4 308份血培養(yǎng)標(biāo)本的致病菌菌種分布及其耐藥性分析

潘月華，李從榮

(武漢大學(xué)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北武漢430060)

·論著·

4 308份血培養(yǎng)標(biāo)本的致病菌菌種分布及其耐藥性分析

潘月華，李從榮

(武漢大學(xué)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北武漢430060)

目的 了解臨床血培養(yǎng)致病菌的菌種分布及其耐藥情況，為臨床合理應(yīng)用抗菌藥物提供科學(xué)的依據(jù)。方法血液培養(yǎng)標(biāo)本用全自動血液培養(yǎng)儀BACTEC-FX BD進(jìn)行培養(yǎng)，陽性標(biāo)本用全自動微生物鑒定/藥敏儀Phoenix-100 BD進(jìn)行鑒定，并對標(biāo)本中分離出來的病原菌的分布及耐藥情況進(jìn)行回顧性分析。結(jié)果在4 308份血液標(biāo)本中分離出病原菌385株，陽性檢出率為8.9%。其中革蘭氏陽性菌218株，占56.6%；革蘭氏陰性菌140株，占36.4%；真菌27株，占7.0%。分離率占前6位者為大腸埃希氏菌72株，占18.7%、表皮葡萄球菌44株，占11.4%、真菌27株，占7.0%、金黃色葡萄菌26株，占6.8%、肺炎克雷伯菌24株，占6.2%、腐生葡萄球菌20株，占5.2%。大腸埃希氏菌的耐藥率以亞胺培南、美羅培南最低（0），表皮葡萄球菌的耐藥率以利奈唑胺、呋喃妥因最低(0)，金黃色葡萄的耐藥率以呋喃妥因、利奈唑胺最低(0)。結(jié)論血液培養(yǎng)主要病原菌為革蘭氏陽性球菌，各種條件致病菌呈上升趨勢，多數(shù)病原菌為多重耐藥且比較嚴(yán)重，臨床應(yīng)針對性抗菌治療，并積極預(yù)防和控制院內(nèi)交叉感染，加強(qiáng)血培養(yǎng)標(biāo)本采集的規(guī)范。

血液培養(yǎng)；病原體；抗藥性；抗菌藥物；合理用藥

血液感染是嚴(yán)重的全身性感染，進(jìn)展迅速，病死率高。血液培養(yǎng)是臨床診斷敗血癥的重要依據(jù)，明確其病原菌以及耐藥性趨勢，對于臨床的用藥至關(guān)重要。為了解近年來患者血液培養(yǎng)中病原菌的分布及耐藥情況，筆者回顧性的分析了本院4 308份血液培養(yǎng)標(biāo)本檢出的病原體及其藥敏結(jié)果，以研究血流感染的流行狀況與耐藥趨勢，為臨床合理用藥提供參考依據(jù)。現(xiàn)將結(jié)果報道如下：

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源2013年3月6日至8月6日期間我院病房送檢的血液培養(yǎng)標(biāo)本4 308份。

1.2 標(biāo)本采集與培養(yǎng)根據(jù)美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(CLSI)制定的微生物臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)及操作規(guī)程進(jìn)行標(biāo)本采集，將采集到的成人或者兒童標(biāo)本，分別接種于BD公司生產(chǎn)的成人或者兒童血培養(yǎng)瓶，盡快置于BACTEC-FX BD全自動血培養(yǎng)儀。儀器報告陽性后，立即接種于血平板和巧克力平板，置35℃5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)18～24 h，挑取菌落經(jīng)Phoenix-100 BD微生物鑒定儀鑒定。

1.3 質(zhì)控菌株大腸埃希氏菌(ATCC25922)、金黃色葡萄球菌(ATCC25923)、銅綠假單胞菌(ATCC29212)均由湖北省臨床檢驗(yàn)中心提供。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。各組間陽性率比較采用行×列的χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病原菌株分布4 308份血液標(biāo)本中分離出病原菌385株。革蘭氏陽性菌218株，占56.6%；革蘭氏陰性菌140株，占36.4%；真菌27株，占7.0%。分離率占前6位者為大腸埃希氏菌(72株，占18.7%)、表皮葡萄球菌(44株，占11.4%)、金黃色葡萄菌(26株，占6.8%)、肺炎克雷伯菌(24株，占6.2%)、腐生葡萄球菌(20株，占5.2%)、人葡萄球菌(12株，占3.1%)。革蘭氏陰性桿菌以大腸埃希氏菌檢出率最高，其次為肺炎克雷伯菌、鮑曼不動桿菌，分別占18.7%、6.2%、2.6%；革蘭氏陽性球菌以表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、腐生葡萄球菌檢出率最高，分別占11.4%、6.8%和5.2%，見表1。

