胃黏膜白細胞介素mRNA水平與幽門螺旋桿菌感染的相關性研究

李達祥

胃黏膜白細胞介素mRNA水平與幽門螺旋桿菌感染的相關性研究

李達祥

目的 研究幽門螺桿菌(Helicobacterpylori,HP)感染中胃黏膜白細胞介素mRNA水平。方法 選取2010年10月～2013年6月在中山市民眾醫院接受檢查治療的慢性胃炎患者52例，將收治的HP陽性患者分別采用real-time PCR、PCR-熒光探針法及酶聯免疫吸附實驗夾心法檢測患者胃黏膜白細胞介素mRNA(IL-6、IL-1β)的水平，記錄治療前后mRNA(IL-6、IL-1β)水平，探討與幽門螺桿菌感染相關性。結果 患者胃黏膜白細胞介素mRNA水平隨著幽門螺旋桿菌感染加重而升高，尤其是IL-6水平，隨著感染程度的不斷惡化。同時，治療前后相比患者的感染程度從降低，其血清與胃黏膜蛋白中的IL-6活性水平降低，而IL-1β水平無明顯變化。結論 幽門螺桿菌感染對mRNA的影響不顯著，而IL-6 與幽門螺桿菌的感染有著密切的關系。

胃黏膜；幽門螺桿菌；mRNA水平

作為Ⅰ類致癌物，幽門螺桿菌(Helicobacterpylori，HP)已被WHO列為人類最大致癌因素之一[1]。研究表明，HP陽性患者感染該菌進而引發胃癌的概率是普通HP陰性患者的7倍[2]。其作用機理為，HP陽性患者感染導致患者胃黏膜白細胞介素mRNA水平升高，而患者胃黏膜白細胞介素升高導致胃酸分泌降低，進而引發慢性胃炎以及消化性潰瘍等[3]。而慢性胃炎進一步發展導致患者胃黏膜萎縮，再進一步引發不典型增生，最終演變為胃癌。多數研究表明，HP感染時患者胃黏膜白細胞介素mRNA水平均會增大，尤其是IL-6水平[4]。為進一步研究兩者間的相互關系，本研究對52例慢性胃炎患者進行分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 52例慢性胃炎患者均為2010年10月～2013年6月在廣東省中山市民眾醫院內兒科接受檢查治療的患者。男女比例正好為1∶1，且經胃鏡和組織學檢查均確診為無穿孔和幽門梗阻等癥的慢性胃炎患者，同時經檢測52例患者均為HP陽性患者。患者身高（162±10）cm、年齡（43±27）歲、體質量及病情病史等一般資料比較，差異無統計學意義，具有可比性。同時，所有52例慢性胃炎患者在檢查治療期間的4周內均未采用抗生素及H2受體拮抗劑（鉍劑）等藥物。

1.2 檢測方法 52例患者均是通過胃鏡檢查選取4塊患者幽門附近3～5cm的胃黏膜標本。將所有標本分別采用realtime PCR、PCR-熒光探針法及酶聯免疫吸附實驗夾心法檢測患者胃黏膜白細胞介素mRNA(IL-6、IL-1β)的水平。具體一般為：將選取的4塊胃黏膜標本兩兩分開，2塊采用real-time PCR檢測幽門螺旋桿菌的感染情況，其實質是通過對幽門螺旋桿菌的保守基因來判斷其是否感染。另2塊分別采用PCR-熒光探針法檢測患者白細胞介素mRNA（IL-1β）的具體水平以及采用酶聯免疫吸附實驗夾心法檢測mRNA(IL-6）的水平。

其中mRNA（IL-1β）的檢測主要是通過保守基因作為內參，在熒光定量聚合酶鏈（7500）反應擴增儀上由自帶軟件進行分析mRNA（IL-6、IL-1β)的水平。而mRNA(IL-6）他的檢測則是將標本在胎牛血清（濃度10%、溫度37℃）RPLMI1 640中培養24h后研磨，取1mL的研磨上清液進行檢測，同時采用紫外分光光度手段檢測其蛋白含量。

1.3 治療方法 對所有慢性胃炎患者采用奧美拉唑輔以克拉霉素等進行幽門螺旋桿菌根除治療，奧美拉唑2～3粒/次，早晚各1次，克拉霉素3～4粒/次，同樣早晚各1次，經2個療程（4周）治療后，對所有患者進行為期1個月的復查追蹤，觀察記錄治療前后患者幽門螺旋桿菌感染情況與胃黏膜白細胞介素mRNA(IL-6、IL-1β)的水平。

1.4 統計學方法 所有數據采用SPSS19.0統計學軟件進行處理，正態計量資料采用“x±s”表示，組間比較采用t檢驗。計數資料用例數（n）表示，計數資料組間率（%）的比較采用χ2檢驗；以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

