核桃青皮中胡桃醌的提取工藝

魏赫楠+譚紅+包娜+李占彬+袁鑫+李青+何錦林

摘要：為充分利用核桃青皮資源，研究提取溶劑、提取時間、提取溫度、固液比、超聲時間對胡桃醌提取效果的影響，以正交試驗對超聲輔助溶劑提取核桃青皮中胡桃醌提取工藝進行探討。最終得到超聲波輔助提取的最佳工藝組合為：提取溶劑為無水乙醇，在常溫下提取8 h，固液比1 g ∶10 mL，超聲時間40 min。在此條件下得到的胡桃醌得率為0006 703%。

關鍵詞：核桃青皮；胡桃醌；提取工藝；正交試驗

中圖分類號： R284.2文獻標志碼： A文章編號：1002-1302（2014）02-0215-02

收稿日期：2013-07-10

基金項目：貴州省林業廳項目（編號：黔林科合[2012]18 號）；國家國際科技合作專項（編號：2011DFB41640）。

作者簡介：魏赫楠（1989—），女，河北石家莊人，碩士研究生，研究方向為化學工藝及資源綜合利用。E-mail：whn1011070223@163.com。 核桃青皮是核桃鮮果外部的一層厚厚的綠色果皮。我國傳統中藥及臨床上有用核桃青皮來治療胃痛、胃潰瘍、皮膚病以及子宮脫落等疾病的記載[1]。核桃成熟期間，大量核桃青皮堆放于田間，造成環境污染[2]。已有研究表明，從核桃青皮中提取的有效成分有萘醌類、多酚類、多糖、二芳基庚烷類等[3]，在核桃楸樹皮[2]和青龍衣[3]中也提取到了胡桃醌，但是報道較少。目前，天然產物中活性成分的提取方法主要有溶劑提取法、微波萃取法、超聲提取法、升華法、水蒸氣蒸餾法、壓榨法、超臨界流體提取法等[4-7]。本試驗采用超聲輔助溶劑提取核桃青皮中的胡桃醌，在超聲波的細胞破碎作用下可以將細胞中的胡桃醌充分釋放并溶于提取劑中，最終達到提高產品質量和產率的作用。本研究以胡桃醌含量為評價指標，對其在核桃青皮中的提取方法及工藝進行研究，旨在為核桃青皮的充分利用及藥用價值提供依據。

1材料與方法

1.1材料與試劑

核桃鮮果（貴州赫章）。蕓香苷，色譜純，美國Sigma公司；甲醇，色譜純，美國Tedia公司；磷酸、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、無水乙醇、硝酸鋁、濃鹽酸、三氯甲烷、亞硝酸鈉、氫氧化鈉，分析純。

1.2儀器

PHS-3C型精密pH計（上海精密科學儀器有限公司）；XS-20B多功能粉碎機（上海兆申科技有限公司）；ALC-1104電子天平（北京賽多利公司醫療設備廠）；THS-10智能型超級恒溫水浴鍋（浙江寧波天恒儀器廠）；H-1850R型臺式高速冷凍離心機（湖南長沙湘儀離心機儀器有限公司）；Agilent1100高效液相色譜儀（美國Agilent公司）；超聲提取儀（上海科導超聲儀器有限公司）。

1.3原料的預處理

將核桃鮮果進行稱重，手工剝皮，將剝皮得到的核桃青皮再次稱重。用恒溫干燥箱在40 ℃以下進行干燥，再將干燥以后的核桃青皮用中藥粉碎機進行粉碎，棄去過大的顆粒，即得試驗所需的原料。

1.4胡桃醌的提取工藝流程

稱取核桃青皮粉10 g，并加入50 L溶劑浸泡8 h，然后再超聲提取40 min，離心提取液；將殘渣繼續加入10倍量的溶劑進行提取，在同樣的條件下超聲提取40 min，離心提取液；藥渣棄掉，合并2次的提取液，然后用旋轉蒸發儀進行減壓濃縮（溫度不超過40 ℃）至干。

