p53、Ki67、EGFR、Nm23在乳腺癌組織中的表達及臨床意義

張朝林，李宏，李金平

(寧夏醫科大學總醫院腫瘤醫院腫瘤外科，寧夏銀川750004)

·論著·

p53、Ki67、EGFR、Nm23在乳腺癌組織中的表達及臨床意義

張朝林，李宏，李金平

(寧夏醫科大學總醫院腫瘤醫院腫瘤外科，寧夏銀川750004)

目的分析p53、Ki67、EGFR、Nm23在乳腺癌組織中的表達，并探討其與臨床病理特征之間的關系。方法采用SP免疫組織化學法檢測p53、Ki67、EGFR、Nm23在176例乳腺癌組織中的表達情況，并結合其臨床和病理資料進行回顧性分析。結果乳腺癌組織中p53的表達與組織學分級、淋巴結是否轉移有顯著關系(P＜0.05)，且與Ki67(r=0.157，P＜0.05)呈正相關，與ER呈負相關(r=-0.168，P＜0.05)；Ki67表達與淋巴結是否轉移及pTNM分期有顯著關系(P＜0.05)，與HER-2呈正相關(r=0.1756，P＜0.05)；EGFR表達與淋巴結是否轉移、pTNM分期有顯著關系(P＜0.05)，同時與ER(r=-0.290，P＜0.05)、PgR(r=-0.239，P＜0.05)呈負相關；Nm23表達與腫瘤大小、組織學分級、淋巴結是否轉移有顯著關系，表達差異有統計學意義(P＜0.05)，且與Ki67呈負相關關系(r=-0.178，P＜0.05)。結論p53、Ki67、EGFR、Nm23的檢測對乳腺癌的治療及預后評估有重要意義。

乳腺癌；p53；Ki67；EGFR；Nm23

乳腺癌是一種異質性較強的惡性腫瘤，同時乳腺癌又具有臨床多樣性，不同乳腺癌組織基因表達也不同。近年來，乳腺癌的發病率呈逐年增高趨勢，已成為世界女性排名第一的常見惡性腫瘤，其預后受到人們越來越多的關注。聯合檢測多種腫瘤分子標志物可以為乳腺癌的診療及評估預后提供可靠依據。本文對p53、Ki67、表皮生長因子受體(EGFR)、Nm23等免疫組化指標的表達情況進行相關性分析，探索其在人乳腺癌組織中的表達及意義，以期為乳腺癌的診斷治療及預后判斷提供一些新的參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料收集我院2010年1月至2013年5月經手術治療，病理確診的女性乳腺癌患者176例，均為女性，年齡25～76歲，平均(48±0.26)歲；其組織學分級：Ⅰ級52例，Ⅱ級86例，Ⅲ級38例；有腋窩淋巴結轉移的60例，無腋窩淋巴結轉移的116例；pTNM分期：Ⅰ期50例，Ⅱ期76例，Ⅲ期50例。患者術前均未行放化療、內分泌及靶向治療，免疫組化檢測p53、Ki67、EGFR、Nm23等資料完整。

1.2 方法免疫組化染色采用SP二步法進行檢測。p53、Ki67、EGFR、Nm23抗體均購自福州邁新生物公司。按試劑盒說明書操作。

1.3 免疫組化檢測判斷標準p53表達定位于細胞核，EGFR定位于細胞膜或細胞漿，Ki67定位于細胞核，Nm23為細胞質陽性表達。評判標準：無陽性細胞或陽性細胞數＜10%為(-)；陽性細胞數為10%～50%為(+)；陽性細胞數為51%～75%為(++)；陽性細胞數＞75%為(+++)，以陽性細胞數＜10%為陰性表達(-)，≥10%為陽性表達(+)。

1.4 統計學方法本研究數據應用SPSS11.5軟件，對p53、Ki67、EGFR、Nm23表達與臨床病理特征的關系進行χ2檢驗(Student-Newman-Kueuls)、對其與常見分子標志物之間的相關性進行Spearman's等級相關分析，P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 乳腺癌組織中p53、Ki67、EGFR、Nm23的蛋白表達情況176例女性乳腺癌患者中行免疫組化檢測p53、Ki67、EGFR、Nm23，其陽性表達率分別為56.82%(100/176)、67.05%(118/176)、22.73%(40/176)、56.25%(99/176)。