2.2 常見革蘭氏陰性桿菌對19種抗生素的耐藥情況革蘭氏陰性桿菌對碳青霉烯類抗生素耐藥性較低，但鮑曼不動桿菌的耐藥性較高，同時表現(xiàn)出多重耐藥的特點(diǎn)，應(yīng)引起臨床的重視。革蘭氏陰性桿菌對頭孢菌素類藥物出現(xiàn)了不同的耐藥性，有的甚至達(dá)到100%，說明其治療效果偏差。大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯菌對阿莫西林/克拉維酸、亞胺培南、美洛培南、阿米卡星的耐藥性較低(＜8.3%)，對氨芐西林的耐藥率分別達(dá)93.1%、87.5%。大腸埃希氏菌的耐藥率以亞胺培南、美羅培南最低(0)，見表2。

表1385 株檢出病原菌菌種分布

表2 常見革蘭氏陰性桿菌對19種抗生素的耐藥情況[株（%）]

2.3 常見氏革蘭陽性球菌對22種抗生素的耐藥情況革蘭氏陽性球菌主要的病原菌對青霉素類、頭孢西丁的耐藥性很高，有的高達(dá)100%，失去治療作用，應(yīng)采用其他藥物治療。革蘭氏陽性球菌主要的病原菌對呋喃妥因、利奈唑胺、萬古霉素、替考拉寧的耐藥性較低，有較好的治療效果。表皮葡萄球菌的耐藥率以利奈唑胺、呋喃妥因最低(0)，金黃色葡萄的耐藥率以呋喃妥因、利奈唑胺最低(0)，見表3。

表3 常見革蘭陽性球菌對22種抗生素的耐藥情況[株（%）]

3 討論

通過對我院住院患者送檢的血液培養(yǎng)標(biāo)本研究顯示，4 308份血液標(biāo)本中共分離出病原菌385株，陽性檢出率為8.9%，略低于國內(nèi)多家醫(yī)院的報道[1]。其中革蘭氏陽性菌218株，占56.6%；革蘭氏陰性菌140株，占36.4%；真菌27株，占7.0%。由此表明，革蘭氏陽性球菌分離率高于革蘭氏陰性桿菌，引起血液感染的病原菌主要是葡萄球菌屬和腸桿菌科，與國內(nèi)外資料報道相似[2-3]。兒童檢出病原菌共23株，檢出的病原菌主要為表皮葡萄球菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌，與國內(nèi)的文獻(xiàn)報道類似[4-5]。體外藥敏結(jié)果顯示，兒科血液病房患兒血培養(yǎng)主要病原菌對常用抗菌藥物耐藥率高，凝固酶陰性葡萄球菌耐藥率高，對甲氧西林、青霉素、紅霉素的耐藥率均大于85.0%，應(yīng)加強(qiáng)監(jiān)控。由于兒童檢出病原菌標(biāo)本量小，若需獲得更有價值的病原菌檢出和耐藥性的信息，需有更多的樣本以及連續(xù)監(jiān)測。

ESBLs主要由腸桿菌科細(xì)菌產(chǎn)生，以大腸埃希氏菌和肺炎克雷伯菌為代表。近年來，由于ESBLs類抗生素的大量應(yīng)用，從而產(chǎn)生了由質(zhì)粒介導(dǎo)的ESBLs。通過轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)等形式使耐藥基因在細(xì)菌之間傳播與擴(kuò)散，從而引起細(xì)菌產(chǎn)生多重耐藥。ESBLs(+)，臨床上可能對所有青霉素類、頭孢菌素類以及氨曲南治療無效，即使體外對部分藥敏感，應(yīng)改用其他藥物[6]。

革蘭氏陽性菌中凝固陰性葡萄球菌的檢出率較高，而其為皮膚常居菌群，因此檢出凝固陰性葡萄球菌應(yīng)結(jié)合患者臨床癥狀和檢出時間等因素分析其為污染菌或感染病原菌[7-9]。病原菌的檢出時間較污染菌早，通常在48 h內(nèi)顯示陽性。若同一患者不同部位的兩次血培養(yǎng)均檢出同一種菌，則應(yīng)考慮為病原菌。為了準(zhǔn)確診斷血流感染，在采集血液標(biāo)本時應(yīng)嚴(yán)格遵循血培養(yǎng)采集方法，減少污染，同一患者應(yīng)至少送檢兩份血標(biāo)本。

