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大腸桿菌感染對豬血液生化指標(biāo)的影響

2014-07-11 03:31:06王東升等
江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014年4期
關(guān)鍵詞:血清

王東升等

甘肅省新獸藥工程重點實驗室,甘肅蘭州 730050;2.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院,甘肅蘭州 730070)

摘要:為了研究大腸桿菌感染對豬血液生化指標(biāo)的影響,將16頭1月齡的仔豬隨機(jī)分為對照組和試驗組,分別肌內(nèi)注射0.045 mL/kg生理鹽水和4.5億CFU/kg大腸桿菌,并于接種后第24小時從豬前腔靜脈采血,分離血清,用全自動生化分析儀測定血清生化指標(biāo)。結(jié)果可以看出,與對照組豬相比,試驗組豬血清中AST、γ-GT、ALP、GLB和LDH含量顯著升高(P<0.05),CREA極顯著升高(P<0.01),而ALB含量和A/G極顯著降低(P<0.01),鈣含量、LT/ST和鈣/磷的值顯著減小(P<0.05)。說明大腸桿菌感染可引起豬肝、腎和心功能的異常。

關(guān)鍵詞:豬;大腸桿菌;血液生化指標(biāo)

中圖分類號: S858.285.1+2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號:1002-1302(2014)04-0172-03

收稿日期:2013-08-23

基金項目:國家科技支撐計劃(編號:2008BADB4B01-2)。

作者簡介:王東升(1979—),男,甘肅臨洮人,碩士,助理研究員,主要從事中藥藥理與奶牛疾病的研究。E-mail:lzmyswds@126.com。

通信作者:嚴(yán)作廷,博士,研究員。E-mail:yanzuoting@caas.cn。仔豬大腸桿菌病是由大腸桿菌引起的仔豬腸道感染的傳染性疾病,由發(fā)病日齡和臨床癥狀的差異可將該病分為仔豬黃痢、仔豬白痢和豬水腫病3種,以發(fā)生腸炎、腸毒血癥為特征[1]。這些疾病在世界各地均有發(fā)生,常常造成新生仔豬的大批死亡或生長發(fā)育不良,從而嚴(yán)重阻礙養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。目前對大腸桿菌C83-1的研究主要集中在體外抑菌[2]、藥物對其殺滅作用[3]及疫苗開發(fā)研究[4]等方面,但尚未見關(guān)于該菌感染后豬血液生化指標(biāo)變化的報道。血液通過在機(jī)體的循環(huán)參與機(jī)體營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的運(yùn)輸,從而將代謝廢物轉(zhuǎn)運(yùn)至排泄器官或移除,此外還參與抵抗細(xì)菌、病毒等病原微生物的感染等多種功能活動,對維持動物機(jī)體的正常新陳代謝發(fā)揮重要作用。血液生化指標(biāo)是動物機(jī)體新陳代謝過程的內(nèi)在反映,也是研究動物病理學(xué)、生理學(xué)、毒理學(xué)和探討疾病發(fā)病機(jī)理的重要參考指標(biāo),可以作為判斷動物機(jī)體健康狀況的重要依據(jù)[5]。因此通過研究大腸桿菌感染后豬血液相關(guān)生化指標(biāo)的變化,可以為臨床診斷和治療該病提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗菌種

大腸桿菌C83-1,購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。攻毒前接種于普通肉湯管中,37 ℃ 下培養(yǎng)18~20 h后鏡檢,純粹后吸取0.5 mL接種于營養(yǎng)瓊脂平板上,使平板全部浸潤后置于37 ℃培養(yǎng)20 h;用生理鹽水將菌苔洗下,將洗下的菌液混合后進(jìn)行平板計數(shù),結(jié)果濃度為100億CFU/mL;將菌液置于 4 ℃ 保存過夜。

1.2試驗動物分組與處理

選擇健康狀況良好、日齡相近的16頭雜交豬,體重 8.0~10.0 kg,雌、雄兼有,均購自蘭州市某養(yǎng)豬場。隨機(jī)均分為對照組和試驗組,于對照組肌內(nèi)注射0.045 mL/kg生理鹽水,試驗組肌內(nèi)注射4.5億CFU/kg體重的大腸桿菌。在接種后第24小時從豬前腔靜脈采10~15 mL血,分離血清并于-80 ℃保存。

