真姬菇多糖超聲波輔助提取工藝及抗氧化活性研究

賀江等

摘要：為探討真姬菇多糖的提取和抗氧化活性，通過單因素試驗設(shè)計和正交設(shè)計對真姬菇多糖的超聲波輔助提取工藝進(jìn)行研究，采用自由基體外清除試驗對真姬菇多糖的體外抗氧化活性進(jìn)行探討。結(jié)果表明，在超聲功率為 200 W、料液比1 g ∶40 mL、提取溫度60 ℃、提取時間60 min的條件下，真姬菇多糖提取得率可達(dá)5.68%；真姬菇粗多糖對DPPH·自由基和ABTS·+自由基均表現(xiàn)出較好的體外清除效果，當(dāng)濃度為1.0 mg/mL時，其自由基清除能力與濃度為80 μmol/L的維生素C相當(dāng)。

關(guān)鍵詞：真姬菇；真菌多糖；超聲波輔助提取；抗氧化活性

中圖分類號： TS201.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號：1002-1302（2014）04-0232-03

收稿日期：2013-08-10

基金項目：湖南省大學(xué)生研究性學(xué)習(xí)與創(chuàng)新性實驗項目（編號：2012）；湖南文理學(xué)院博士啟動項目（編號：2011）；湖南省教育廳科研項目（編號：12C0828）。

作者簡介：賀江（1983—），男，江西萍鄉(xiāng)人，講師，主要從事食品安全與食品生物技術(shù)相關(guān)研究。E-mail：hejiang1119@163.com。我國食用菌資源豐富，許多食用菌以其獨特的營養(yǎng)價值和藥用功能而深受消費者喜愛。真姬菇別稱玉蕈、蟹味菇、海鮮菇等，味道鮮美，肉厚質(zhì)嫩，具有獨特的蟹香味；是北溫帶地區(qū)的一種優(yōu)良食用菌，于20世紀(jì)80年代從日本引入我國山西、遼寧、福建等省進(jìn)行廣泛栽培。已有研究表明，從真姬菇子實體中提取的以β-1，3-D葡聚糖為代表的多糖具有抗腫瘤、提高免疫力、預(yù)防衰老、延長壽命等一系列生理活性[1-2]。目前，真姬菇大多作為高營養(yǎng)價值的烹飪食材供消費者享用；但從食用菌中提取多糖等活性成分，并開發(fā)出高附加值的保健食品或飲品也是食用菌資源開發(fā)與利用的一種有效途徑[3-4]。目前，真姬菇多糖提取工藝相關(guān)的研究報道較少。因此，本研究以真姬菇為研究材料，采用目前廣泛應(yīng)用的超聲波輔助提取工藝[5-6]對其進(jìn)行多糖提取，重點探討其提取工藝，并進(jìn)一步對真姬菇多糖的體外抗氧化活性進(jìn)行初步研究。本研究的開展，有望為真姬菇資源的開發(fā)與利用提供一定參考。

1材料與方法

1.1材料與試劑

真姬菇子實體（干品，產(chǎn)地古田縣）；濃硫酸、苯酚（5%）、無水乙醇、無水甲醇、葡萄糖、K2S2O8等均為分析純；DPPH、ABTS等均為優(yōu)級純。

1.2儀器與設(shè)備

KH5200超聲波提取設(shè)備（超聲功率為200 W）、UV-1750 紫外可見分光光度計（日本島津）、電熱鼓風(fēng)干燥箱、恒溫水浴鍋、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、萬能粉碎機、電子天平、高速離心機、渦旋振蕩器以及其他常規(guī)玻璃儀器。

