蓖麻花藥愈傷組織誘導及防褐化研究

陳永勝等

摘要：通過改變花藥接種前的預處理、培養條件，建立了高效蓖麻花藥愈傷誘導體系，結果表明：以通蓖5號為試材，4 ℃預處理3 d，維生素C浸泡1.5 h，培養基中添加活性炭0.6 g/L、維生素C 200 mg/L，暗培養15 d可獲得高誘導率、低褐化率的蓖麻花藥愈傷組織。

關鍵詞：蓖麻；花藥；誘導愈傷；防褐化

中圖分類號： S565.604.3 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2014）03-0039-02

蓖麻（Ricinus communis L.）為多年或一年生雙子葉植物，多用于航空航天、化工、醫藥等行業，應用價值高、市場潛力大[1]。我國是蓖麻種植大國，但蓖麻新品種的開發一直局限于雜交、選擇等傳統育種方式，沒有將現代育種技術應用于蓖麻育種[2]。花藥培養可獲得蓖麻育種上廣泛應用的純系品種，但較低的蓖麻花藥愈傷誘導率、高褐化率一直是限制蓖麻花藥離體培養的主要限制性因素。外植體培養過程中褐化的原因很多，機理較為復雜，多認為是培養條件、細胞死亡或是細胞中的酚類物質變質等因素導致[3]。本研究通過接種不同基因型、維生素C浸泡、改變培養條件（暗培養、添加防褐物），探索適宜蓖麻花藥培養的最適條件，以期有效提高誘導率、降低褐化率，建立高效蓖麻花藥愈傷誘導體系。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

哲蓖4號、通蓖5號、通蓖9號蓖麻花藥，采自內蒙古民族大學試驗農場。在溫度較低、日照較弱時，取健壯無病的植株上花被尚未張開且呈淡黃色的花蕾。

1.2 試驗方法

1.2.1 材料準備 本研究根據黃鳳蘭等研究[4]，取同時期、質優的花蕾，流水沖洗30 min，75%乙醇消毒30 s、0.1%HgCl2滅菌2 min，無菌水沖洗3～5次，轉移至鋪有滅菌濾紙的培養皿。去除花絲，每瓶接種1/3個花蕾（約230個），封口后置于培養室培養。在以下的試驗設計中，每個處理接種5瓶，3次重復。基礎培養基：MS+蔗糖40 g/L+瓊脂7 g/L+脯氨酸600 mg/L+酸性水解酪蛋白600 mg/L+NAA 1.0 mg/L+ZT 3.0 mg/L，pH值=6.0。

1.2.2 蓖麻花藥誘導愈傷防褐化體系篩選

1.2.2.1 不同基因型及低溫預處理愈傷誘導率和褐化率 取哲蓖4號、通蓖5號、通蓖9號花藥，在相同培養條件下篩選最佳花藥愈傷誘導基因型，并統計花藥低溫預處理1、3、5、7、9 d時的誘導率及褐化率。

1.2.2.2 暗處理對愈傷組織誘導的影響 以通蓖5號花藥為材料，接種后暗處理0、5、10、15、20 d，統計花藥愈傷誘導率及褐化率。

1.2.2.3 維生素C浸泡處理對愈傷組織誘導的影響 以通蓖5號花藥為材料，置于100 mg/L 維生素C中分別浸泡0、0.5、1.0、1.5、2.0、4.0 h，統計蓖麻花藥愈傷組織的誘導率與褐化率。

1.2.2.4 防褐附加物對愈傷組織誘導的影響 以通蓖5號花藥為材料，分別接種于添加不同濃度活性炭 （0、0.3、0.6、0.9、1.2 g/L）和維生素C （0、100、150、200、250 mg/L）的培養基中，統計誘導率及褐化率。

