民族藥地桃花根皮及葉總三萜含量測定

何可群　李相興

摘要：以齊墩果酸為對照品，用超聲輔助提取法、紫外分光光度法測定了地桃花根皮及葉的總三萜含量，結果表明：地桃花根皮、葉中總三萜的相對百分含量分別為3.682%、9.297%，精密度試驗RSD分別為1.79%、2.08%；齊墩果酸對照品在0～100 μg/mL范圍有良好的線性關系，回歸方程為y=0.011 3x-0.017 7，相關系數r2=0.999 1。該方法操作簡便、結果可靠，能為地桃花藥用價值的開發及擴大資源利用提供科學的依據。

關鍵詞：地桃花；總三萜；含量；測定

中圖分類號： R284.1 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2014）03-0258-02

地桃花（Urena lobata L.）是錦葵科梵天花屬多年生亞灌木狀草本植物，別稱肖梵天花、野桃花、野棉花、土黃芪、大迷馬樁棵等[1-4]，分布于我國長江以南各省區[4]。地桃花根或全株均可入藥，具有清熱解毒、祛風利濕、益氣補虛、活血消腫的功效，主治感冒、風濕痹痛、腎炎水腫、帶下、淋病、瘧疾、痢疾、乳腺炎、外傷出血等，是我國西南地區少數民族習用草藥[1-5]。目前的研究表明：地桃花的化學成分主要為氨基酸和蛋白質、糖類、黃酮類、甾醇、鞣質、酚類、有機酸、皂苷等[4-7]。陳勇等的研究表明地桃花水提液在體外對金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、肺炎鏈球菌、銅綠假單胞菌和普通變形桿菌均有一定的抑菌活性[8]。國內外還未見有關地桃花總三萜測定的研究報道，本試驗對地桃花根皮及葉的總三萜含量進行研究，以便為該民族藥的進一步開發和擴大資源利用提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 材料 地桃花樣品，采自云南省云龍縣，標本保存于貴州民族大學化學與環境科學學院藥學教研室。

1.1.2 儀器 756PC紫外-可見分光光度計（上海舜宇恒平科學儀器有限公司），METTLERAE240電子分析天平（上海天平儀器廠），BGZ-30電熱鼓風干燥箱（上海博迅實業有限公司醫療設備廠），SG3200HE超聲清洗儀（上海冠特超聲儀器有限公司），數顯恒溫水浴鍋（常州博遠試驗分析儀器有限公司）。

1.1.3 試劑 無水乙醇、冰醋酸、高氯酸、香草醛均為分析純，齊墩果酸對照品購自貴州迪大科技有限責任公司（純度≥98%，批號：84650-60-2）。

1.2 試驗方法

1.2.1 地桃花總三萜的提取方法 將曬干的地桃花根皮及葉在電熱鼓風干燥箱中于（60±1） ℃烘干5 h，分別精確稱取干燥、粉碎（過40目篩）的地桃花根皮、葉粉末各2.000 g，按 1 g ∶ 20 mL 的固液比用無水乙醇浸泡、超聲提取2次。提取條件：時間60 min，超聲頻率40 kHz，功率150 W。提取結束后，合并提取液，過濾，冷卻，用無水乙醇定容至100 mL，搖勻備用[9-11]。

1.2.2 標準溶液的制備及測定波長的選擇[12-13] （1）標準溶液的制備。精確稱取65 ℃干燥至恒重的齊墩果酸 20.00 mg，置100 mL容量瓶中，加無水乙醇適量使其溶解以無水乙醇定容、搖勻，每1 mL溶液含齊墩果酸200 μg。（2）測定波長的選擇。分別精確吸取齊墩果酸標準溶液（200 μg/mL）、地桃花根皮、葉提取液各1.00 mL，分別置于3支10 mL比色管中，于85 ℃揮發干溶劑，冷卻，分別精確加入5%香草醛-冰醋酸0.500 mL，再分別加入高氯酸1.00 mL，搖勻，于70 ℃水浴中反應20 min，取出，在冰水浴中冷卻，用冰醋酸稀釋至刻度，搖勻，靜置5 min。以試劑空白建立基線，在400～700 nm波長范圍進行波長掃描，得到齊墩果酸和地桃花根皮、葉提取液顯色后的吸收光譜，以確定最大吸收波長。

1.2.3 齊墩果酸標準曲線的繪制 精確吸取質量濃度 200 μg/mL 的齊墩果酸標準溶液0、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL 分別置于6支10 mL比色管中，測定波長的選擇操作同“1.2.2”節，以試劑空白為參比，于540 nm波長下測定吸光度D540 nm，以吸光度為縱坐標、顯色液中齊墩果酸的質量濃度C（μg/mL） 為橫坐標，繪制標準曲線[12-13]。