2.2 乳腺癌組織中p53、Ki67、EGFR、Nm23表達與臨床病理特征的關系本研究發現p53在人乳腺癌組織中的表達與組織學分級、淋巴結是否轉移有顯著關系，表達差異有統計學意義(P＜0.05)，且與Ki67(r=0.157，P＜0.05)呈正相關關系，與ER呈負相關(r=-0.168，P＜0.05)，而與腫瘤大小、pTNM分期、PgR、HER-2之間無顯著關系(P＞0.05)；Ki67表達與淋巴結是否轉移及pTNM分期有顯著關系(P＜0.05)，且與HER-2呈正相關(r=0.1756，P＜0.05)，與腫瘤大小、組織學分級、ER、PgR無顯著關系(P＞0.05)；EGFR表達與淋巴結是否轉移、pTNM分期有顯著關系(P＜0.05)，同時與ER(r=-0.290，P＜0.05)、PgR(r=-0.239，P＜0.05)呈負相關，與腫瘤大小、組織學分級、Ki67、HER-2無顯著關系(P＞0.05)；Nm23表達與腫瘤大小、組織學分級、淋巴結是否轉移有顯著關系，表達差異有統計學意義(P＜0.05)，且與Ki67呈負相關關系(r=-0.178，P＜0.05)，而與pTNM分期、ER、PgR無顯著關系，表達差異無統計學意義(P＞0.05)，見表1和表2。

表1 乳腺癌組織中p53、Ki67、EGFR、Nm23表達與臨床病理特征的關系(例)

表2 乳腺癌組織中p53、Ki67、EGFR、Nm23表達與常見分子標志物之間的相關性(例)

3 討論

乳腺癌的發生、發展與多種基因和分子水平的變化密切相關，如原癌基因、抑癌基因的失活、缺失、突變等。隨著分子生物學的不斷發展，分子標志物的檢測為研究腫瘤的生長、浸潤、轉移方面提供了巨大幫助，并為乳腺癌的診斷、治療和預后的評估提供了新的手段和措施，然而目前沒有單一的基因組及其代謝狀態變化可被視為能決定乳腺癌的發生和發展，而將傳統預測指標與分子生物學指標相結合可以更好地預測乳腺癌患者的生存率，并對患者進行評估及治療。

p53基因為一種重要的抑癌基因，其突變發生異常頻繁，可使p53蛋白失活，細胞分裂失去節制，發生癌變，人類癌癥中約有一半是由于該基因發生突變失活。p53基因對激活DNA的修復、停止細胞周期、啟動細胞凋亡、維護基因組穩定起著非常重要的作用。根據目前公布的國際癌癥研究機構(IARC)Tp53數據庫顯示，全球超過70%的乳腺癌患者發生Tp53錯義突變變化，p53的過表達被認為是臨床療效不佳、生存期短的乳腺癌患者，可作為判斷乳腺癌患者預后及治療的分子指標之一[1]。本研究發現p53在人乳腺癌組織中的表達與組織學分級、淋巴結是否轉移有顯著關系，表達差異有統計學意義(P＜0.05)，且與Ki67 (r=0.157，P＜0.05)呈正相關關系，而與腫瘤大小、pTNM分期、PgR、HER-2之間無顯著關系(P＞0.05)。本研究還發現p53的表達與ER呈負相關(r=-0.168，P＜0.05)，與Berger等的研究一致[2]。

Ki67是與增殖細胞相關的核抗原，為目前檢測腫瘤細胞增殖活性的最可靠指標之一，其表達水平升高一定程度上反應了腫瘤細胞的增殖水平，增殖活躍的腫瘤更易侵襲和遠處轉移[3]，可作為術前內分泌治療及評價乳腺癌術后治療和預后的可靠預測指標[4-5]。本研究發現Ki67表達與淋巴結是否轉移及pTNM分期有顯著關系(P＜0.05)，且與HER-2呈正相關(r=0.1756，P＜0.05)，與腫瘤大小、組織學分級、ER、PgR無顯著關系(P＞0.05)，進一步驗證了Ki67高表達的患者乳腺癌增殖活性高、預后差。