1.5胡桃醌含量的測定

胡桃醌得率的計算公式為：

胡桃醌得率=胡桃醌重量（g）原料重量（g）×100%。

1.6單因素試驗

浸提時間為2、4、6、8、10 h，浸提溫度為20、30、40、50、60、70 ℃，固液比為1 g ∶5 mL、1 g ∶7 mL、1 g ∶10 mL、1 g ∶12 mL、1 g ∶15 mL，超聲時間為10、20、30、40、50 min，所有試驗提取 1次，進行單因素試驗，根據胡桃醌得率選擇合適的提取時間、提取溫度、固液比、超聲時間進行正交試驗。

1.7正交試驗

在單因素試驗選出的浸提時間、浸提溫度、固液比、超聲時間條件下進行正交試驗，因為提取溫度在常溫區間對提取的胡桃醌得率影響不大，所以選取提取時間、固液比和超聲時間作為正交試驗的3個因素，進行L9（33）正交試驗，因素水平如表1所示。

2結果與分析

2.1浸提時間對胡桃醌含量的影響

從圖1可以看出，隨著提取時間的延長，胡桃醌得率逐漸升高，這是由于隨著提取時間的延長，溶劑與核桃青皮粉充分接觸，因而越來越多的胡桃醌溶解到提取溶劑之中。但當提取時間超過8 h后，由于大部分的胡桃醌已被提取出來，所以胡桃醌得率的升高趨勢不明顯。因此，提取時間宜為8 h。

2.2浸提溫度對胡桃醌含量的影響

從圖2可以看出，當提取溫度低于50 ℃時，胡桃醌得率沒有明顯的變化；而當提取溫度高于50 ℃時，胡桃醌得率明顯下降。這是因為胡桃醌隨著提取溫度的升高會隨水蒸氣升華，從而使胡桃醌得率下降。常溫對胡桃醌含量影響并不大，考慮到節約成本的因素，因此提取溫度宜選擇常溫。

2.3固液比對胡桃醌含量的影響

從圖3可以看出，隨著提取劑用量的增加，胡桃醌得率逐漸增加，當固液比在1 g ∶5～10 mL范圍內時，胡桃醌得率上升較快；但當固液比低于1 g ∶10 mL時，胡桃醌得率增長趨勢比較平緩，基本持平。因此，考慮到降低生產成本，固液比宜選擇1 g ∶10 mL。

2.4超聲時間對胡桃醌含量的影響

從圖4可以看出，當超聲時間在10～40 min范圍內時，胡桃醌得率逐漸增加，這是因為隨著超聲時間的延長，超聲波對底物產生的攪拌和空化作用增強，進而使溶出物質增多；而當時間超過40 min后，胡桃醌得率反而下降，這可能是持續的超聲波作用使已經溶出的胡桃醌分子結構遭到破壞，使胡桃醌得率下降。因此，超聲時間宜選擇40 min。

2.5正交試驗優選最佳工藝組合

根據L9（33）正交試驗原理進行核桃青皮中胡桃醌提取的正交試驗，以確定最佳的提取工藝條件。試驗結果及數據處理如表2所示。

3結論

對核桃青皮中胡桃醌提取工藝的影響因素進行單因素試

驗，再根據單因素試驗結果設計正交試驗，最終確定超聲波輔助提取的最佳提取工藝為：在常溫下提取時間8 h、固液比 1 g ∶10 mL、超聲時間40 min。在此條件下得到的胡桃醌得率為0.006 703%，為提取核桃青皮中的胡桃醌提供了較為科學、合理的理論依據。

參考文獻：

[1]江蘇新醫學院.中藥大辭典[M]. 上海：上海科學技術出版社，2005.

[2]趙巖，劉淑萍，呂朝霞. 核桃青皮的化學成分與綜合利用[J]. 農產品加工，2008（11）：66-68.

[3]李海洋，韓軍岐，李志西. 核桃青皮有效化學成分提取分離研究綜述[J]. 現代園藝，2012（15）：9-11.

[4]Toma M，Vinatoru M，Paniwnyk L，et al. Investigation of the effects of ultrasound on vegetal tissues during solvent extraction[J]. Ultrasonics Sonochemistry，2001，8（2）：137-142.

[5]徐懷德. 天然產物提取工藝學[M]. 北京：中國輕工業出版社，2006.

[6]陳尚钘，劉誠，范國榮，等.天然產物中活性成分提取分離及分析技術[J]. 江西林業科技，2005（3）：32-36.

