周宗清 羅靜如
禽戊型肝炎病毒感染(Avian hepatitis-E-virus infection)是由皰疹病毒引起的肉種雞和商品蛋雞的一種疾病。本文是全面介紹該病的第二部分(第一部分的譯文刊登在《國外畜牧學——豬與禽》第34卷第1期36頁),綜合描述了該病的肉眼與顯微病變及其診斷。
禽戊型肝炎病毒感染雞后的肉眼和顯微病變見下面描述(圖1、2、3、4)。
1 肝脾腫大綜合癥(Hepatitis-splenomegaly syndrome,HS)
臨床解剖時可見,死亡雞體況良好。肝腫大、蒼白、質較脆,呈斑駁狀、組織內嵌有紅色、黃色或黃褐色病灶,肝被膜下常見出血或血管瘤,有一個或多個血凝塊疏松地粘連著肝臟表面。腹腔內常見少量或中等程度的血樣液體充盈。有時腹腔內也有血凝塊存在。脾臟常見腫大,被摸下或切面可見白色病灶。卵巢外觀病變不明顯或退化。至于該病的顯微組織學病變,在臨床病例和用肝脾腫大綜合癥感染雞分離的禽HEV試驗攻毒雞中,它們的肝臟病變是不一致的。在較嚴重的病例中,可見肝呈多灶性或廣泛性出血,明顯破壞了肝細胞索和肝竇的正常結構,大量的紅細胞取代了原來的肝組織。可見局灶性或大面積的肝細胞凝固性壞死區域,或被淋巴細胞浸潤。肝門靜脈區可見一定程度或明顯的異嗜細胞和單核炎性細胞浸潤,還常見分段性靜脈炎和靜脈周圍性肝炎,其特征是門靜脈和肝靜脈末端管壁及靜脈周圍肝組織可見單核炎性細胞浸潤。在肝竇常發生淀粉樣蛋白沉積。肝組織區域充滿無細胞或很少細胞的、密集的、無形的、均一的嗜酸性物質,不呈淀粉樣物質染色陽性反應,顆粒細胞樣骨髓樣細胞聚集明顯。有些病例可見干酪樣顆粒細胞瘤。脾臟可見網狀內皮巨噬細胞顯著增生(致使脾臟腫大)、淋巴細胞缺失、動脈管壁和間質中淀粉樣物質沉積。
2 大肝大脾病(Big liver and spleen disease,BLS)
死亡或出現病癥的雞通常體況良好,但嗉囊空虛,提示有厭食癥狀。脾臟明顯腫大是最主要的特征,或是感染雞的唯一特征性病變,通常是正常脾的2~3倍。脾臟被膜下呈斑駁狀,切面可見大量白色病灶。有脾臟腫大的許多感染雞肝臟也腫大,肝被膜下可見出血。卵巢常見退行性病變,在遲緩性卵黃濾泡常見血凝塊存在。
脾臟的顯微組織病變與疾病的階段有關。起初,橢球周圍成淋巴細胞區域面積均勻擴大,這是脾腫大的直接原因。之后,在淋巴濾泡、動脈周圍淋巴鞘和白髓的其它區域發生廣泛的淋巴樣細胞固縮。緊接著細胞固縮樣破壞期出現組織細胞樣應答,巨噬細胞的數量急增,并伴隨著適度的異噬細胞浸潤。單個的或群體的巨噬細胞呈現吞噬活性,有些巨噬細胞發生壞死。
脾臟壞死組織區(可能是凝固性壞死的巨噬細胞)含有細胞核碎片或出現有無形狀的嗜酸性物質。在疾病的最后階段,肉眼可見脾臟腫大,網狀內皮細胞成為脾組織細胞群的主要成分。脾呈不同程度的纖維化病變,可見殘留組織的壞死性、無形狀病灶,病灶或被多核巨細胞包圍。
3 診斷
產蛋下降、死亡率輕度上升以及死亡雞或病雞肝脾的特征性肉眼和顯微病變,強烈指向存在該病的可能性。禽戊型肝炎病毒(HEV)分離困難。對感染雞的膽汁進行電鏡觀察或許是有用的。在肝脾腫大綜合癥(HS)感染的雞,從膽汁中可觀察到直徑30~50 nm的病毒顆粒。從膽汁中找到病毒顆粒即證實上述的假定性診斷結果。該病的PCR診斷方法建立了檢測,但一般不用于組織中病毒的檢測。設計PCR 通用引物應考慮禽HEV病毒之間的基因變異。檢測禽HEV抗體的ELISA方法已經建立,但是目前還沒有商品化的試劑盒。采用多克隆抗血清和粗制抗原,建立了瓊脂免疫擴散試驗和免疫熒光法,檢測大肝大脾病(BLS)病原體,但是這些試驗的敏感性和特異性尚不清楚。采用單克隆抗體將來自自然感染BLS雞的肝臟制備的抗原進行一定程度的純化,以此建立的抗原捕捉ELISA 可敏感而特異地檢測糞便、血液和組織樣品中的BLS病原體。
由于禽HEV的亞臨床感染在雞群中普遍存在,當懷疑禽HEV作為疫病的病因時,血清中的抗體或糞便中的病毒抗原檢測結果應結合臨床癥狀、肉眼病變和顯微組織病變進行判定。觀察肝臟的病變時,應注意重點區分脂肪肝-出血綜合征(FLH)。雞的FLH綜合征,肝臟呈黃色、質脆,切面多汁。顯微鏡檢查肝細胞呈明顯的脂肪變性。脾臟腫大的鑒別診斷主要是與淋巴樣腫瘤(淋巴細胞性白血病、馬立克氏病)和細菌性敗血癥相區別,后兩者都有特征性的組織學病變。
4 公共衛生學意義
目前尚不清楚禽HEV對公共衛生的風險,也沒有確認的人感染禽HEV的報告。禽源HEV 和人源HEV的基因組序列分析表明,雞極不可能是人感染HEV的貯庫。此外,恒河猴對實驗性禽HEV感染不敏感。□□
原題名:Avian hepatitis-E-virus infection in chickens(英文)
原作者:Tahseen Aziz 博士( 羅林斯動物疾病診斷實驗室)和H. John Barnes 博士( 北卡羅來納州立大學,獸醫學院)