1.3方法

1.3.1真姬菇多糖超聲波輔助提取基本流程[5-6]將真姬菌子實體干品于60 ℃下恒溫干燥10 h后粉碎，過100目篩；準(zhǔn)確稱取2.00 g干粉樣品，以蒸餾水為提取溶劑，按設(shè)定的一系列提取條件進(jìn)行提取后，樣液4 000 r/min離心 10 min；上清液加入3倍體積95%乙醇進(jìn)行沉淀，離心收集沉淀，并用無水乙醇和乙醚分別洗滌2次，即得粗多糖；將粗多糖溶于蒸餾水中并定容至20 mL，采用苯酚-硫酸法進(jìn)行多糖含量的測定。

1.3.2工藝參數(shù)對真姬菇多糖超聲波輔助提取的影響在固定的超聲波功率條件下，設(shè)置一系列料液比（1 ∶10、1 ∶20、1 ∶30、1 ∶40、1 ∶50，g ∶mL）、提取溫度（30、40、50、60、70 ℃）和提取時間（15、30、45、60、75 min）對真姬菇多糖進(jìn)行提取，以探索這3個因素對真姬菇多糖提取效果的影響，每個處理重復(fù)3次。

1.3.3真姬菇多糖超聲波輔助提取工藝條件優(yōu)化本研究在探討了料液比、提取溫度、提取時間等因素對真姬菇多糖提取效果的影響后，進(jìn)一步對每個因素分別選取3個水平，采用L9（34）正交表進(jìn)行正交試驗，以對真姬菇多糖超聲波輔助提取的工藝條件進(jìn)行優(yōu)化，正交試驗的因素和水平如表1所示。

3結(jié)論

本研究通過單因素試驗探討了料液比、提取溫度、提取時間等因素對真姬菇多糖超聲波輔助提取效果的影響，并在此基礎(chǔ)上采用正交設(shè)計對真姬菇多糖的超聲波輔助提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明，在固定超聲功率為200 W、料液比 1 g ∶40 mL、提取溫度60 ℃、提取時間60 min的條件下，真姬菇多糖提取得率最高，可達(dá)5.68%。本研究還進(jìn)一步采用自由基體外清除試驗對真姬菇粗多糖的抗氧化活性進(jìn)行了初步探討。結(jié)果表明，真姬菇粗多糖對DPPH·自由基和ABTS·+自由基均表現(xiàn)出較好的體外清除效果，當(dāng)濃度為 1.0 mg/mL 時，其自由基清除能力與濃度為80 μmol/L的維生素C相當(dāng)。本研究結(jié)果可為我國真姬菇資源的開發(fā)和利用提供一定的基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)：

[1]孫培龍，魏紅福，楊開，等. 真姬菇研究進(jìn)展[J]. 食品科技，2005（9）：54-57.

[2]李順峰，劉興華，張麗華，等. 真姬菇子實體多糖的提取工藝優(yōu)化[J]. 農(nóng)業(yè)工程學(xué)報，2008，24（2）：281-284.

[3]周國英，蘭貴紅，何小燕. 食用菌多糖研究開發(fā)進(jìn)展[J]. 實用預(yù)防醫(yī)學(xué)，2004，11（1）：203-204.

[4]王麗霞，杜德清. 食用菌多糖研究進(jìn)展[J]. 浙江林業(yè)科技，2005，25（5）：49-53，56.

[5]羅登宏. 超聲波輔助提取金針菇多糖工藝參數(shù)優(yōu)化研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010（2）：316-317.

[6]史碧波，王雪波，羅曉妙. 超聲波輔助提取雞油菌多糖的研究[J]. 食品與機械，2012，28（2）：152-154，218.

[7]樊懿娜，趙婷，周葉，等. 苯酚-硫酸法測定灰樹花中多糖含量的研究[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（25）：15256-15257.

[8]Faller A L K，F(xiàn)ialho E. Polyphenol content and antioxidant capacity in organic and conventional plant foods[J]. Journal of Food Composition and Analysis，2010，23（6）：561-568.

[9]熊建華，閔嗣璠，董開發(fā)，等. 南瓜不同部位抗氧化活性的比較[J]. 食品研究與開發(fā)，2011，32（11）：135-138.