[7]Vinatoru M，Toma M，Radu O，et al. The use of ultrasound for the extraction of bioactive principles from plant materials[J]. Ultrasonics Sonochemistry，1997，4（2）：135-139.endprint

摘要：為充分利用核桃青皮資源，研究提取溶劑、提取時間、提取溫度、固液比、超聲時間對胡桃醌提取效果的影響，以正交試驗對超聲輔助溶劑提取核桃青皮中胡桃醌提取工藝進行探討。最終得到超聲波輔助提取的最佳工藝組合為：提取溶劑為無水乙醇，在常溫下提取8 h，固液比1 g ∶10 mL，超聲時間40 min。在此條件下得到的胡桃醌得率為0006 703%。

關鍵詞：核桃青皮；胡桃醌；提取工藝；正交試驗

中圖分類號： R284.2文獻標志碼： A文章編號：1002-1302（2014）02-0215-02

收稿日期：2013-07-10

基金項目：貴州省林業廳項目（編號：黔林科合[2012]18 號）；國家國際科技合作專項（編號：2011DFB41640）。

作者簡介：魏赫楠（1989—），女，河北石家莊人，碩士研究生，研究方向為化學工藝及資源綜合利用。E-mail：whn1011070223@163.com。 核桃青皮是核桃鮮果外部的一層厚厚的綠色果皮。我國傳統中藥及臨床上有用核桃青皮來治療胃痛、胃潰瘍、皮膚病以及子宮脫落等疾病的記載[1]。核桃成熟期間，大量核桃青皮堆放于田間，造成環境污染[2]。已有研究表明，從核桃青皮中提取的有效成分有萘醌類、多酚類、多糖、二芳基庚烷類等[3]，在核桃楸樹皮[2]和青龍衣[3]中也提取到了胡桃醌，但是報道較少。目前，天然產物中活性成分的提取方法主要有溶劑提取法、微波萃取法、超聲提取法、升華法、水蒸氣蒸餾法、壓榨法、超臨界流體提取法等[4-7]。本試驗采用超聲輔助溶劑提取核桃青皮中的胡桃醌，在超聲波的細胞破碎作用下可以將細胞中的胡桃醌充分釋放并溶于提取劑中，最終達到提高產品質量和產率的作用。本研究以胡桃醌含量為評價指標，對其在核桃青皮中的提取方法及工藝進行研究，旨在為核桃青皮的充分利用及藥用價值提供依據。

1材料與方法

1.1材料與試劑

核桃鮮果（貴州赫章）。蕓香苷，色譜純，美國Sigma公司；甲醇，色譜純，美國Tedia公司；磷酸、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、無水乙醇、硝酸鋁、濃鹽酸、三氯甲烷、亞硝酸鈉、氫氧化鈉，分析純。

1.2儀器

PHS-3C型精密pH計（上海精密科學儀器有限公司）；XS-20B多功能粉碎機（上海兆申科技有限公司）；ALC-1104電子天平（北京賽多利公司醫療設備廠）；THS-10智能型超級恒溫水浴鍋（浙江寧波天恒儀器廠）；H-1850R型臺式高速冷凍離心機（湖南長沙湘儀離心機儀器有限公司）；Agilent1100高效液相色譜儀（美國Agilent公司）；超聲提取儀（上海科導超聲儀器有限公司）。

1.3原料的預處理

將核桃鮮果進行稱重，手工剝皮，將剝皮得到的核桃青皮再次稱重。用恒溫干燥箱在40 ℃以下進行干燥，再將干燥以后的核桃青皮用中藥粉碎機進行粉碎，棄去過大的顆粒，即得試驗所需的原料。

1.4胡桃醌的提取工藝流程

稱取核桃青皮粉10 g，并加入50 L溶劑浸泡8 h，然后再超聲提取40 min，離心提取液；將殘渣繼續加入10倍量的溶劑進行提取，在同樣的條件下超聲提取40 min，離心提取液；藥渣棄掉，合并2次的提取液，然后用旋轉蒸發儀進行減壓濃縮（溫度不超過40 ℃）至干。

1.5胡桃醌含量的測定

胡桃醌得率的計算公式為：

胡桃醌得率=胡桃醌重量（g）原料重量（g）×100%。

1.6單因素試驗

浸提時間為2、4、6、8、10 h，浸提溫度為20、30、40、50、60、70 ℃，固液比為1 g ∶5 mL、1 g ∶7 mL、1 g ∶10 mL、1 g ∶12 mL、1 g ∶15 mL，超聲時間為10、20、30、40、50 min，所有試驗提取 1次，進行單因素試驗，根據胡桃醌得率選擇合適的提取時間、提取溫度、固液比、超聲時間進行正交試驗。