2 結果與分析

2.1 不同基因型及低溫預處理愈傷誘導率和褐化率

從表1可知，3個基因型的愈傷誘導率均隨著低溫預處理時間的增加呈先增后減的趨勢，褐化率均呈先減后增的趨勢，且均在低溫處理3d時褐化率最低。褐化具有一定的傳播性，故選擇褐化率最低、誘導率最高的最適基因型。綜合表1可知，愈傷組織的褐化率與基因型差異相關，通蓖5號在低溫預處理3 d時褐化率最低（3.20%），且此時3個基因型中通蓖5號愈傷誘導率也最高（15.94%）。

2.2 暗處理對愈傷組織誘導的影響

如表2所示，花藥愈傷誘導率隨暗處理時間的增加有所提高，愈傷褐化率隨時間的增加先減后增，且在暗處理15 d時愈傷誘導率達到最大值、褐化率達到最小值。

2.3 維生素C浸泡處理對愈傷組織誘導的影響

如表3所示，維生素C浸泡處理顯著提高了花藥愈傷誘導率，褐化率隨著時間的增加呈先減后增的趨勢。浸泡1.5 h時誘導率最高（28.56%）、褐化率最低（7.42%）。

2.4 防褐附加物對愈傷組織誘導的影響

由表4可知，隨著活性炭量的增加，誘導率呈先升后降的趨勢，褐化率呈先降后升的趨勢，且濃度為0.6 g/L時誘導率最高（32.83%）、褐化率最低（11.28%）。培養基中添加維生素C后，誘導率及褐化率與添加活性炭的變化幾乎一致，且濃度為200 mg/L時獲得最大花藥愈傷誘導率（27.32%）、最小褐化率（8.21%）。蓖麻花藥愈傷誘導過程見圖1。

3 討論

組織培養過程中，外植體可能由于內分泌紊亂等原因分泌出酚等不利于組織生長、乃至影響存活的有害成分，導致組織褐化或死亡。故需在不影響愈傷誘導率的前提下，通過改變培養環境等因素建立高質量愈傷誘導體系。組織離體培養過程中不同基因型愈傷誘導的能力存在差異，有些組織較難形成愈傷[5]。本研究分析了通蓖5號、哲蓖4號、通蓖9號的愈傷誘導差異，結果與邵志敏等所分析的結果[6]一致，通蓖5號的誘導率及防褐能力均要高于其他2個品種，且4 ℃遇冷可以有效地降低蓖麻花藥愈傷的褐化率。

本研究又通過篩選不同的暗處理和維生素C浸泡時間、添加不同濃度的防褐物（活性炭、維生素C），有效地提高了誘導率、降低了褐化率，成功地建立了高效蓖麻花藥愈傷誘導體系。這與很多研究成果均不謀而合。雷攀登等發現10 ℃下避光離體培養茶樹腋芽48 h時褐變率最低[7]。張文娥等使用維生素C 5 g/L浸泡碧桃莖段30 min能有效抑制碧桃褐化[8]，這與本研究采用維生素C浸泡的效果相近。呂宗友等發現適當添加活性炭、維生素C均能不同程度地提高愈傷誘導率和降低褐化率[9]。韋鳳娟等發現添加維生素C、PVP、活性炭可有效控制外植體褐化現象[10]。鄭穎等發現添加活性炭3 g/L可以將臺灣榿木組織培養的褐化率控制在36.7%～45.6%[11]。蓖麻花藥離體培養的影響因素很多，與其他植物花藥或是其余部位的誘導率相比還較低，還需要進一步完善，以建立高效蓖麻花藥再生體系，為培育高產高效的蓖麻良種奠定基礎。

參考文獻：

[1]鄭 鷺，祁建民，陳紹軍，等. 蓖麻遺傳育種進展及其在生物能源與醫藥綜合利用潛勢[J]. 中國農學通報，2006，22（9）：109-113.

[2]曾祥艷，王東雪，馬錦林. 我國蓖麻良種選育研究現狀及發展策略[J]. 廣西熱帶農業，2010，131（6）：27-29.

[3]楊亞萍，鄭新強. 茶樹組織培養中的褐化控制研究[J]. 茶葉，2013，39（1）：3-7.

[4]黃鳳蘭，薩日娜，孟凡娟，等. 蓖麻花藥愈傷組織誘導的研究[J]. 作物雜志，2009（6）：59-63.