[10]秦秀麗，李鳳林. 超聲波法提取蛹蟲草多糖的工藝研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（5）：378-380.endprint

摘要：為探討真姬菇多糖的提取和抗氧化活性，通過單因素試驗設(shè)計和正交設(shè)計對真姬菇多糖的超聲波輔助提取工藝進(jìn)行研究，采用自由基體外清除試驗對真姬菇多糖的體外抗氧化活性進(jìn)行探討。結(jié)果表明，在超聲功率為 200 W、料液比1 g ∶40 mL、提取溫度60 ℃、提取時間60 min的條件下，真姬菇多糖提取得率可達(dá)5.68%；真姬菇粗多糖對DPPH·自由基和ABTS·+自由基均表現(xiàn)出較好的體外清除效果，當(dāng)濃度為1.0 mg/mL時，其自由基清除能力與濃度為80 μmol/L的維生素C相當(dāng)。

關(guān)鍵詞：真姬菇；真菌多糖；超聲波輔助提取；抗氧化活性

中圖分類號： TS201.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號：1002-1302（2014）04-0232-03

收稿日期：2013-08-10

基金項目：湖南省大學(xué)生研究性學(xué)習(xí)與創(chuàng)新性實驗項目（編號：2012）；湖南文理學(xué)院博士啟動項目（編號：2011）；湖南省教育廳科研項目（編號：12C0828）。

作者簡介：賀江（1983—），男，江西萍鄉(xiāng)人，講師，主要從事食品安全與食品生物技術(shù)相關(guān)研究。E-mail：hejiang1119@163.com。我國食用菌資源豐富，許多食用菌以其獨特的營養(yǎng)價值和藥用功能而深受消費者喜愛。真姬菇別稱玉蕈、蟹味菇、海鮮菇等，味道鮮美，肉厚質(zhì)嫩，具有獨特的蟹香味；是北溫帶地區(qū)的一種優(yōu)良食用菌，于20世紀(jì)80年代從日本引入我國山西、遼寧、福建等省進(jìn)行廣泛栽培。已有研究表明，從真姬菇子實體中提取的以β-1，3-D葡聚糖為代表的多糖具有抗腫瘤、提高免疫力、預(yù)防衰老、延長壽命等一系列生理活性[1-2]。目前，真姬菇大多作為高營養(yǎng)價值的烹飪食材供消費者享用；但從食用菌中提取多糖等活性成分，并開發(fā)出高附加值的保健食品或飲品也是食用菌資源開發(fā)與利用的一種有效途徑[3-4]。目前，真姬菇多糖提取工藝相關(guān)的研究報道較少。因此，本研究以真姬菇為研究材料，采用目前廣泛應(yīng)用的超聲波輔助提取工藝[5-6]對其進(jìn)行多糖提取，重點探討其提取工藝，并進(jìn)一步對真姬菇多糖的體外抗氧化活性進(jìn)行初步研究。本研究的開展，有望為真姬菇資源的開發(fā)與利用提供一定參考。

1材料與方法

1.1材料與試劑

真姬菇子實體（干品，產(chǎn)地古田縣）；濃硫酸、苯酚（5%）、無水乙醇、無水甲醇、葡萄糖、K2S2O8等均為分析純；DPPH、ABTS等均為優(yōu)級純。

1.2儀器與設(shè)備

KH5200超聲波提取設(shè)備（超聲功率為200 W）、UV-1750 紫外可見分光光度計（日本島津）、電熱鼓風(fēng)干燥箱、恒溫水浴鍋、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、萬能粉碎機、電子天平、高速離心機、渦旋振蕩器以及其他常規(guī)玻璃儀器。

1.3方法

1.3.1真姬菇多糖超聲波輔助提取基本流程[5-6]將真姬菌子實體干品于60 ℃下恒溫干燥10 h后粉碎，過100目篩；準(zhǔn)確稱取2.00 g干粉樣品，以蒸餾水為提取溶劑，按設(shè)定的一系列提取條件進(jìn)行提取后，樣液4 000 r/min離心 10 min；上清液加入3倍體積95%乙醇進(jìn)行沉淀，離心收集沉淀，并用無水乙醇和乙醚分別洗滌2次，即得粗多糖；將粗多糖溶于蒸餾水中并定容至20 mL，采用苯酚-硫酸法進(jìn)行多糖含量的測定。