1.2.4 樣品測定 精確量取“1.2.1”節操作后所得地桃花根皮、葉乙醇提取液各1.00 mL，分別置于10 mL比色管中，測定波長的選擇操作同“1.2.2”節，于540 nm波長下測得地桃花根皮、葉提取液的吸光度D540 nm，代入回歸方程得地桃花根皮、葉的總三萜類化合物以齊墩果酸計算的質量濃度C（μg/mL），換算為干燥藥材中總三萜酸的含量[12-13]。

1.2.5 重復性試驗 精確稱取地桃花根皮、葉樣品各5份，按含量測定方法進行測定，計算平均含量及RSD值。

1.2.6 加標回收試驗 精確量取地桃花根皮乙醇提取液 1.00 mL 5份，再分別精確加入齊墩果酸標準溶液（濃度為 200 μg/mL）1.00mL，按樣品含量測定方法進行測定，計算加標回收率及RSD值。

2 結果與分析

2.1 測定波長的選擇

由“1.2.2”節的試驗結果可知齊墩果酸、地桃花根皮、葉提取液顯色后在540 nm處均有最大吸收，故以540 nm作為總三萜的測定波長。

2.2 標準曲線

于540 nm波長下測定齊墩果酸標準溶液系列的吸光度D540 nm，以吸光度為縱坐標、顯色液中齊墩果酸的質量濃度C（μg/mL） 為橫坐標，繪制標準曲線（圖1），經回歸處理得方程：y=0.011 3x-0.017 7，相關系數：r2=0.999 1，齊墩果酸濃度在0～100 g/mL范圍內吸光度與質量濃度線性關系良好。endprint

2.3 樣品總三萜含量的測定

由表1可知，地桃花根皮、葉樣品中總三萜的平均含量分別為3.682%、9.297%，重復性試驗RSD分別為1.79%和208%，精密度高。

2.4 加標回收率

由表2可知，加標回收率在96.29%～98.39%，RSD為0.880%，說明本試驗所采用的方法適用于地桃花樣品中總三萜含量的測定。

3 結論

地桃花是我國西南地區白族、納西族、侗族等多個少數民族民間草藥，目前其資源還未得到有效的開發利用。本試驗首次對地桃花根皮、葉的總三萜含量進行研究，結果表明地桃花干燥根皮、葉總三萜含量分別為3.682%、9.297%，為該民族藥的藥用價值開發及擴大資源利用提供了一定的科學依據。

參考文獻：

[1]云南省衛生廳. 云南中草藥[M]. 昆明：云南人民出版社，1971：700-701.

[2]大理白族自治州人民政府. 大理中藥資源志[M]. 昆明：云南民族出版社，1991：222.

[3]劉 毅，陳羲之. 云南常用中草藥單驗方薈萃[M]. 昆明：云南科技出版社，2010：87.

[4]左經會. 六盤水藥用植物[M]. 北京：科學出版社，2013：138-139.

[5]云南藥物研究所. 云南天然藥物圖鑒[M]. 昆明：云南科技出版社，2004：162.

[6]賈 陸，畢躍峰，敬林林，等. 地桃花化學成分研究[J]. 中國藥學雜志，2010，45（14）：1054-1056.

[7]謝 臻，陳 勇，唐春麗，等. 地桃花化學成分研究進展[J]. 廣西中醫學院學報，2011，14（1）：70-71.

[8]陳 勇，謝 臻，韋 韜，等. 地桃花水提物的體外抗菌試驗研究[J]. 亞太傳統醫藥，2011，7（10）：29-30.

[9]劉玉明，柴逸峰，婁子洋，等. 分光光度法測定藍桉果實總三萜酸[J]. 中國醫院藥學雜志，2005，25（1）：4-6.

[10]袁 媛，楊 毅，開桂青，等. 靈芝三萜提取工藝研究[J]. 安徽化工，2007，33（4）：27-29.

[11]張雁冰，王克讓，劉宏民. 馬桑葉中總三萜酸的含量測定[J]. 時珍國醫國藥，2006，17（4）：529-530.

[12]蔡亞玲，阮金蘭，蘇 群，等. 紫背鼠尾草中總三萜酸的含量測定[J]. 中藥材，2008，31（5）：692-693.

[13]易中宏，鄭一敏，胥秀英，等. 分光光度法測定茯苓中總三萜類成分的含量[J]. 時珍國醫國藥，2005，16（9）：847-848.endprint

2.3 樣品總三萜含量的測定

由表1可知，地桃花根皮、葉樣品中總三萜的平均含量分別為3.682%、9.297%，重復性試驗RSD分別為1.79%和208%，精密度高。

2.4 加標回收率

由表2可知，加標回收率在96.29%～98.39%，RSD為0.880%，說明本試驗所采用的方法適用于地桃花樣品中總三萜含量的測定。

3 結論

地桃花是我國西南地區白族、納西族、侗族等多個少數民族民間草藥，目前其資源還未得到有效的開發利用。本試驗首次對地桃花根皮、葉的總三萜含量進行研究，結果表明地桃花干燥根皮、葉總三萜含量分別為3.682%、9.297%，為該民族藥的藥用價值開發及擴大資源利用提供了一定的科學依據。

參考文獻：

[1]云南省衛生廳. 云南中草藥[M]. 昆明：云南人民出版社，1971：700-701.