[5]宋欽虎，郭新梅，裴玉賀，等. 抑制玉米幼胚愈傷組織褐化的研究[J]. 農學學報，2012，2（5）：24-28.

[6]邵志敏，陳永勝，黃鳳蘭，等. 低溫預處理與光照條件對蓖麻花藥愈傷組織誘導的影響[J]. 內蒙古民族大學學報：自然科學版，2012，27（2）：189-193.

[7]雷攀登，吳 瓊，徐奕鼎，等. 茶樹腋芽離體培養中的褐化控制研究[J]. 中國農學通報，2012，28（7）：190-193.

[8]張文娥，潘學軍，楊仕國，等. 碧桃組織培養中褐化及其抑制研究[J]. 貴州農業科學，2009，37（1）：11-12.

[9]呂宗友，蘇衍菁，趙國琦，等. 不同防褐化措施對蘇丹草愈傷誘導以及抗褐化的效果研究[J]. 草業學報，2011，20（3）：174-181.

[10]韋鳳娟，廖克波，楊 梅，等. 擎天樹組培外植體消毒與褐化抑制的研究[J]. 中國農學通報，2011，27（31）：18-22.

[11]鄭 穎，秦紅玫，黎云祥. 臺灣榿木組織培養中污染和褐化的防止[J]. 江蘇農業科學，2013，41（2）：64-65，117.

摘要：通過改變花藥接種前的預處理、培養條件，建立了高效蓖麻花藥愈傷誘導體系，結果表明：以通蓖5號為試材，4 ℃預處理3 d，維生素C浸泡1.5 h，培養基中添加活性炭0.6 g/L、維生素C 200 mg/L，暗培養15 d可獲得高誘導率、低褐化率的蓖麻花藥愈傷組織。

關鍵詞：蓖麻；花藥；誘導愈傷；防褐化

中圖分類號： S565.604.3 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2014）03-0039-02

蓖麻（Ricinus communis L.）為多年或一年生雙子葉植物，多用于航空航天、化工、醫藥等行業，應用價值高、市場潛力大[1]。我國是蓖麻種植大國，但蓖麻新品種的開發一直局限于雜交、選擇等傳統育種方式，沒有將現代育種技術應用于蓖麻育種[2]。花藥培養可獲得蓖麻育種上廣泛應用的純系品種，但較低的蓖麻花藥愈傷誘導率、高褐化率一直是限制蓖麻花藥離體培養的主要限制性因素。外植體培養過程中褐化的原因很多，機理較為復雜，多認為是培養條件、細胞死亡或是細胞中的酚類物質變質等因素導致[3]。本研究通過接種不同基因型、維生素C浸泡、改變培養條件（暗培養、添加防褐物），探索適宜蓖麻花藥培養的最適條件，以期有效提高誘導率、降低褐化率，建立高效蓖麻花藥愈傷誘導體系。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

哲蓖4號、通蓖5號、通蓖9號蓖麻花藥，采自內蒙古民族大學試驗農場。在溫度較低、日照較弱時，取健壯無病的植株上花被尚未張開且呈淡黃色的花蕾。

1.2 試驗方法

1.2.1 材料準備 本研究根據黃鳳蘭等研究[4]，取同時期、質優的花蕾，流水沖洗30 min，75%乙醇消毒30 s、0.1%HgCl2滅菌2 min，無菌水沖洗3～5次，轉移至鋪有滅菌濾紙的培養皿。去除花絲，每瓶接種1/3個花蕾（約230個），封口后置于培養室培養。在以下的試驗設計中，每個處理接種5瓶，3次重復。基礎培養基：MS+蔗糖40 g/L+瓊脂7 g/L+脯氨酸600 mg/L+酸性水解酪蛋白600 mg/L+NAA 1.0 mg/L+ZT 3.0 mg/L，pH值=6.0。

