肝素化血漿標本對偶氮砷Ⅲ法血鈣測定結果的影響分析

葉章發　張超

【摘要】 目的 觀察分析肝素化血漿標本進行偶氮砷Ⅲ法血鈣測定時， 對實驗檢測結果有無影響。方法 采集血液標本， 分別使用肝素化血漿和血清標本， 進行偶氮砷Ⅲ法血鈣測定， 兩組檢測數據結果進行統計學分析。 結果 肝素化血漿血鈣測定結果：2.71 mmol/L， 血清血鈣測定結果：2.31 mmol/L。 統計學分析顯示：兩組數據差異具有統計學意義。結論 肝素化血漿標本對偶氮胂Ⅲ法血鈣測定結果具有嚴重影響， 不宜使用肝素化血漿標本進行偶氮砷Ⅲ法血鈣測定。

【關鍵詞】 肝素化血漿；偶氮砷Ⅲ法；血鈣測定

在臨床實驗室質量管理中， 分析前質量保證有重要意義， 不同標本處理方式， 可能影響實驗結果。作者觀察分析肝素化血漿和血清標本， 使用偶氮砷Ⅲ法測定血鈣的結果， 現報告如下。

1 材料與方法

1. 1 一般資料 門診、住院患者隨機血液標本105例（剔除嚴重脂血、溶血及黃疸標本）， 年齡1.0～78.0歲， 其中男50例， 女55例。

1. 2 儀器 OLYMPUS AU-2700全自動生化分析儀。

1. 3 試劑及相關用品 江蘇康健醫療用品有限公司提供一次性真空采血管（肝素管、普通管）， 其中肝素管（肝素鈉）每支抗凝血液5.00 ml。

RANDOX （Human-Sera分析用人血清基質）定值凍干質量控制血清。

偶氮砷Ⅲ法血鈣測定試劑盒（國內某品牌），試劑主要成分：偶氮砷Ⅲ（ARSENAZO Ⅲ）：0.20 mmol/L； 咪唑： 75 mmol/L。

1. 4 實驗方法 采集患者清晨空腹靜脈血液， 分別注入一次性真空采血管肝素管（5.00 ml）和普通管（3.00～5.00 ml）中， 待普通管血液收縮后， 再一起進行標本離心處理。于此同時， 將5支同一批號的定值凍干質控血清嚴格按照使用說明進行充分溶解、混勻后， 每支再分別分配到6支檢測管中， 共30份， 與檢測標本一起上機進行實驗檢測。

1. 5 統計學方法 檢測數據處理采用SPSS11.5統計軟件進行分析， 使用配對資料組間差異 t檢驗。

2 結果

肝素化血漿與血清標本血鈣測定結果， 兩組檢測數據配對資料組間差異t檢驗， 差異有統計學意義（P<0.01）；所用定值凍干質控血清參考值（ARSENAZO Ⅲ法 ）：2.30 mmol/L。

3 討論

血鈣或者血液總鈣測定， 一般是指使用血液血清標本進行總鈣含量測定。關于血鈣測定， 雖然已經使用過許多鈣結合染料， 其中鄰-甲酚酞絡合酮和偶氮砷Ⅲ（ARSENAZO Ⅲ）， 至今一直在廣泛應用， 當然， 鈣離子與偶氮砷Ⅲ結合力還受到緩沖液， Ph和鈉濃度的影響[1]。血鈣檢測作為臨床一般常規檢測項目， 目前較多使用偶氮砷Ⅲ比色法， 而且已經有文獻證明， 該方法是較為理想的方法[2]。按照《全國臨床檢驗操作規程》的具體要求[1]， 應該使用血清標本進行血鈣的測定。但在實際工作中， 使用肝素化血漿標本進行血鈣測定的情況確實存在。亦有文獻報道血清與肝素化血漿標本，血鈣測定結果差異不具顯著性[3]， 但其未提供具體的實驗方法以及試劑具體配方。在購買的試劑盒， 一般都有生產廠家提供的詳細產品使用說明書， 對標本處理有具體的要求。我們選擇國內一家較為知名的試劑生產商提供的偶氮砷Ⅲ法血鈣檢測試劑盒， 廠家在使用說明上明確這樣注明樣本要求：血清、肝素化血漿、尿。血清或肝素化血漿中的鈣， 在2～8℃下可穩定10 d。但在實際工作中， 發現有一定問題， 故進行了此次實驗。通過此次實驗的觀察、分析。可以從以上實驗結果看出， 肝素化血漿與血清標本， 偶氮砷Ⅲ法血鈣測定結果差異甚大， 足以影響臨床醫生對患者病情的分析以及治療措施的制定。特別是對于那些低清蛋白血癥、慢性腎功能衰竭、甲狀腺功能減退、維生素D缺乏、電解質代謝紊亂等低鈣血癥患者， 可能產生嚴重后果[4]。而另一家國內試劑生產商提供的偶氮砷Ⅲ法血鈣試劑盒， 試劑主要配方為偶氮砷Ⅲ（ARSENAZO Ⅲ）： 0.10×10-3 mol/L，磷酸鹽緩沖液（pH7.0）：50×10-3 mol/L。則明確要求使用血清標本進行測定， 此次實驗未使用次家試劑。臨床生化檢測， 一般要求使用血清進行， 尤其對《全國臨床檢驗操作規程》中要求使用血清進行實驗的項目， 改為血漿進行實驗操作時， 必須進行大量實驗證實， 方可使用， 以免影響實驗檢測結果的準確性、可靠性， 影響臨床的診斷與治療。臨床醫生亦應依據檢驗科采集標本的具體要求， 嚴格督促工作人員采集合格的標本， 保障醫療工作的順利開展。

參考文獻

[1] 葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程.第3版.南京：東南大學出版社， 2006：383-383.

[2] 張莉.偶氮砷Ⅲ發鈣試劑盒不確定度的分析.臨床和實驗醫學雜志， 2012，11（20）：1661-1662.

[3] 蘇少華.肝素抗凝血漿用于急診生化檢驗的研究.中國現代醫生， 2007，45（6）：13-14.

[4] 周新.涂植光.臨床生物化學和生物化學檢驗.北京：人民衛生出版社， 2006：43-44.endprint