1.3生化指標(biāo)測定

用邁瑞B(yǎng)S-420全自動生化分析儀(深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司)測定血清生化指標(biāo),主要包括天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、γ-谷氨酸轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT)、堿性磷酸酶(ALP)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、總膽固醇(TC)、總血紅素(TBiL)、直接血紅素(DBiL)、肌酐(CREA)、尿素(UREA)、尿酸(UA)、肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)、血糖(GLU)、鈣(Ca)、磷(P)和鎂(Mg)等19項生化指標(biāo)。計算ALB與GLB的比值(A/G)、ALT與AST的比值(LT/ST)、鈣磷比(鈣/磷)。試驗所用試劑盒均為深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司的產(chǎn)品。

1.4數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示,采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析,組間數(shù)據(jù)差異性比較采用獨(dú)立樣本t檢驗。

2結(jié)果與分析

大腸桿菌感染對豬血液生化指標(biāo)的影響見表1。其中AST、γ-GT、ALP、GLB、ALB、A/G、LT/ST、TC、TBiL、DBiL、ALT、TP、GLU為肝功能相關(guān)指標(biāo),CREA、UREA、UA為腎功能相關(guān)指標(biāo),血清鈣含量、鈣/磷比、血清磷含量、血清鎂含量為血清離子的變化指標(biāo),LDH、CK為心功能相關(guān)指標(biāo)。

2.1肝功能相關(guān)指標(biāo)的變化

3結(jié)論與討論

肝臟是動物機(jī)體中含酶最豐富的器官,其酶含量約占肝臟總蛋白含量的2/3。血液中的ALT與AST是動物體內(nèi)2種重要的轉(zhuǎn)氨酶,是反映動物肝臟功能的重要指標(biāo)[6]。當(dāng)肝組織發(fā)生病變或受到損傷后,肝細(xì)胞內(nèi)的ALT、AST釋放入血漿,致使血清中的ALT、AST酶活性增強(qiáng),但其增強(qiáng)幅度不一定與肝細(xì)胞的損傷程度成正比[7-8]。表現(xiàn)為在輕、中度肝細(xì)胞損害時,ALT漏出率大于AST;在重度肝細(xì)胞損害時線粒體遭到破壞,AST漏出增加[9],因此醫(yī)學(xué)上常將ALT、AST作為診斷肝臟疾病的酶學(xué)指標(biāo)。血清中的γ-GT主要來自肝臟,因此具有較強(qiáng)的特異性,當(dāng)肝膽系統(tǒng)有疾病時,γ-GT升高,因此常以此酶作為病畜能否恢復(fù)到正常狀態(tài)的標(biāo)志[10]。當(dāng)動物肝臟發(fā)生疾病時,肝細(xì)胞過度產(chǎn)生ALP,并經(jīng)淋巴管和肝竇進(jìn)入血液,同時由于肝內(nèi)膽管膽汁排泄障礙,過度的ALP反流入血液而引起血清ALP明顯升高。本試驗中,與對照組相比,試驗組AST、γ-GT、ALP均顯著升高,LT/ST顯著降低,說明大腸桿菌可以引起豬的肝損傷、肝細(xì)胞膜通透性增加,進(jìn)而引起肝細(xì)胞中AST釋放入血液中,γ-GT和過度產(chǎn)生的ALP也進(jìn)入血液中,進(jìn)而導(dǎo)致血清中AST、γ-GT、ALP升高。endprint

肝臟參與蛋白質(zhì)的合成與分解代謝,血清TP含量和ALB含量是反映肝功能的重要指標(biāo),ALB由肝臟產(chǎn)生,是血漿蛋白的主要組成成分,在血液膠體滲透壓維持和體內(nèi)代謝物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)及營養(yǎng)等方面發(fā)揮重要作用,當(dāng)肝功能受損時,ALB的分泌減少[11]。GLB與機(jī)體免疫功能密切相關(guān),當(dāng)機(jī)體發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)及各種原因造成的肝損傷時,ALB含量降低,GLB含量升高[12-13]。本試驗中試驗組GLB顯著高于對照組,而ALB、A/G顯著低于對照組,說明大腸桿菌可以引起豬肝臟對蛋白質(zhì)代謝功能異常,這可能與豬感染大腸桿菌后,肝細(xì)胞功能受損、合成ALB減少,但由于大腸桿菌刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng)而產(chǎn)生的免疫球蛋白增多有關(guān)。