1.2.2 蓖麻花藥誘導愈傷防褐化體系篩選

1.2.2.1 不同基因型及低溫預處理愈傷誘導率和褐化率 取哲蓖4號、通蓖5號、通蓖9號花藥，在相同培養條件下篩選最佳花藥愈傷誘導基因型，并統計花藥低溫預處理1、3、5、7、9 d時的誘導率及褐化率。

1.2.2.2 暗處理對愈傷組織誘導的影響 以通蓖5號花藥為材料，接種后暗處理0、5、10、15、20 d，統計花藥愈傷誘導率及褐化率。

1.2.2.3 維生素C浸泡處理對愈傷組織誘導的影響 以通蓖5號花藥為材料，置于100 mg/L 維生素C中分別浸泡0、0.5、1.0、1.5、2.0、4.0 h，統計蓖麻花藥愈傷組織的誘導率與褐化率。

1.2.2.4 防褐附加物對愈傷組織誘導的影響 以通蓖5號花藥為材料，分別接種于添加不同濃度活性炭 （0、0.3、0.6、0.9、1.2 g/L）和維生素C （0、100、150、200、250 mg/L）的培養基中，統計誘導率及褐化率。

2 結果與分析

2.1 不同基因型及低溫預處理愈傷誘導率和褐化率

從表1可知，3個基因型的愈傷誘導率均隨著低溫預處理時間的增加呈先增后減的趨勢，褐化率均呈先減后增的趨勢，且均在低溫處理3d時褐化率最低。褐化具有一定的傳播性，故選擇褐化率最低、誘導率最高的最適基因型。綜合表1可知，愈傷組織的褐化率與基因型差異相關，通蓖5號在低溫預處理3 d時褐化率最低（3.20%），且此時3個基因型中通蓖5號愈傷誘導率也最高（15.94%）。

2.2 暗處理對愈傷組織誘導的影響

如表2所示，花藥愈傷誘導率隨暗處理時間的增加有所提高，愈傷褐化率隨時間的增加先減后增，且在暗處理15 d時愈傷誘導率達到最大值、褐化率達到最小值。

2.3 維生素C浸泡處理對愈傷組織誘導的影響

如表3所示，維生素C浸泡處理顯著提高了花藥愈傷誘導率，褐化率隨著時間的增加呈先減后增的趨勢。浸泡1.5 h時誘導率最高（28.56%）、褐化率最低（7.42%）。

2.4 防褐附加物對愈傷組織誘導的影響

由表4可知，隨著活性炭量的增加，誘導率呈先升后降的趨勢，褐化率呈先降后升的趨勢，且濃度為0.6 g/L時誘導率最高（32.83%）、褐化率最低（11.28%）。培養基中添加維生素C后，誘導率及褐化率與添加活性炭的變化幾乎一致，且濃度為200 mg/L時獲得最大花藥愈傷誘導率（27.32%）、最小褐化率（8.21%）。蓖麻花藥愈傷誘導過程見圖1。

3 討論

組織培養過程中，外植體可能由于內分泌紊亂等原因分泌出酚等不利于組織生長、乃至影響存活的有害成分，導致組織褐化或死亡。故需在不影響愈傷誘導率的前提下，通過改變培養環境等因素建立高質量愈傷誘導體系。組織離體培養過程中不同基因型愈傷誘導的能力存在差異，有些組織較難形成愈傷[5]。本研究分析了通蓖5號、哲蓖4號、通蓖9號的愈傷誘導差異，結果與邵志敏等所分析的結果[6]一致，通蓖5號的誘導率及防褐能力均要高于其他2個品種，且4 ℃遇冷可以有效地降低蓖麻花藥愈傷的褐化率。