人類表皮生長因子受體(EGFR)在腫瘤的發生、發展過程中發揮著重要的作用。國內外大量研究發現，在30%的人體惡性腫瘤都存在EGFR的過表達，這些患者往往較早發生轉移、復發，且復發率高、存活期短[6]。EGFR在細胞的生長、增殖、分化、粘附以及移動等過程中發揮著非常重要的作用[7]。本研究結果顯示EGFR表達與淋巴結是否轉移、pTNM分期有顯著關系(P＜0.05)，同時與ER(r=-0.290，P＜0.05)、PgR(r=-0.239，P＜0.05)呈負相關，與腫瘤大小、組織學分級、Ki67、HER-2無顯著關系(P＞0.05)，此結果與Tzaida等[8]的研究結果一致，進一步提示其在乳腺癌的發生及演變過程中可能發揮著重要的作用，可作為評估乳腺癌預后的指標之一。

Nm23基因是第一個被公認的腫瘤轉移抑制基因，而轉移往往是影響腫瘤患者預后的主要因素，Nm23能夠抑制腫瘤細胞的能動性、入侵潛力，在細胞增殖、分化、腫瘤發生、腫瘤轉移中發揮著重要作用[9]，被認為是一個重要的預后因子，故Nm23可作為判斷乳腺癌預后的重要指標。Niitsu等[9]報道Nm23表達水平與人類乳腺癌、卵巢癌、宮頸癌、黑色素瘤等轉移潛能細胞呈負相關，另外，相反的趨勢也已經在甲狀腺癌、神經母細胞瘤和非霍奇金淋巴瘤中報道，盡管這種差異的機制是未知的[10-11]。本研究發現Nm23表達與腫瘤大小、組織學分級、淋巴結是否轉移有顯著關系(P＜0.05)，且與Ki67呈負相關關系(r=-0.178，P＜0.05)，而與pTNM分期、ER、PgR無顯著關系，表達差異無統計學意義(P＞0.05)，進一步說明Nm23低表達的乳腺癌惡性程度高、預后差。

綜上所述，p53、Ki67、EGFR、Nm23在乳腺癌的發生、發展過程中發揮著重要的作用，聯合檢測評估可作為判斷乳腺癌生物學行為及預后的重要指標，對于延長患者無病生存期，減少其復發和惡性轉化有重要意義。

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Expression of p53,Ki67,EGFR,Nm23 in breast cancer and their correlations with clinical prognosis.

ZHANG Chao-lin,LI Hong,LI Jin-ping.Department of Oncology,the Affiliated Hospital to Ningxia Medical University,Yinchuan 750004,Ninxia,CHINA

ObjectiveTo explore the associations between the expression of the breast cancer markers such as p53,Ki67,EGFR,Nm23 and clinical prognosis.MethodsThe SP immunohistochemical technique was used to determine p53,Ki67,EGFR,Nm23 proteins expression in 176 patients with breast cancer.The relationship between the expression of p53,Ki67,EGFR,Nm23 proteins and the clinical pathological parameters were retrospectively analyzed.ResultsThe expression of p53 in breast cancer tissue was correlated with the histological grades and lymph metastasis(P＜0.05)，had positive correlation with Ki67,and had negative correlation with ER;the expression of Ki67 was correlated with the lymph metastasis and clinical pathological stage(P＜0.05),and had negative correlation with HER-2;the expression of EGFR was significantly correlated with lymph-node metastasis and clinical pathological stage(P＜0.05),and had significantly negative correlated with ER and PgR(P＜0.05).The expression of Nm23 was significantly correlated with primary tumor diameter,histological grades and lymph metastasis,and had negative correlation with Ki67(P＜0.05).ConclusionJoint monitoring p53,Ki67,EGFR,Nm23 have the important significance to evaluate the treatment and prognosis of breast cancer.

Breast carcinoma;p53;Ki67;EGFR;Nm23

R737.9

A

1003—6350（2014）01—0015—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.01.0005

2013-06-12)

李金平。E-mail：drljp601@sina.com