康樂鼻炎片的質量標準研究

管志美

（湖南省藥品審評認證與不良反應監測中心，長沙 410000）

康樂鼻炎片［1］是由白芷、防風、牡丹皮、薄荷腦、馬來酸氯苯那敏、辛夷、黃芩、穿心蓮等11味藥物加工制成的片劑，其功效主要為：疏風清熱、活血驅瘀和祛濕通竅。臨床主治：鼻炎、過敏性鼻炎和鼻竇炎。康樂鼻炎片收載于《中國衛生部藥品標準》（中藥成方制劑）第十二冊［1］，但舊的藥品標準中僅有穿心蓮和馬來酸氯苯那敏的薄層鑒別。為了提高藥品質量的控制標準，本研究對原標準進行了進一步完善和提高，對白芷、薄荷、馬來酸氯苯那敏和黃芩4味主要藥味進行了定性鑒別，同時對黃芩中黃芩苷的含量進行了定量分析，完善了康樂鼻炎片的質量標準，現報道如下。

1 儀器與材料

島津 SCL－10Avp高效液相色譜儀、SPD－10AV紫外檢測器，METTLER AE240電子天平（感量0.1mg、0.01mg）。甲醇為色譜純，其他試劑試藥均 為 分 析 純［2］。 黃 芩 苷 （110715－200212）、黃 芩（120955－200305）、白 芷 （120945－200305）、薄 荷（120916－200006）和 馬 來 酸 氯 苯 那 敏 （120985－200309）均購自中國藥品生物制品檢定所；康樂鼻炎片由華中科技大學同濟醫學院附屬同濟醫院藥學部制備 （規 格：0.4g／片；批 號：130601、130801、130802）。

2 定性鑒別

2.1 白芷的薄層鑒別

取本品10片，研細，加石油醚（40～60℃）15 mL，搖勻，超聲處理5min，過濾，濾液低溫濃縮至2 mL，將其作供試品溶液。取白芷0.5g，置具塞試管中，加石油醚1mL（40～60℃），超聲處理10min，靜置，取上清液作為對照藥材溶液［3］。按照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄ⅥB）試驗，吸取供試品溶液和對照藥材溶液各10μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（30～40℃）－乙醚（3∶2）為展開劑，展開并取出，將其晾干，置于365 nm紫外光燈下檢視。在與對照藥材色譜相對應位置的供試品色譜中，可顯現同色的熒光斑點［4］。陰性無干擾（見圖1）。

圖1 白芷的TLC圖

2.2 薄荷的薄層鑒別

取本品20片，研細，將其置于揮發油提取器中提取揮發油。用1mL石油醚（40～50℃）吸收揮發油，同時吸取石油醚溶液作為供試品溶液；取薄荷2 g，同法制成對照藥材溶液［5］。參照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄ⅥB）試驗，吸取上述對照藥材溶液和供試品溶液各10μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以苯－醋酸乙酯（20∶1）為展開劑，將其展開，取出并晾干，以香草醛硫酸試液－乙醇的混合溶液（1∶4）噴之，80℃ 加熱至斑點顯色清晰為止［6］。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，呈顯出同色的斑點［4］。陰性無干擾（見圖2）。

2.3 黃芩的薄層鑒別

取本品1片，除去包衣，研細，加甲醇10mL使其溶解，超聲處理10min，取上清液作為供試品溶液；另取黃芩對照藥材1g，加甲醇5mL溶解制成溶劑，取其上清液作為對照藥材溶液［7］。照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄ⅥB）試驗，吸取上述供試品溶液和對照藥材溶液各10μL，分別將其點于同一硅膠G薄層板上（以含5%醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑），以醋酸乙酯－丁酮－甲酸－水（10∶5∶2∶2）為展開劑，展開，取出并晾干，噴顯色劑（1%三氯化鐵乙醇溶液）。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，其呈顯出同色的斑點［4，8］。陰性無干擾（見圖3）。