1.7正交試驗

在單因素試驗選出的浸提時間、浸提溫度、固液比、超聲時間條件下進行正交試驗，因為提取溫度在常溫區間對提取的胡桃醌得率影響不大，所以選取提取時間、固液比和超聲時間作為正交試驗的3個因素，進行L9（33）正交試驗，因素水平如表1所示。

2結果與分析

2.1浸提時間對胡桃醌含量的影響

從圖1可以看出，隨著提取時間的延長，胡桃醌得率逐漸升高，這是由于隨著提取時間的延長，溶劑與核桃青皮粉充分接觸，因而越來越多的胡桃醌溶解到提取溶劑之中。但當提取時間超過8 h后，由于大部分的胡桃醌已被提取出來，所以胡桃醌得率的升高趨勢不明顯。因此，提取時間宜為8 h。

2.2浸提溫度對胡桃醌含量的影響

從圖2可以看出，當提取溫度低于50 ℃時，胡桃醌得率沒有明顯的變化；而當提取溫度高于50 ℃時，胡桃醌得率明顯下降。這是因為胡桃醌隨著提取溫度的升高會隨水蒸氣升華，從而使胡桃醌得率下降。常溫對胡桃醌含量影響并不大，考慮到節約成本的因素，因此提取溫度宜選擇常溫。

2.3固液比對胡桃醌含量的影響

從圖3可以看出，隨著提取劑用量的增加，胡桃醌得率逐漸增加，當固液比在1 g ∶5～10 mL范圍內時，胡桃醌得率上升較快；但當固液比低于1 g ∶10 mL時，胡桃醌得率增長趨勢比較平緩，基本持平。因此，考慮到降低生產成本，固液比宜選擇1 g ∶10 mL。

2.4超聲時間對胡桃醌含量的影響

從圖4可以看出，當超聲時間在10～40 min范圍內時，胡桃醌得率逐漸增加，這是因為隨著超聲時間的延長，超聲波對底物產生的攪拌和空化作用增強，進而使溶出物質增多；而當時間超過40 min后，胡桃醌得率反而下降，這可能是持續的超聲波作用使已經溶出的胡桃醌分子結構遭到破壞，使胡桃醌得率下降。因此，超聲時間宜選擇40 min。

2.5正交試驗優選最佳工藝組合

根據L9（33）正交試驗原理進行核桃青皮中胡桃醌提取的正交試驗，以確定最佳的提取工藝條件。試驗結果及數據處理如表2所示。

3結論

對核桃青皮中胡桃醌提取工藝的影響因素進行單因素試

驗，再根據單因素試驗結果設計正交試驗，最終確定超聲波輔助提取的最佳提取工藝為：在常溫下提取時間8 h、固液比 1 g ∶10 mL、超聲時間40 min。在此條件下得到的胡桃醌得率為0.006 703%，為提取核桃青皮中的胡桃醌提供了較為科學、合理的理論依據。

參考文獻：

[1]江蘇新醫學院.中藥大辭典[M]. 上海：上海科學技術出版社，2005.

[2]趙巖，劉淑萍，呂朝霞. 核桃青皮的化學成分與綜合利用[J]. 農產品加工，2008（11）：66-68.

[3]李海洋，韓軍岐，李志西. 核桃青皮有效化學成分提取分離研究綜述[J]. 現代園藝，2012（15）：9-11.

[4]Toma M，Vinatoru M，Paniwnyk L，et al. Investigation of the effects of ultrasound on vegetal tissues during solvent extraction[J]. Ultrasonics Sonochemistry，2001，8（2）：137-142.

[5]徐懷德. 天然產物提取工藝學[M]. 北京：中國輕工業出版社，2006.

[6]陳尚钘，劉誠，范國榮，等.天然產物中活性成分提取分離及分析技術[J]. 江西林業科技，2005（3）：32-36.