1.3.2工藝參數(shù)對真姬菇多糖超聲波輔助提取的影響在固定的超聲波功率條件下，設(shè)置一系列料液比（1 ∶10、1 ∶20、1 ∶30、1 ∶40、1 ∶50，g ∶mL）、提取溫度（30、40、50、60、70 ℃）和提取時間（15、30、45、60、75 min）對真姬菇多糖進(jìn)行提取，以探索這3個因素對真姬菇多糖提取效果的影響，每個處理重復(fù)3次。

1.3.3真姬菇多糖超聲波輔助提取工藝條件優(yōu)化本研究在探討了料液比、提取溫度、提取時間等因素對真姬菇多糖提取效果的影響后，進(jìn)一步對每個因素分別選取3個水平，采用L9（34）正交表進(jìn)行正交試驗，以對真姬菇多糖超聲波輔助提取的工藝條件進(jìn)行優(yōu)化，正交試驗的因素和水平如表1所示。

3結(jié)論

本研究通過單因素試驗探討了料液比、提取溫度、提取時間等因素對真姬菇多糖超聲波輔助提取效果的影響，并在此基礎(chǔ)上采用正交設(shè)計對真姬菇多糖的超聲波輔助提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明，在固定超聲功率為200 W、料液比 1 g ∶40 mL、提取溫度60 ℃、提取時間60 min的條件下，真姬菇多糖提取得率最高，可達(dá)5.68%。本研究還進(jìn)一步采用自由基體外清除試驗對真姬菇粗多糖的抗氧化活性進(jìn)行了初步探討。結(jié)果表明，真姬菇粗多糖對DPPH·自由基和ABTS·+自由基均表現(xiàn)出較好的體外清除效果，當(dāng)濃度為 1.0 mg/mL 時，其自由基清除能力與濃度為80 μmol/L的維生素C相當(dāng)。本研究結(jié)果可為我國真姬菇資源的開發(fā)和利用提供一定的基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)：

[1]孫培龍，魏紅福，楊開，等. 真姬菇研究進(jìn)展[J]. 食品科技，2005（9）：54-57.

[2]李順峰，劉興華，張麗華，等. 真姬菇子實體多糖的提取工藝優(yōu)化[J]. 農(nóng)業(yè)工程學(xué)報，2008，24（2）：281-284.

[3]周國英，蘭貴紅，何小燕. 食用菌多糖研究開發(fā)進(jìn)展[J]. 實用預(yù)防醫(yī)學(xué)，2004，11（1）：203-204.

[4]王麗霞，杜德清. 食用菌多糖研究進(jìn)展[J]. 浙江林業(yè)科技，2005，25（5）：49-53，56.

[5]羅登宏. 超聲波輔助提取金針菇多糖工藝參數(shù)優(yōu)化研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010（2）：316-317.

[6]史碧波，王雪波，羅曉妙. 超聲波輔助提取雞油菌多糖的研究[J]. 食品與機械，2012，28（2）：152-154，218.

[7]樊懿娜，趙婷，周葉，等. 苯酚-硫酸法測定灰樹花中多糖含量的研究[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（25）：15256-15257.

[8]Faller A L K，F(xiàn)ialho E. Polyphenol content and antioxidant capacity in organic and conventional plant foods[J]. Journal of Food Composition and Analysis，2010，23（6）：561-568.

[9]熊建華，閔嗣璠，董開發(fā)，等. 南瓜不同部位抗氧化活性的比較[J]. 食品研究與開發(fā)，2011，32（11）：135-138.