圖2 薄荷的TLC圖

圖3 黃芩的TLC圖

2.4 馬來酸氯苯那敏的薄層鑒別

取本品3片，除去包衣，研細，加氯仿20mL，使其溶解，濾過，取續濾液作為供試品溶液；另取馬來酸氯苯那敏對照品，加氯仿制成1mL含馬來酸氯苯那敏0.15mg的溶液（必要時濾過）作為對照品溶液；按照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄ⅥB）試驗，吸取上述2種溶液各20μL點于同一硅膠G薄層板上，以甲醇－濃氨溶液（120∶1）為展開劑，展開后晾干，用碘蒸汽熏之，供試品溶液所顯主斑點的顏色與位置應和對照品溶液所顯主斑點相同［4，9］。同時進行陰性對照試驗，在相應位置無斑點，陰性對照無干擾（見圖4）。

圖4 馬來酸氯苯那敏的TLC圖

3 含量測定

3.1 色譜條件

色譜柱：島津 ODS柱（4.6mm×200mm ，5 μm）；流動相：甲醇－水－磷酸（47∶53∶0.2）；流速：1.0mL／min；檢測波長：280nm［10］。

3.2 溶液的制備及測定

3.2.1 對照品溶液的制備 精密稱取經干燥的黃芩苷對照品適量，加甲醇制成含黃芩苷60μg／mL的溶液，即得。

3.2.2 供試品溶液的制備 取本品10片，除去包衣并研細，取0.15g，精密稱定后將其置于100mL量瓶中，加甲醇80mL，超聲處理30min，待其冷卻后加甲醇至刻度線，振搖均勻，過濾，將初濾液棄掉，取續濾液，即得［11，12］。

3.2.3 陰性樣品溶液的制備 取缺黃芩的陰性樣品0.15g，同法制成陰性樣品溶液。

3.2.4 測定法 分別吸取供試品溶液、對照品溶液與陰性樣品溶液各10μL，將其注入液相色譜儀，測定并記錄色譜圖［13］。理論板數按黃芩苷峰計算，應不低于3 000，黃芩苷峰與其他組分峰基線分離，R＞1.5，保留時間在31min左右，陰性溶液在黃芩苷峰相應位置上無吸收（見圖5）。

圖5 黃芩苷對照品溶液、供試品溶液、陰性樣品溶液色譜圖

3.3 標準曲線的制備

取黃芩苷對照品溶液（濃度0.068mg／mL）2 μL、5μL、10μL、15μL、20μL分別注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定，以進樣量（μg）為X、積分面積值為Y，計算回歸方程為Y＝1882509X－19677，r＝0.9998。

3.4 穩定性實驗

取同一份對照品溶液，每隔2h進樣測定一次，考查5次，結果峰面積變化不大，黃芩苷峰面積平均值為1328746，RSD為0.48%。

3.5 重復性試驗

取同一批樣品（批號：130601），平行試驗6次，結果每片黃芩苷平均含量為20.3mg（50.75mg／g），RSD為1.9%。

3.6 精密度試驗

取同一份供試品溶液，重復進樣測定6次，結果黃芩苷面積平均值為1283664，RSD為0.76%。

3.7 加樣回收試驗

精密稱取已知含量的供試品（批號：130601，含黃芩苷50.75mg／g）9份，置于100mL量瓶中，分別精準加入精密配制的黃芩苷（濃度為0.234mg／mL）8mL、8mL、8mL、10mL、10mL、10mL、12 mL、12mL、12mL，加甲醇溶解至刻度線，按本文試驗方法測定其含量并計算回收率（見表1）。由表1可見，本方法具有較高的回收率，且測定方法可靠。