真菌是院內(nèi)感染的常見病菌之一。在分離菌株中，真菌占7.0%，高于徐小仁等[10]的報道。近年來，由于抗菌藥物的不合理使用，加之糖皮質(zhì)激素和免疫抑制劑的應(yīng)用，使院內(nèi)病原菌感染發(fā)生率明顯增加；一些患者使用引流管、深靜脈留置管或氣管插管等，也是致使條件致病菌成為病原菌呈上升趨勢的原因，臨床上應(yīng)重視這兩個方面，預(yù)防病原菌感染。

由本文的統(tǒng)計結(jié)果顯示，血液培養(yǎng)的主要病原菌為革蘭氏陽性球菌，各種條件致病菌成為病原菌呈上升趨勢，且多數(shù)病原菌為多重耐藥，臨床上應(yīng)根據(jù)本院的具體情況，結(jié)合藥敏結(jié)果，實(shí)行個體化用藥。及時監(jiān)測病原體流行狀況及其耐藥情況，仍然是目前臨床有效、合理抗血流感染治療的主要手段。

[1]唐朝貴,孫海平,鄭紹同,等.某院2006-2009年血液培養(yǎng)病原體分布及耐藥性變遷[J].中國感染控制雜志,2011,10(1): 47-50,60.

[2]王邦松,李慶興,蘇剛,等.成人敗血癥與院內(nèi)感染[J].中國微生態(tài)學(xué)雜志,2001,13(2):95-96.

[3]Thope TC,Wilson ML,Tumer JE,et al.Bact/Alert an automated colrimetric microbial detection system[J].Clin Microbiol,1990,28 (7):1608-1612.

[4]曠凌寒,江詠梅,胡正強(qiáng),等.新生兒科血培養(yǎng)病原菌變遷及主要病原菌耐藥性分析[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2013,40(5):837-839.

[5]毛盛堯,胡耀文,袁春兒,等.新生兒血培養(yǎng)檢出病原菌的分布及藥敏結(jié)果分析[J].中國婦幼保健,2013,28(18):2945-2947.

[6]倪語星,尚紅,吳愛武,等.臨床微生物學(xué)與檢驗(yàn)[M].4版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2010:532.

[7]Raad I,Hanna HA,Alakech B,et al.Differential time to positivity: a useful method for diagnosing catheter-related bloodstream infections[J].Ann Intern Med,2004,140:18-25.

[8]Laupland KB,Gregaon DB,Zygun DA,et al.Severe bloodstream infections:a population-based assessment[J].Crit Care Med,2004, 32:992-997.

[9]徐雅萍,羅燕萍,周光,等.凝固酶陰性葡萄球菌所致血行感染的相關(guān)研究[J].中華醫(yī)院感染雜志,2006,16:224-226.

[10]徐小仁,朱紅軍,林祥偉,等.血液培養(yǎng)的病原菌分布及耐藥性分析[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2012,11(16):1269-1271.

Distribution of pathogens detected from 4 308 blood culture samples and analysis of drug resistance.

PAN Yue-hua,LI Cong-rong.Department of Laboratory Science,Renmin Hospital of Wuhan University,Wuhan 430060, Hubei,CHINA

ObjectiveTo study the distribution of common pathogens and drug resistance to common antibiotics in patients with septicemia,and to provide scientific basis for clinically targeted antimicrobial therapy.MethodsBy using BACTEC-FX BD automatic blood culture system for culturing blood samples,the pathogens identification and resistance test were carried out by automatic microorganism identification instrument(Phoenix-100 BD),and the distribution and drug resistance of pathogens were studied and analyzed.ResultsTotally 385 strains of pathogens were isolated from 4 308 blood culture samples,with the positive rate of 8.9%,among which 218(56.6%)were Gram-positive bacteria,140(36.4%)were Gram-negative bacteria,and 27(7.0%)were fungi.The top six pathogens with isolation rate higher than others were Escherichia coli(72 strains,18.7%),Staphylococcus epidermidis(44 strains,11.4%), Fungi(27 strains,7.0%),Staphylococcus auresu(26 strains,6.8%),Klebsiella pseudomonas(24 strains,6.2%),Staphylococcus saprophyticus(20 strains,5.2%).Escherichia coli was found lowest resistant to Imipenem and Meropenem, while Staphylococcus epidermidis and Staphylococcus auresu was lowest resistant to Linezolid and Nitrofurantoin.ConclusionThe main pathogens of septicemia are Gram-positive bacteria,with various conditional pathogenic bacteria on the rise.The majority of pathogens are multi-drug resistant to antibiotics.Clinical physicians should have persistence to actively prevent and control nosocomial cross-infections.

Blood culture;Pathogens;Drug resistance;Antimicrobial agents;Rational use of drug

R446.11

A

1003—6350（2014）21—3180—04

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.21.1247

2014-03-10)

李從榮。E-mail：1225870670@qq.com