腎臟是動物的主要泌尿器官和排泄器官,血液中的UREA來源于肝臟,而去路是通過腎臟隨尿排出。當(dāng)腎實質(zhì)受損時,腎小球濾過率下降,濾過增多,導(dǎo)致血液中UREA濃度升高。UA主要產(chǎn)生于肝臟,在腎臟中與白蛋白結(jié)合,大部分被腎小管重吸收并轉(zhuǎn)變?yōu)槟蚰宜仉S尿排出,腎臟嚴(yán)重?fù)p傷時,血液中的UA升高。CREA為體內(nèi)物質(zhì)代謝過程的中間產(chǎn)物,當(dāng)腎實質(zhì)損害、腎小球濾過率降低到臨界點后,血中的CREA濃度就會急劇上升,但是由于腎臟的儲備力和代償力很大,因此在腎小球受損的早期或輕度損害時,血液中的CREA濃度可能是正常的,但當(dāng)血液中的CREA含量明顯增高時,常表現(xiàn)出腎臟功能嚴(yán)重受損[14]。本試驗中試驗組CREA極顯著升高,UA有上升趨勢,UREA無顯著異常,說明豬感染大腸桿菌可引起腎功能異常。

體液的主要成分是水和電解質(zhì),電解質(zhì)在維持體液滲透壓和細(xì)胞內(nèi)外的水及酸堿平衡中發(fā)揮著重要作用。機(jī)體主要通過腎臟維持體液的平衡和保持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,腎功能異常時體液中的離子發(fā)生變化。鈣是動物機(jī)體中含量最多的常量金屬元素,嚴(yán)重的全身感染性疾病可引起低鈣血癥,而且病情越嚴(yán)重,血鈣水平越低[15],腎病綜合征可引起血鈣水平降低[16]。腎臟發(fā)生疾病時,對磷的排泄功能下降,可引起血液磷的濃度升高。本試驗中試驗組血清鈣含量和鈣/磷降低,血清磷含量顯著升高,這表明大腸桿菌感染可引起豬的鈣、磷代謝紊亂,這可能腎功能異常有關(guān)。

血清中的CK和LDH是肌細(xì)胞損傷的重要指標(biāo),臨床上常用于心肌損害的輔助診斷。LDH活性可反映細(xì)胞內(nèi)無氧酵解的活躍程度,在一定程度上能夠反映機(jī)體的應(yīng)激能力[17]。AST在一定程度上也可反映心肌細(xì)胞的損傷。本試驗中,與對照組相比,試驗組LDH顯著升高,表明豬感染大腸桿菌后,心肌細(xì)胞膜通透性增加,造成LDH的泄漏;而AST升高,LT/ST顯著減小,表明感染引起心肌細(xì)胞受損嚴(yán)重,這可能與大腸桿菌感染導(dǎo)致豬呼吸困難而導(dǎo)致的機(jī)體缺氧、心臟代償功能增強(qiáng)有關(guān)。

本試驗采用肌內(nèi)注射大腸桿菌C83-1感染豬,通過對豬血清生化指標(biāo)變化的分析,研究了大腸桿菌感染對豬肝、腎和心功能的影響。試驗結(jié)果表明,大腸桿菌感染可使豬血清中AST、γ-GT、ALP、GLB和LDH含量顯著升高(P<0.05),CREA極顯著升高(P<0.01),而ALB含量和A/G極顯著降低(P<0.01),鈣含量、LT/ST和鈣/磷的值顯著降低(P<005)。這說明大腸桿菌感染可引起豬肝、腎和心功能的異常。

參考文獻(xiàn):

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[9]張錚錚,鄺衛(wèi)紅,吳樹鐸. 肝硬化不同證型與ALT、AST、TB、IB、TBA的相關(guān)性研究[J]. 河南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2009,24(1):63-64.

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[17]信富鈺,侯明海,李文立,等. 不同鋅水平對荷斯坦種公牛血液理化指標(biāo)的影響[J]. 動物營養(yǎng)學(xué)報,2007,19(5):627-630.endprint