[10]秦秀麗，李鳳林. 超聲波法提取蛹蟲草多糖的工藝研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（5）：378-380.endprint

摘要：為探討真姬菇多糖的提取和抗氧化活性，通過單因素試驗設(shè)計和正交設(shè)計對真姬菇多糖的超聲波輔助提取工藝進(jìn)行研究，采用自由基體外清除試驗對真姬菇多糖的體外抗氧化活性進(jìn)行探討。結(jié)果表明，在超聲功率為 200 W、料液比1 g ∶40 mL、提取溫度60 ℃、提取時間60 min的條件下，真姬菇多糖提取得率可達(dá)5.68%；真姬菇粗多糖對DPPH·自由基和ABTS·+自由基均表現(xiàn)出較好的體外清除效果，當(dāng)濃度為1.0 mg/mL時，其自由基清除能力與濃度為80 μmol/L的維生素C相當(dāng)。

關(guān)鍵詞：真姬菇；真菌多糖；超聲波輔助提取；抗氧化活性

中圖分類號： TS201.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號：1002-1302（2014）04-0232-03

收稿日期：2013-08-10

基金項目：湖南省大學(xué)生研究性學(xué)習(xí)與創(chuàng)新性實驗項目（編號：2012）；湖南文理學(xué)院博士啟動項目（編號：2011）；湖南省教育廳科研項目（編號：12C0828）。

作者簡介：賀江（1983—），男，江西萍鄉(xiāng)人，講師，主要從事食品安全與食品生物技術(shù)相關(guān)研究。E-mail：hejiang1119@163.com。我國食用菌資源豐富，許多食用菌以其獨特的營養(yǎng)價值和藥用功能而深受消費者喜愛。真姬菇別稱玉蕈、蟹味菇、海鮮菇等，味道鮮美，肉厚質(zhì)嫩，具有獨特的蟹香味；是北溫帶地區(qū)的一種優(yōu)良食用菌，于20世紀(jì)80年代從日本引入我國山西、遼寧、福建等省進(jìn)行廣泛栽培。已有研究表明，從真姬菇子實體中提取的以β-1，3-D葡聚糖為代表的多糖具有抗腫瘤、提高免疫力、預(yù)防衰老、延長壽命等一系列生理活性[1-2]。目前，真姬菇大多作為高營養(yǎng)價值的烹飪食材供消費者享用；但從食用菌中提取多糖等活性成分，并開發(fā)出高附加值的保健食品或飲品也是食用菌資源開發(fā)與利用的一種有效途徑[3-4]。目前，真姬菇多糖提取工藝相關(guān)的研究報道較少。因此，本研究以真姬菇為研究材料，采用目前廣泛應(yīng)用的超聲波輔助提取工藝[5-6]對其進(jìn)行多糖提取，重點探討其提取工藝，并進(jìn)一步對真姬菇多糖的體外抗氧化活性進(jìn)行初步研究。本研究的開展，有望為真姬菇資源的開發(fā)與利用提供一定參考。

1材料與方法

1.1材料與試劑

真姬菇子實體（干品，產(chǎn)地古田縣）；濃硫酸、苯酚（5%）、無水乙醇、無水甲醇、葡萄糖、K2S2O8等均為分析純；DPPH、ABTS等均為優(yōu)級純。

1.2儀器與設(shè)備

KH5200超聲波提取設(shè)備（超聲功率為200 W）、UV-1750 紫外可見分光光度計（日本島津）、電熱鼓風(fēng)干燥箱、恒溫水浴鍋、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、萬能粉碎機、電子天平、高速離心機、渦旋振蕩器以及其他常規(guī)玻璃儀器。

1.3方法

1.3.1真姬菇多糖超聲波輔助提取基本流程[5-6]將真姬菌子實體干品于60 ℃下恒溫干燥10 h后粉碎，過100目篩；準(zhǔn)確稱取2.00 g干粉樣品，以蒸餾水為提取溶劑，按設(shè)定的一系列提取條件進(jìn)行提取后，樣液4 000 r/min離心 10 min；上清液加入3倍體積95%乙醇進(jìn)行沉淀，離心收集沉淀，并用無水乙醇和乙醚分別洗滌2次，即得粗多糖；將粗多糖溶于蒸餾水中并定容至20 mL，采用苯酚-硫酸法進(jìn)行多糖含量的測定。