[7]Vinatoru M，Toma M，Radu O，et al. The use of ultrasound for the extraction of bioactive principles from plant materials[J]. Ultrasonics Sonochemistry，1997，4（2）：135-139.endprint

摘要：為充分利用核桃青皮資源，研究提取溶劑、提取時間、提取溫度、固液比、超聲時間對胡桃醌提取效果的影響，以正交試驗對超聲輔助溶劑提取核桃青皮中胡桃醌提取工藝進行探討。最終得到超聲波輔助提取的最佳工藝組合為：提取溶劑為無水乙醇，在常溫下提取8 h，固液比1 g ∶10 mL，超聲時間40 min。在此條件下得到的胡桃醌得率為0006 703%。

關鍵詞：核桃青皮；胡桃醌；提取工藝；正交試驗

中圖分類號： R284.2文獻標志碼： A文章編號：1002-1302（2014）02-0215-02

收稿日期：2013-07-10

基金項目：貴州省林業廳項目（編號：黔林科合[2012]18 號）；國家國際科技合作專項（編號：2011DFB41640）。

作者簡介：魏赫楠（1989—），女，河北石家莊人，碩士研究生，研究方向為化學工藝及資源綜合利用。E-mail：whn1011070223@163.com。 核桃青皮是核桃鮮果外部的一層厚厚的綠色果皮。我國傳統中藥及臨床上有用核桃青皮來治療胃痛、胃潰瘍、皮膚病以及子宮脫落等疾病的記載[1]。核桃成熟期間，大量核桃青皮堆放于田間，造成環境污染[2]。已有研究表明，從核桃青皮中提取的有效成分有萘醌類、多酚類、多糖、二芳基庚烷類等[3]，在核桃楸樹皮[2]和青龍衣[3]中也提取到了胡桃醌，但是報道較少。目前，天然產物中活性成分的提取方法主要有溶劑提取法、微波萃取法、超聲提取法、升華法、水蒸氣蒸餾法、壓榨法、超臨界流體提取法等[4-7]。本試驗采用超聲輔助溶劑提取核桃青皮中的胡桃醌，在超聲波的細胞破碎作用下可以將細胞中的胡桃醌充分釋放并溶于提取劑中，最終達到提高產品質量和產率的作用。本研究以胡桃醌含量為評價指標，對其在核桃青皮中的提取方法及工藝進行研究，旨在為核桃青皮的充分利用及藥用價值提供依據。

1材料與方法

1.1材料與試劑

核桃鮮果（貴州赫章）。蕓香苷，色譜純，美國Sigma公司；甲醇，色譜純，美國Tedia公司；磷酸、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、無水乙醇、硝酸鋁、濃鹽酸、三氯甲烷、亞硝酸鈉、氫氧化鈉，分析純。

1.2儀器

PHS-3C型精密pH計（上海精密科學儀器有限公司）；XS-20B多功能粉碎機（上海兆申科技有限公司）；ALC-1104電子天平（北京賽多利公司醫療設備廠）；THS-10智能型超級恒溫水浴鍋（浙江寧波天恒儀器廠）；H-1850R型臺式高速冷凍離心機（湖南長沙湘儀離心機儀器有限公司）；Agilent1100高效液相色譜儀（美國Agilent公司）；超聲提取儀（上海科導超聲儀器有限公司）。

1.3原料的預處理

將核桃鮮果進行稱重，手工剝皮，將剝皮得到的核桃青皮再次稱重。用恒溫干燥箱在40 ℃以下進行干燥，再將干燥以后的核桃青皮用中藥粉碎機進行粉碎，棄去過大的顆粒，即得試驗所需的原料。

1.4胡桃醌的提取工藝流程

稱取核桃青皮粉10 g，并加入50 L溶劑浸泡8 h，然后再超聲提取40 min，離心提取液；將殘渣繼續加入10倍量的溶劑進行提取，在同樣的條件下超聲提取40 min，離心提取液；藥渣棄掉，合并2次的提取液，然后用旋轉蒸發儀進行減壓濃縮（溫度不超過40 ℃）至干。

1.5胡桃醌含量的測定

胡桃醌得率的計算公式為：

胡桃醌得率=胡桃醌重量（g）原料重量（g）×100%。

1.6單因素試驗

浸提時間為2、4、6、8、10 h，浸提溫度為20、30、40、50、60、70 ℃，固液比為1 g ∶5 mL、1 g ∶7 mL、1 g ∶10 mL、1 g ∶12 mL、1 g ∶15 mL，超聲時間為10、20、30、40、50 min，所有試驗提取 1次，進行單因素試驗，根據胡桃醌得率選擇合適的提取時間、提取溫度、固液比、超聲時間進行正交試驗。