本研究又通過篩選不同的暗處理和維生素C浸泡時間、添加不同濃度的防褐物（活性炭、維生素C），有效地提高了誘導率、降低了褐化率，成功地建立了高效蓖麻花藥愈傷誘導體系。這與很多研究成果均不謀而合。雷攀登等發現10 ℃下避光離體培養茶樹腋芽48 h時褐變率最低[7]。張文娥等使用維生素C 5 g/L浸泡碧桃莖段30 min能有效抑制碧桃褐化[8]，這與本研究采用維生素C浸泡的效果相近。呂宗友等發現適當添加活性炭、維生素C均能不同程度地提高愈傷誘導率和降低褐化率[9]。韋鳳娟等發現添加維生素C、PVP、活性炭可有效控制外植體褐化現象[10]。鄭穎等發現添加活性炭3 g/L可以將臺灣榿木組織培養的褐化率控制在36.7%～45.6%[11]。蓖麻花藥離體培養的影響因素很多，與其他植物花藥或是其余部位的誘導率相比還較低，還需要進一步完善，以建立高效蓖麻花藥再生體系，為培育高產高效的蓖麻良種奠定基礎。

參考文獻：

[1]鄭 鷺，祁建民，陳紹軍，等. 蓖麻遺傳育種進展及其在生物能源與醫藥綜合利用潛勢[J]. 中國農學通報，2006，22（9）：109-113.

[2]曾祥艷，王東雪，馬錦林. 我國蓖麻良種選育研究現狀及發展策略[J]. 廣西熱帶農業，2010，131（6）：27-29.

[3]楊亞萍，鄭新強. 茶樹組織培養中的褐化控制研究[J]. 茶葉，2013，39（1）：3-7.

[4]黃鳳蘭，薩日娜，孟凡娟，等. 蓖麻花藥愈傷組織誘導的研究[J]. 作物雜志，2009（6）：59-63.

[5]宋欽虎，郭新梅，裴玉賀，等. 抑制玉米幼胚愈傷組織褐化的研究[J]. 農學學報，2012，2（5）：24-28.

[6]邵志敏，陳永勝，黃鳳蘭，等. 低溫預處理與光照條件對蓖麻花藥愈傷組織誘導的影響[J]. 內蒙古民族大學學報：自然科學版，2012，27（2）：189-193.

[7]雷攀登，吳 瓊，徐奕鼎，等. 茶樹腋芽離體培養中的褐化控制研究[J]. 中國農學通報，2012，28（7）：190-193.

[8]張文娥，潘學軍，楊仕國，等. 碧桃組織培養中褐化及其抑制研究[J]. 貴州農業科學，2009，37（1）：11-12.

[9]呂宗友，蘇衍菁，趙國琦，等. 不同防褐化措施對蘇丹草愈傷誘導以及抗褐化的效果研究[J]. 草業學報，2011，20（3）：174-181.

[10]韋鳳娟，廖克波，楊 梅，等. 擎天樹組培外植體消毒與褐化抑制的研究[J]. 中國農學通報，2011，27（31）：18-22.

[11]鄭 穎，秦紅玫，黎云祥. 臺灣榿木組織培養中污染和褐化的防止[J]. 江蘇農業科學，2013，41（2）：64-65，117.

摘要：通過改變花藥接種前的預處理、培養條件，建立了高效蓖麻花藥愈傷誘導體系，結果表明：以通蓖5號為試材，4 ℃預處理3 d，維生素C浸泡1.5 h，培養基中添加活性炭0.6 g/L、維生素C 200 mg/L，暗培養15 d可獲得高誘導率、低褐化率的蓖麻花藥愈傷組織。

關鍵詞：蓖麻；花藥；誘導愈傷；防褐化

中圖分類號： S565.604.3 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2014）03-0039-02

蓖麻（Ricinus communis L.）為多年或一年生雙子葉植物，多用于航空航天、化工、醫藥等行業，應用價值高、市場潛力大[1]。我國是蓖麻種植大國，但蓖麻新品種的開發一直局限于雜交、選擇等傳統育種方式，沒有將現代育種技術應用于蓖麻育種[2]。花藥培養可獲得蓖麻育種上廣泛應用的純系品種，但較低的蓖麻花藥愈傷誘導率、高褐化率一直是限制蓖麻花藥離體培養的主要限制性因素。外植體培養過程中褐化的原因很多，機理較為復雜，多認為是培養條件、細胞死亡或是細胞中的酚類物質變質等因素導致[3]。本研究通過接種不同基因型、維生素C浸泡、改變培養條件（暗培養、添加防褐物），探索適宜蓖麻花藥培養的最適條件，以期有效提高誘導率、降低褐化率，建立高效蓖麻花藥愈傷誘導體系。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