1.3.2工藝參數(shù)對真姬菇多糖超聲波輔助提取的影響在固定的超聲波功率條件下，設(shè)置一系列料液比（1 ∶10、1 ∶20、1 ∶30、1 ∶40、1 ∶50，g ∶mL）、提取溫度（30、40、50、60、70 ℃）和提取時間（15、30、45、60、75 min）對真姬菇多糖進(jìn)行提取，以探索這3個因素對真姬菇多糖提取效果的影響，每個處理重復(fù)3次。

1.3.3真姬菇多糖超聲波輔助提取工藝條件優(yōu)化本研究在探討了料液比、提取溫度、提取時間等因素對真姬菇多糖提取效果的影響后，進(jìn)一步對每個因素分別選取3個水平，采用L9（34）正交表進(jìn)行正交試驗，以對真姬菇多糖超聲波輔助提取的工藝條件進(jìn)行優(yōu)化，正交試驗的因素和水平如表1所示。

3結(jié)論

本研究通過單因素試驗探討了料液比、提取溫度、提取時間等因素對真姬菇多糖超聲波輔助提取效果的影響，并在此基礎(chǔ)上采用正交設(shè)計對真姬菇多糖的超聲波輔助提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明，在固定超聲功率為200 W、料液比 1 g ∶40 mL、提取溫度60 ℃、提取時間60 min的條件下，真姬菇多糖提取得率最高，可達(dá)5.68%。本研究還進(jìn)一步采用自由基體外清除試驗對真姬菇粗多糖的抗氧化活性進(jìn)行了初步探討。結(jié)果表明，真姬菇粗多糖對DPPH·自由基和ABTS·+自由基均表現(xiàn)出較好的體外清除效果，當(dāng)濃度為 1.0 mg/mL 時，其自由基清除能力與濃度為80 μmol/L的維生素C相當(dāng)。本研究結(jié)果可為我國真姬菇資源的開發(fā)和利用提供一定的基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)：

[1]孫培龍，魏紅福，楊開，等. 真姬菇研究進(jìn)展[J]. 食品科技，2005（9）：54-57.

[2]李順峰，劉興華，張麗華，等. 真姬菇子實體多糖的提取工藝優(yōu)化[J]. 農(nóng)業(yè)工程學(xué)報，2008，24（2）：281-284.

[3]周國英，蘭貴紅，何小燕. 食用菌多糖研究開發(fā)進(jìn)展[J]. 實用預(yù)防醫(yī)學(xué)，2004，11（1）：203-204.

[4]王麗霞，杜德清. 食用菌多糖研究進(jìn)展[J]. 浙江林業(yè)科技，2005，25（5）：49-53，56.

[5]羅登宏. 超聲波輔助提取金針菇多糖工藝參數(shù)優(yōu)化研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010（2）：316-317.

[6]史碧波，王雪波，羅曉妙. 超聲波輔助提取雞油菌多糖的研究[J]. 食品與機械，2012，28（2）：152-154，218.

[7]樊懿娜，趙婷，周葉，等. 苯酚-硫酸法測定灰樹花中多糖含量的研究[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（25）：15256-15257.

[8]Faller A L K，F(xiàn)ialho E. Polyphenol content and antioxidant capacity in organic and conventional plant foods[J]. Journal of Food Composition and Analysis，2010，23（6）：561-568.

[9]熊建華，閔嗣璠，董開發(fā)，等. 南瓜不同部位抗氧化活性的比較[J]. 食品研究與開發(fā)，2011，32（11）：135-138.

[10]秦秀麗，李鳳林. 超聲波法提取蛹蟲草多糖的工藝研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（5）：378-380.endprint