研究表明，患者胃黏膜白細胞介素mRNA水平隨著幽門螺旋桿菌感染加重而升高，尤其是IL-6水平，2組之間關系密切(見表1)。

表1 幽門螺旋桿菌感染程度與IL-6活性水平的關系

與治療前相比，治療后患者幽門螺旋桿菌感染情況明顯低于治療前，患者胃黏膜白細胞介素mRNA水平也明顯降低，尤其是IL-6水平。而IL-1β水平無明顯變化（見表2）。

表2 治療前后幽門螺旋桿菌感染程度與IL－6活性水平變化

3 討論

作為Ⅰ類致癌物，幽門螺桿菌以其毒力強、繁殖周期快等特點嚴重危害著人類的生命健康。現已被世界衛生組織列為人類最大致癌因素之一[3]。其致癌的一般作用機理，幽門螺桿菌陽性患者感染導致患者胃黏膜白細胞介素mRNA水平升高，而患者胃黏膜白細胞介素升高導致胃酸分泌降低，進而引發慢性胃炎以及消化性潰瘍等[4]。而慢性胃炎進一步發展導致患者胃黏膜萎縮，再進一步引發不典型增生，最終演變為胃癌。多數研究表明，幽門螺桿菌陽性患者感染該菌進而引發胃癌的概率是普通幽門螺桿菌陰性患者的7倍[5]。且幽門螺桿菌感染時患者胃黏膜白細胞介素mRNA水平均會增大，尤其是IL-6的水平[6]。它對患者體內細胞直接或間接的產生毒害作用，因此導致患者胃內的胃酸和胃蛋白酶等攻擊因子直接作用于上皮細胞，不僅嚴重損害了患者的上皮細胞，而且嚴重破壞了細胞之間原本密切關聯。

根據上述研究結果可知，52例患者胃黏膜白細胞介素m RNA水平隨著幽門螺旋桿菌感染加重而升高。尤其是IL-6水平，隨著感染程度的不斷惡化，IL-6血清中的的活性水平從（+）的(8.56±1.5)到（++）(11.1±2.8)再到（+++）的(12.46±3.8)顯著升高，胃黏膜蛋白中的活性水平也是隨著幽門螺旋桿菌感染加重，其活性水平明顯升高。同時，治療前后相比患者的感染程度從（2.63±0.3）降至（0.48±0.39），其血清與胃黏膜蛋白中的IL-6活性水平也是從（11.4±3.0）降至（5.92±1.6）和(8.44±1.9)降至(3.31±2.34)。治療前后相比，差異有統計學意義（P＜0.05）。而由于IL-1βmRNA不是基本看家基因，所以幽門螺桿菌感染對mRNA的影響并不顯著。

綜上所述，胃黏膜白細胞介素mRNA的水平與幽門螺桿菌的感染有密切的聯系。尤其是IL-6的活性水平，隨著感染程度的惡化，其活性表達水平越高。

[1] 李唯瓊，張超．幽門螺桿菌與胃癌相關性探討[J]．當代醫學，2010，16(32)：29，41．

[2] 畢波，周文濤．幽門螺旋桿菌感染與白細胞介素-6的關系研究[J]．中國社區醫師，2013，5(14)：7．

[3] 張春花．中醫治療幽門螺桿菌感染性胃病臨床分析[J]．中國民族民間醫藥，2013，3(72)：72-73．

[4] 米日古麗·艾力．克州維、漢、柯幽門螺旋桿菌感染狀況調查分析[J]．中國當代醫藥，2013，20(10)：162-163．

[5] 李世霞．292例體檢者幽門螺桿菌檢測結果分析[J]．中國腫瘤臨床，2011，38（11）：654-655．

[6] 趙丹云．幽門螺旋桿菌感染與慢性胃炎的相關性研究[J]．求醫問藥，2008，14(4)：53-54．

Objective Helicobacter pylori (HP) infection in gastric interleukin mRNA levels. Methods A retrospective analysis of our hospital for examination and treatment of 52 cases of chronic gastriti from October 2010 to June 2013,HP-positive patients were treated using real-time PCR, PCR-fluorescence probe method and sandwich enzyme-linked immunosorbent assay was used to detect patients with gastric interleukin m RNA (IL-6, IL-1β) levels,recorded before and after treatment m RNA (IL-6, IL-1β) levels. To investigate the correlation between Helicobacter pylori infection. Results The study showed that patients with gastric interleukin m RNA levels increased with H. pylori infection and elevated levels of IL-6 in particular, with the extent of the infection worsening. Meanwhile, the degree of infection as compared to the patients before and after treatment from a lower decrease in the serum of gastric mucosal protein levels of IL-6 activity. The IL-1β levels were not significantly changed. Conclusion The effect on Helicobacter pylori infection m RNA is not significant,while IL-6 and Helicobacter pylori infection is closely related.

Gastric mucosa;Pylori;mRNA levels

10.3969/j.issn.1009-4393.2014.30.014

廣東 5284411 廣東省中山市民眾醫院內兒科（李達祥）