哲蓖4號、通蓖5號、通蓖9號蓖麻花藥，采自內蒙古民族大學試驗農場。在溫度較低、日照較弱時，取健壯無病的植株上花被尚未張開且呈淡黃色的花蕾。

1.2 試驗方法

1.2.1 材料準備 本研究根據黃鳳蘭等研究[4]，取同時期、質優的花蕾，流水沖洗30 min，75%乙醇消毒30 s、0.1%HgCl2滅菌2 min，無菌水沖洗3～5次，轉移至鋪有滅菌濾紙的培養皿。去除花絲，每瓶接種1/3個花蕾（約230個），封口后置于培養室培養。在以下的試驗設計中，每個處理接種5瓶，3次重復。基礎培養基：MS+蔗糖40 g/L+瓊脂7 g/L+脯氨酸600 mg/L+酸性水解酪蛋白600 mg/L+NAA 1.0 mg/L+ZT 3.0 mg/L，pH值=6.0。

1.2.2 蓖麻花藥誘導愈傷防褐化體系篩選

1.2.2.1 不同基因型及低溫預處理愈傷誘導率和褐化率 取哲蓖4號、通蓖5號、通蓖9號花藥，在相同培養條件下篩選最佳花藥愈傷誘導基因型，并統計花藥低溫預處理1、3、5、7、9 d時的誘導率及褐化率。

1.2.2.2 暗處理對愈傷組織誘導的影響 以通蓖5號花藥為材料，接種后暗處理0、5、10、15、20 d，統計花藥愈傷誘導率及褐化率。

1.2.2.3 維生素C浸泡處理對愈傷組織誘導的影響 以通蓖5號花藥為材料，置于100 mg/L 維生素C中分別浸泡0、0.5、1.0、1.5、2.0、4.0 h，統計蓖麻花藥愈傷組織的誘導率與褐化率。

1.2.2.4 防褐附加物對愈傷組織誘導的影響 以通蓖5號花藥為材料，分別接種于添加不同濃度活性炭 （0、0.3、0.6、0.9、1.2 g/L）和維生素C （0、100、150、200、250 mg/L）的培養基中，統計誘導率及褐化率。

2 結果與分析

2.1 不同基因型及低溫預處理愈傷誘導率和褐化率

從表1可知，3個基因型的愈傷誘導率均隨著低溫預處理時間的增加呈先增后減的趨勢，褐化率均呈先減后增的趨勢，且均在低溫處理3d時褐化率最低。褐化具有一定的傳播性，故選擇褐化率最低、誘導率最高的最適基因型。綜合表1可知，愈傷組織的褐化率與基因型差異相關，通蓖5號在低溫預處理3 d時褐化率最低（3.20%），且此時3個基因型中通蓖5號愈傷誘導率也最高（15.94%）。

2.2 暗處理對愈傷組織誘導的影響

如表2所示，花藥愈傷誘導率隨暗處理時間的增加有所提高，愈傷褐化率隨時間的增加先減后增，且在暗處理15 d時愈傷誘導率達到最大值、褐化率達到最小值。

2.3 維生素C浸泡處理對愈傷組織誘導的影響

如表3所示，維生素C浸泡處理顯著提高了花藥愈傷誘導率，褐化率隨著時間的增加呈先減后增的趨勢。浸泡1.5 h時誘導率最高（28.56%）、褐化率最低（7.42%）。

2.4 防褐附加物對愈傷組織誘導的影響

由表4可知，隨著活性炭量的增加，誘導率呈先升后降的趨勢，褐化率呈先降后升的趨勢，且濃度為0.6 g/L時誘導率最高（32.83%）、褐化率最低（11.28%）。培養基中添加維生素C后，誘導率及褐化率與添加活性炭的變化幾乎一致，且濃度為200 mg/L時獲得最大花藥愈傷誘導率（27.32%）、最小褐化率（8.21%）。蓖麻花藥愈傷誘導過程見圖1。

