殷容 徐剛 劉勝發
摘 要:本試驗旨在觀察自動化養殖場人員入場消毒風淋,噴霧消毒效果觀察試驗。本試驗將營養瓊脂平板涂布接種細菌后,置于半自動化、自動化養殖場入場消毒室內進行消毒,將消毒后的瓊脂平板37℃恒溫培養24~36 h,計數平板上菌落數,計算平均殺菌率。結果表明:半自動化噴霧消毒在0.1%濃度5 min消毒殺菌率為53.55%,自動化風淋消毒在20 s除菌率達到29.80‰,自動化噴霧消毒在0.1% 30 s時殺菌率最高達53.26%。
關鍵詞:養殖場; 噴霧消毒;風淋消毒
消毒是動物防疫工作的一個重要的環節。進場人員消毒是把疾病擋在養殖場外的關鍵技術手段,它的作用是疫苗防疫、抗生素防控所無法解決的。進場人員攜帶的病毒、細菌等病原體進入場區,存在于動物舍內外環境之中,達到一定濃度即可誘發疾病,消毒可預防疾病傳染。因此,對養殖場進場消毒效果監測尤為重要。
1試驗材料與試驗方法
1.1試驗材料
10%月芐三甲氯銨溶液、普通營養瓊脂、滅菌生理鹽水、蒸餾水、平皿板、移液管、錐形瓶、酒精燈、接種環、L型玻璃棒。
1.2儀器設備
恒溫箱、高壓滅菌鍋等,半自動化超聲波噴霧消毒設備為設備知名廠家,自動化噴霧設備為設備知名廠家,自動化風淋消毒為設備知名廠家。
1.2試驗方法
1.2.1 滅菌平板后,每1 000 mL蒸餾水加入32 g營養瓊脂粉,121℃滅菌15 min,做成營養瓊脂平板備用。
1.2.2 用浸濕無菌生理鹽水的棉簽從人的手指、頸、衣服處來回涂擦采樣,將采樣的棉簽涂布于事先做好的普通營養瓊脂平板,置37℃恒溫培養24 h,計數平板上細菌菌落數。
1.2.3 取3個菌落分布均勻的平板,各用5 mL無菌生理鹽水沖洗每個平板上菌落,將得到的15 mL細菌液放入135 mL滅菌水的三角瓶中,用吸管吹洗,即為1∶10稀釋液。用滅菌吸管取1∶10稀釋液5mL,注入45 mL無菌生理鹽水試管中,用吸管吹洗得到1∶100稀釋液。按此操作重復做10倍遞增稀釋液,直至得到1∶108稀釋液。對1∶104、1∶105、1∶106、1∶107、1∶108稀釋液,用L型玻璃棒涂布法接種細菌。每個瓊脂平板取0.1 mL菌液,每個菌液稀釋度做3個平板,將涂抹好的平板平置20~30 min,將平板倒置,37℃恒溫培養24 h。余下的每個濃度的細菌稀釋液放入冰箱中保存。
1.2.4 平板菌落數在30~300間對應的細菌稀釋液,每個平板取0.1 mL細菌稀釋液,用涂布法對干燥效果較好的80個平板進行接種。
1.2.5 消毒液配0.1%、0.2%、0.4% 3個濃度梯度,噴霧消毒時間半自動化場設置2 min、3 min、5 min,自動化場設置10 s、20 s、30 s。自動化場風淋消毒設置為8 s、12 s、16 s、20 s。消毒時消毒室內均勻放置3個平板,每個消毒區域2個平板作對照組,實驗室8個平板測取細菌液濃度。在消毒室內采取碰撞法的方式對細菌平板進行消毒。將消毒后的細菌平板置37℃恒溫培養24 h。
1.2.6 計數消毒后平板上細菌菌落數。平均殺菌率=(消毒前平均菌落總數-消毒后平均菌落總數)/消毒前平均菌落總數*100%。
2結果分析
2.1 半自動化場噴霧消毒效果
半自動化超聲波噴霧消毒設備噴霧霧粒大小為1~10μm,噴霧量每小時大于300 mL。由表1噴霧消毒效果表可知,不同濃度下,隨著消毒時間的加長消毒平均殺菌率有所提高。消毒時間相同,2‰濃度的平均殺菌率47.10%高于1‰、4‰平均殺菌率42.58%、46.45%。
2.2 自動化場風淋消毒效果
風淋消毒室雙面吹淋噴嘴數量48只,每小時換氣500次,風速20~25 m/s。由表2自動化場風淋消毒殺菌率表可知,平均殺菌率低于半自動化噴霧消毒設備,隨著風淋消毒時間加長,風淋消毒平均殺菌率越高。
自動化霧佳寶噴霧設備水流量10.4 L/h,霧滴到達面積49~100 m2,安裝個數為2。由表3可知,相同濃度下,隨著消毒時間的加長消毒平均殺菌率有所提高。相同消毒時間,濃度越高,平均殺菌率越高,消毒效果越好,成正相關。自動化噴霧消毒1‰、30 s較半自動化噴霧1‰、5 min殺菌率低0.29%,但用時較少。
3分析討論
消毒液的選擇僅用了10%月芐三甲氯銨溶液,未涉及其他消毒劑(例如:苯扎溴銨、過氧乙酸等),本試驗細菌接種采用吸收量較少的涂布法,梯度稀釋后接種。預試驗期間,平板細菌菌落分布不均勻,分析結果表明,平板干燥效果不好,容易蔓延,試驗時挑取干燥較好的平板涂布接種細菌。試驗中消毒液設置1‰、2‰、4‰ 3個濃度梯度,在時間設置上半自動化設置2 min、3 min、5 min,自動化消毒室單位時間霧化量很大、霧粒[1]較半自動化大,充滿整個消毒室持續時間短,設置10 s、20 s、30 s 3個梯度。
由以上結果可知,半自動化、自動化場進場消毒,隨著消毒時間的加長,平均殺菌率值越高,消毒效果越好。半自動化場消毒室,消毒時間相同,2‰濃度消毒液的平均殺菌率高于1‰、4‰濃度消毒液的平均殺菌率。消毒液濃度并不是越高越好,濃度過高造成消毒液浪費、腐蝕設備[2],還可能對進出場人員人體呼吸道黏膜等造成損害。
4結論
半自動化場1‰濃度消毒液噴霧消毒5 min時消毒效果最佳,平均殺菌率53.55%。自動化養殖場風淋消毒20 s時效果最佳,平均殺菌率29.80%。自動化噴霧消毒平均殺菌率在1‰、30 s時平均殺菌率53.26%。(編輯:何芳)
參考文獻:
[1] 宋雙成.標準化養殖場消毒的四個注意事項[J].其他用藥,2010,5:63.
[2] 譚略,楊榮和,孫培苗.養殖場消毒中存在的問題及改進建議[J].草食家畜(季刊),2012,4:29-30.