[2]大理白族自治州人民政府. 大理中藥資源志[M]. 昆明：云南民族出版社，1991：222.

[3]劉 毅，陳羲之. 云南常用中草藥單驗方薈萃[M]. 昆明：云南科技出版社，2010：87.

[4]左經會. 六盤水藥用植物[M]. 北京：科學出版社，2013：138-139.

[5]云南藥物研究所. 云南天然藥物圖鑒[M]. 昆明：云南科技出版社，2004：162.

[6]賈 陸，畢躍峰，敬林林，等. 地桃花化學成分研究[J]. 中國藥學雜志，2010，45（14）：1054-1056.

[7]謝 臻，陳 勇，唐春麗，等. 地桃花化學成分研究進展[J]. 廣西中醫學院學報，2011，14（1）：70-71.

[8]陳 勇，謝 臻，韋 韜，等. 地桃花水提物的體外抗菌試驗研究[J]. 亞太傳統醫藥，2011，7（10）：29-30.

[9]劉玉明，柴逸峰，婁子洋，等. 分光光度法測定藍桉果實總三萜酸[J]. 中國醫院藥學雜志，2005，25（1）：4-6.

[10]袁 媛，楊 毅，開桂青，等. 靈芝三萜提取工藝研究[J]. 安徽化工，2007，33（4）：27-29.

[11]張雁冰，王克讓，劉宏民. 馬桑葉中總三萜酸的含量測定[J]. 時珍國醫國藥，2006，17（4）：529-530.

[12]蔡亞玲，阮金蘭，蘇 群，等. 紫背鼠尾草中總三萜酸的含量測定[J]. 中藥材，2008，31（5）：692-693.

[13]易中宏，鄭一敏，胥秀英，等. 分光光度法測定茯苓中總三萜類成分的含量[J]. 時珍國醫國藥，2005，16（9）：847-848.endprint

2.3 樣品總三萜含量的測定

由表1可知，地桃花根皮、葉樣品中總三萜的平均含量分別為3.682%、9.297%，重復性試驗RSD分別為1.79%和208%，精密度高。

2.4 加標回收率

由表2可知，加標回收率在96.29%～98.39%，RSD為0.880%，說明本試驗所采用的方法適用于地桃花樣品中總三萜含量的測定。

3 結論

地桃花是我國西南地區白族、納西族、侗族等多個少數民族民間草藥，目前其資源還未得到有效的開發利用。本試驗首次對地桃花根皮、葉的總三萜含量進行研究，結果表明地桃花干燥根皮、葉總三萜含量分別為3.682%、9.297%，為該民族藥的藥用價值開發及擴大資源利用提供了一定的科學依據。

參考文獻：

[1]云南省衛生廳. 云南中草藥[M]. 昆明：云南人民出版社，1971：700-701.

[2]大理白族自治州人民政府. 大理中藥資源志[M]. 昆明：云南民族出版社，1991：222.

[3]劉 毅，陳羲之. 云南常用中草藥單驗方薈萃[M]. 昆明：云南科技出版社，2010：87.

[4]左經會. 六盤水藥用植物[M]. 北京：科學出版社，2013：138-139.

[5]云南藥物研究所. 云南天然藥物圖鑒[M]. 昆明：云南科技出版社，2004：162.

[6]賈 陸，畢躍峰，敬林林，等. 地桃花化學成分研究[J]. 中國藥學雜志，2010，45（14）：1054-1056.

[7]謝 臻，陳 勇，唐春麗，等. 地桃花化學成分研究進展[J]. 廣西中醫學院學報，2011，14（1）：70-71.

[8]陳 勇，謝 臻，韋 韜，等. 地桃花水提物的體外抗菌試驗研究[J]. 亞太傳統醫藥，2011，7（10）：29-30.

[9]劉玉明，柴逸峰，婁子洋，等. 分光光度法測定藍桉果實總三萜酸[J]. 中國醫院藥學雜志，2005，25（1）：4-6.

[10]袁 媛，楊 毅，開桂青，等. 靈芝三萜提取工藝研究[J]. 安徽化工，2007，33（4）：27-29.

[11]張雁冰，王克讓，劉宏民. 馬桑葉中總三萜酸的含量測定[J]. 時珍國醫國藥，2006，17（4）：529-530.

[12]蔡亞玲，阮金蘭，蘇 群，等. 紫背鼠尾草中總三萜酸的含量測定[J]. 中藥材，2008，31（5）：692-693.

[13]易中宏，鄭一敏，胥秀英，等. 分光光度法測定茯苓中總三萜類成分的含量[J]. 時珍國醫國藥，2005，16（9）：847-848.endprint