肝臟參與蛋白質(zhì)的合成與分解代謝,血清TP含量和ALB含量是反映肝功能的重要指標(biāo),ALB由肝臟產(chǎn)生,是血漿蛋白的主要組成成分,在血液膠體滲透壓維持和體內(nèi)代謝物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)及營養(yǎng)等方面發(fā)揮重要作用,當(dāng)肝功能受損時,ALB的分泌減少[11]。GLB與機(jī)體免疫功能密切相關(guān),當(dāng)機(jī)體發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)及各種原因造成的肝損傷時,ALB含量降低,GLB含量升高[12-13]。本試驗中試驗組GLB顯著高于對照組,而ALB、A/G顯著低于對照組,說明大腸桿菌可以引起豬肝臟對蛋白質(zhì)代謝功能異常,這可能與豬感染大腸桿菌后,肝細(xì)胞功能受損、合成ALB減少,但由于大腸桿菌刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng)而產(chǎn)生的免疫球蛋白增多有關(guān)。

腎臟是動物的主要泌尿器官和排泄器官,血液中的UREA來源于肝臟,而去路是通過腎臟隨尿排出。當(dāng)腎實質(zhì)受損時,腎小球濾過率下降,濾過增多,導(dǎo)致血液中UREA濃度升高。UA主要產(chǎn)生于肝臟,在腎臟中與白蛋白結(jié)合,大部分被腎小管重吸收并轉(zhuǎn)變?yōu)槟蚰宜仉S尿排出,腎臟嚴(yán)重?fù)p傷時,血液中的UA升高。CREA為體內(nèi)物質(zhì)代謝過程的中間產(chǎn)物,當(dāng)腎實質(zhì)損害、腎小球濾過率降低到臨界點后,血中的CREA濃度就會急劇上升,但是由于腎臟的儲備力和代償力很大,因此在腎小球受損的早期或輕度損害時,血液中的CREA濃度可能是正常的,但當(dāng)血液中的CREA含量明顯增高時,常表現(xiàn)出腎臟功能嚴(yán)重受損[14]。本試驗中試驗組CREA極顯著升高,UA有上升趨勢,UREA無顯著異常,說明豬感染大腸桿菌可引起腎功能異常。

體液的主要成分是水和電解質(zhì),電解質(zhì)在維持體液滲透壓和細(xì)胞內(nèi)外的水及酸堿平衡中發(fā)揮著重要作用。機(jī)體主要通過腎臟維持體液的平衡和保持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,腎功能異常時體液中的離子發(fā)生變化。鈣是動物機(jī)體中含量最多的常量金屬元素,嚴(yán)重的全身感染性疾病可引起低鈣血癥,而且病情越嚴(yán)重,血鈣水平越低[15],腎病綜合征可引起血鈣水平降低[16]。腎臟發(fā)生疾病時,對磷的排泄功能下降,可引起血液磷的濃度升高。本試驗中試驗組血清鈣含量和鈣/磷降低,血清磷含量顯著升高,這表明大腸桿菌感染可引起豬的鈣、磷代謝紊亂,這可能腎功能異常有關(guān)。

血清中的CK和LDH是肌細(xì)胞損傷的重要指標(biāo),臨床上常用于心肌損害的輔助診斷。LDH活性可反映細(xì)胞內(nèi)無氧酵解的活躍程度,在一定程度上能夠反映機(jī)體的應(yīng)激能力[17]。AST在一定程度上也可反映心肌細(xì)胞的損傷。本試驗中,與對照組相比,試驗組LDH顯著升高,表明豬感染大腸桿菌后,心肌細(xì)胞膜通透性增加,造成LDH的泄漏;而AST升高,LT/ST顯著減小,表明感染引起心肌細(xì)胞受損嚴(yán)重,這可能與大腸桿菌感染導(dǎo)致豬呼吸困難而導(dǎo)致的機(jī)體缺氧、心臟代償功能增強(qiáng)有關(guān)。

本試驗采用肌內(nèi)注射大腸桿菌C83-1感染豬,通過對豬血清生化指標(biāo)變化的分析,研究了大腸桿菌感染對豬肝、腎和心功能的影響。試驗結(jié)果表明,大腸桿菌感染可使豬血清中AST、γ-GT、ALP、GLB和LDH含量顯著升高(P<0.05),CREA極顯著升高(P<0.01),而ALB含量和A/G極顯著降低(P<0.01),鈣含量、LT/ST和鈣/磷的值顯著降低(P<005)。這說明大腸桿菌感染可引起豬肝、腎和心功能的異常。

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[11]耿忠誠,袁子國,劉麗麗,等. 三江白豬Hal基因型及其血液生化指標(biāo)的測定[J]. 中國獸醫(yī)科技,2005,35(10):794-797.

