuhn L,et al.HPV DNA Testing of Self-collected Vaginal Cancer[J].JAMA,2000,283(1):81-86.