表1 黃芩苷回收率測定結果表（n＝9）

3.8 樣品測定

取3個批次制備的康樂鼻炎片，按本文含量測定法測定每片樣品中黃芪苷的含量（見表2）。

表2 三批樣品含量測定結果表（n＝2）

4 討論

由于市售康樂鼻炎片質量不穩定，且其處方中藥味較多，化學成分復雜，給其藥味的薄層鑒別帶來了一定困難［14］。筆者通過預試驗，選出白芷、薄荷、黃芩和馬來酸氯苯那敏4味藥，采用薄層色譜法對其進行定性鑒別，結果表明：此4味藥材的薄層色譜鑒別方法重現性良好，可作為康樂鼻炎片的質量控制方法。由于其他藥材有陰性干擾，還沒有找到更好的分離方法，本次研究只選擇上述4味藥材作為定性鑒別的依據。

黃芩作為中醫常用的藥物之一，具有清熱燥濕、瀉火解毒、止血和安胎之功效，臨床上單用或與其他中藥配伍主要用于治療呼吸道感染、急性菌痢、病毒性肝炎、過敏性疾病和婦科疾病等。黃芩苷作為黃芩發揮功效的主要活性成分之一，具有抗病毒細菌、抗炎、抗氧化、抗腫瘤、保護心腦血管、保肝等作用［15］。筆者建立了黃芩苷含量測定的高效液相色譜法，對3批制備的康樂鼻炎片中黃芩苷含量進行測定，結果提示其含量穩定，平均值為20.3mg／片，高于《中國藥典》2010年版一部“黃芩”［2］項下規定：黃芩藥材按干燥品計算，含黃芩苷（C21H18O11）不得少于9.0%。以轉移率80%計，康樂鼻炎片中黃芩苷含量應不少于17.6mg／片。結果表明：該方法操作簡單、準確度高、重現性好，能有效控制康樂鼻炎片的質量，以確保臨床合理安全用藥。

［1］國家衛生部.中華人民共和國衛生部藥品標準［S］.第十二冊，標準號 WS3－B－2423－97.

［2］成差群，譚秀芬，魏燕華.追風活血膏不同制法化學等量性研究［J］.中藥材，2012，35（12）：2027－2030.

［3］車曉彥，伍丕娥，周娟，等.麥冬藥材TLC及HPLC特征圖譜研究［J］.藥物分析雜志，2012，32（12）：2262－2266.

［4］中華人民共和國藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部（附錄）［S］.北京：中國醫藥科技出版社，2010.

［5］莫少紅.含麻黃的中藥制劑質量控制方法的實驗研究［D］.南寧：廣西中醫藥大學，2005.

［6］李順濃.眾生膠囊主要藥物的測試與鑒別［J］.亞太傳統醫藥，2008，4（9）：29－31.

［7］毛丹，許勇，陳鈳，等.參芪肝康片（膠囊）質量標準研究［J］.中國藥師，2013，16（12）：1830－1833.

［8］王維茂，阮治綱.氨咖黃敏膠囊鑒別（1）（2）方法的改進［J］.中國藥品標準，2007，8（3）：70－71.

［9］張雪榮，張靜，段立華.RP－HPLC法測定健肝樂顆粒中芍藥苷的含量［J］.安徽農業科學，2009，37（21）：9834－9835.

［10］蘇青，黃瑞松，梁子寧，等.水羅傘藥材的鑒別及水黃皮素的含量測定［J］.華西藥學雜志，2013，28（1）：73－76.

［11］郭亮，郭劍華，馬善治，等.膝舒膠囊質量標準研究［J］.實用中醫藥雜志，2012，28（12）：1070－1071.

［12］龐瑞.止咳桃花片質量標準研究［J］.現代中醫藥，2009，29（6）：80－81.

［13］李榮全.生脈軟膠囊質量標準研究［J］.中國實用醫藥，2012，7（21）：29－30.

［14］劉昕，陳滴，姜志恒，等.康樂鼻炎片質量標準研究［J］.中成藥，2008，30（9）：18－20.

［15］辛文妤，宋俊科，何國榮，等.黃芩素和黃芩苷的藥理作用及機制研究進展［J］.中國新藥雜志，2013，22（6）：647－653.