3 討論

組織培養過程中，外植體可能由于內分泌紊亂等原因分泌出酚等不利于組織生長、乃至影響存活的有害成分，導致組織褐化或死亡。故需在不影響愈傷誘導率的前提下，通過改變培養環境等因素建立高質量愈傷誘導體系。組織離體培養過程中不同基因型愈傷誘導的能力存在差異，有些組織較難形成愈傷[5]。本研究分析了通蓖5號、哲蓖4號、通蓖9號的愈傷誘導差異，結果與邵志敏等所分析的結果[6]一致，通蓖5號的誘導率及防褐能力均要高于其他2個品種，且4 ℃遇冷可以有效地降低蓖麻花藥愈傷的褐化率。

本研究又通過篩選不同的暗處理和維生素C浸泡時間、添加不同濃度的防褐物（活性炭、維生素C），有效地提高了誘導率、降低了褐化率，成功地建立了高效蓖麻花藥愈傷誘導體系。這與很多研究成果均不謀而合。雷攀登等發現10 ℃下避光離體培養茶樹腋芽48 h時褐變率最低[7]。張文娥等使用維生素C 5 g/L浸泡碧桃莖段30 min能有效抑制碧桃褐化[8]，這與本研究采用維生素C浸泡的效果相近。呂宗友等發現適當添加活性炭、維生素C均能不同程度地提高愈傷誘導率和降低褐化率[9]。韋鳳娟等發現添加維生素C、PVP、活性炭可有效控制外植體褐化現象[10]。鄭穎等發現添加活性炭3 g/L可以將臺灣榿木組織培養的褐化率控制在36.7%～45.6%[11]。蓖麻花藥離體培養的影響因素很多，與其他植物花藥或是其余部位的誘導率相比還較低，還需要進一步完善，以建立高效蓖麻花藥再生體系，為培育高產高效的蓖麻良種奠定基礎。

參考文獻：

[1]鄭 鷺，祁建民，陳紹軍，等. 蓖麻遺傳育種進展及其在生物能源與醫藥綜合利用潛勢[J]. 中國農學通報，2006，22（9）：109-113.

[2]曾祥艷，王東雪，馬錦林. 我國蓖麻良種選育研究現狀及發展策略[J]. 廣西熱帶農業，2010，131（6）：27-29.

[3]楊亞萍，鄭新強. 茶樹組織培養中的褐化控制研究[J]. 茶葉，2013，39（1）：3-7.

[4]黃鳳蘭，薩日娜，孟凡娟，等. 蓖麻花藥愈傷組織誘導的研究[J]. 作物雜志，2009（6）：59-63.

[5]宋欽虎，郭新梅，裴玉賀，等. 抑制玉米幼胚愈傷組織褐化的研究[J]. 農學學報，2012，2（5）：24-28.

[6]邵志敏，陳永勝，黃鳳蘭，等. 低溫預處理與光照條件對蓖麻花藥愈傷組織誘導的影響[J]. 內蒙古民族大學學報：自然科學版，2012，27（2）：189-193.

[7]雷攀登，吳 瓊，徐奕鼎，等. 茶樹腋芽離體培養中的褐化控制研究[J]. 中國農學通報，2012，28（7）：190-193.

[8]張文娥，潘學軍，楊仕國，等. 碧桃組織培養中褐化及其抑制研究[J]. 貴州農業科學，2009，37（1）：11-12.

[9]呂宗友，蘇衍菁，趙國琦，等. 不同防褐化措施對蘇丹草愈傷誘導以及抗褐化的效果研究[J]. 草業學報，2011，20（3）：174-181.

[10]韋鳳娟，廖克波，楊 梅，等. 擎天樹組培外植體消毒與褐化抑制的研究[J]. 中國農學通報，2011，27（31）：18-22.

[11]鄭 穎，秦紅玫，黎云祥. 臺灣榿木組織培養中污染和褐化的防止[J]. 江蘇農業科學，2013，41（2）：64-65，117.