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肝臟參與蛋白質(zhì)的合成與分解代謝,血清TP含量和ALB含量是反映肝功能的重要指標(biāo),ALB由肝臟產(chǎn)生,是血漿蛋白的主要組成成分,在血液膠體滲透壓維持和體內(nèi)代謝物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)及營養(yǎng)等方面發(fā)揮重要作用,當(dāng)肝功能受損時,ALB的分泌減少[11]。GLB與機(jī)體免疫功能密切相關(guān),當(dāng)機(jī)體發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)及各種原因造成的肝損傷時,ALB含量降低,GLB含量升高[12-13]。本試驗中試驗組GLB顯著高于對照組,而ALB、A/G顯著低于對照組,說明大腸桿菌可以引起豬肝臟對蛋白質(zhì)代謝功能異常,這可能與豬感染大腸桿菌后,肝細(xì)胞功能受損、合成ALB減少,但由于大腸桿菌刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng)而產(chǎn)生的免疫球蛋白增多有關(guān)。

腎臟是動物的主要泌尿器官和排泄器官,血液中的UREA來源于肝臟,而去路是通過腎臟隨尿排出。當(dāng)腎實質(zhì)受損時,腎小球濾過率下降,濾過增多,導(dǎo)致血液中UREA濃度升高。UA主要產(chǎn)生于肝臟,在腎臟中與白蛋白結(jié)合,大部分被腎小管重吸收并轉(zhuǎn)變?yōu)槟蚰宜仉S尿排出,腎臟嚴(yán)重?fù)p傷時,血液中的UA升高。CREA為體內(nèi)物質(zhì)代謝過程的中間產(chǎn)物,當(dāng)腎實質(zhì)損害、腎小球濾過率降低到臨界點后,血中的CREA濃度就會急劇上升,但是由于腎臟的儲備力和代償力很大,因此在腎小球受損的早期或輕度損害時,血液中的CREA濃度可能是正常的,但當(dāng)血液中的CREA含量明顯增高時,常表現(xiàn)出腎臟功能嚴(yán)重受損[14]。本試驗中試驗組CREA極顯著升高,UA有上升趨勢,UREA無顯著異常,說明豬感染大腸桿菌可引起腎功能異常。

體液的主要成分是水和電解質(zhì),電解質(zhì)在維持體液滲透壓和細(xì)胞內(nèi)外的水及酸堿平衡中發(fā)揮著重要作用。機(jī)體主要通過腎臟維持體液的平衡和保持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,腎功能異常時體液中的離子發(fā)生變化。鈣是動物機(jī)體中含量最多的常量金屬元素,嚴(yán)重的全身感染性疾病可引起低鈣血癥,而且病情越嚴(yán)重,血鈣水平越低[15],腎病綜合征可引起血鈣水平降低[16]。腎臟發(fā)生疾病時,對磷的排泄功能下降,可引起血液磷的濃度升高。本試驗中試驗組血清鈣含量和鈣/磷降低,血清磷含量顯著升高,這表明大腸桿菌感染可引起豬的鈣、磷代謝紊亂,這可能腎功能異常有關(guān)。

血清中的CK和LDH是肌細(xì)胞損傷的重要指標(biāo),臨床上常用于心肌損害的輔助診斷。LDH活性可反映細(xì)胞內(nèi)無氧酵解的活躍程度,在一定程度上能夠反映機(jī)體的應(yīng)激能力[17]。AST在一定程度上也可反映心肌細(xì)胞的損傷。本試驗中,與對照組相比,試驗組LDH顯著升高,表明豬感染大腸桿菌后,心肌細(xì)胞膜通透性增加,造成LDH的泄漏;而AST升高,LT/ST顯著減小,表明感染引起心肌細(xì)胞受損嚴(yán)重,這可能與大腸桿菌感染導(dǎo)致豬呼吸困難而導(dǎo)致的機(jī)體缺氧、心臟代償功能增強(qiáng)有關(guān)。

本試驗采用肌內(nèi)注射大腸桿菌C83-1感染豬,通過對豬血清生化指標(biāo)變化的分析,研究了大腸桿菌感染對豬肝、腎和心功能的影響。試驗結(jié)果表明,大腸桿菌感染可使豬血清中AST、γ-GT、ALP、GLB和LDH含量顯著升高(P<0.05),CREA極顯著升高(P<0.01),而ALB含量和A/G極顯著降低(P<0.01),鈣含量、LT/ST和鈣/磷的值顯著降低(P<005)。這說明大腸桿菌感染可引起豬肝、腎和心功能的異常。

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