1.7正交試驗

在單因素試驗選出的浸提時間、浸提溫度、固液比、超聲時間條件下進行正交試驗，因為提取溫度在常溫區間對提取的胡桃醌得率影響不大，所以選取提取時間、固液比和超聲時間作為正交試驗的3個因素，進行L9（33）正交試驗，因素水平如表1所示。

2結果與分析

2.1浸提時間對胡桃醌含量的影響

從圖1可以看出，隨著提取時間的延長，胡桃醌得率逐漸升高，這是由于隨著提取時間的延長，溶劑與核桃青皮粉充分接觸，因而越來越多的胡桃醌溶解到提取溶劑之中。但當提取時間超過8 h后，由于大部分的胡桃醌已被提取出來，所以胡桃醌得率的升高趨勢不明顯。因此，提取時間宜為8 h。

2.2浸提溫度對胡桃醌含量的影響

從圖2可以看出，當提取溫度低于50 ℃時，胡桃醌得率沒有明顯的變化；而當提取溫度高于50 ℃時，胡桃醌得率明顯下降。這是因為胡桃醌隨著提取溫度的升高會隨水蒸氣升華，從而使胡桃醌得率下降。常溫對胡桃醌含量影響并不大，考慮到節約成本的因素，因此提取溫度宜選擇常溫。

2.3固液比對胡桃醌含量的影響

從圖3可以看出，隨著提取劑用量的增加，胡桃醌得率逐漸增加，當固液比在1 g ∶5～10 mL范圍內時，胡桃醌得率上升較快；但當固液比低于1 g ∶10 mL時，胡桃醌得率增長趨勢比較平緩，基本持平。因此，考慮到降低生產成本，固液比宜選擇1 g ∶10 mL。

2.4超聲時間對胡桃醌含量的影響

從圖4可以看出，當超聲時間在10～40 min范圍內時，胡桃醌得率逐漸增加，這是因為隨著超聲時間的延長，超聲波對底物產生的攪拌和空化作用增強，進而使溶出物質增多；而當時間超過40 min后，胡桃醌得率反而下降，這可能是持續的超聲波作用使已經溶出的胡桃醌分子結構遭到破壞，使胡桃醌得率下降。因此，超聲時間宜選擇40 min。

2.5正交試驗優選最佳工藝組合

根據L9（33）正交試驗原理進行核桃青皮中胡桃醌提取的正交試驗，以確定最佳的提取工藝條件。試驗結果及數據處理如表2所示。

3結論

對核桃青皮中胡桃醌提取工藝的影響因素進行單因素試

驗，再根據單因素試驗結果設計正交試驗，最終確定超聲波輔助提取的最佳提取工藝為：在常溫下提取時間8 h、固液比 1 g ∶10 mL、超聲時間40 min。在此條件下得到的胡桃醌得率為0.006 703%，為提取核桃青皮中的胡桃醌提供了較為科學、合理的理論依據。

參考文獻：

[1]江蘇新醫學院.中藥大辭典[M]. 上海：上海科學技術出版社，2005.

[2]趙巖，劉淑萍，呂朝霞. 核桃青皮的化學成分與綜合利用[J]. 農產品加工，2008（11）：66-68.

[3]李海洋，韓軍岐，李志西. 核桃青皮有效化學成分提取分離研究綜述[J]. 現代園藝，2012（15）：9-11.

[4]Toma M，Vinatoru M，Paniwnyk L，et al. Investigation of the effects of ultrasound on vegetal tissues during solvent extraction[J]. Ultrasonics Sonochemistry，2001，8（2）：137-142.

[5]徐懷德. 天然產物提取工藝學[M]. 北京：中國輕工業出版社，2006.

[6]陳尚钘，劉誠，范國榮，等.天然產物中活性成分提取分離及分析技術[J]. 江西林業科技，2005（3）：32-36.

[7]Vinatoru M，Toma M，Radu O，et al. The use of ultrasound for the extraction of bioactive principles from plant materials[J]. Ultrasonics Sonochemistry，1997，4（2）：135-139.endprint