結(jié)核菌素純蛋白衍生物（TB-PPD）臨床安全性的研究

張延煬 肖占沛 王長雙 馬雅婷 路明霞 張肖肖

結(jié)核菌素純蛋白衍生物（TB-PPD）臨床安全性的研究

張延煬 肖占沛 王長雙 馬雅婷 路明霞 張肖肖

目的 評價結(jié)核菌素純蛋白衍生物（TB-PPD）的臨床安全性。方法 隨機(jī)選取50例健康志愿者，對其皮內(nèi)注射0．1 mL TB-PPD 試劑，注射結(jié)束后分別于30 min、24 h、48 h、72 h和7 d觀察其不良反應(yīng)發(fā)生率，評價其安全性。結(jié)果 不良反應(yīng)主要表現(xiàn)為發(fā)熱、接種部位疼痛、硬結(jié)等，未發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重不良反應(yīng)。結(jié)論 TB-PPD具有較好的臨床安全性。

結(jié)核菌素純蛋白衍生物；結(jié)核病；結(jié)核菌素試驗；安全性

結(jié)核病是至今仍然危害人民群眾身心健康的慢性傳染病，是全球關(guān)注的公共衛(wèi)生問題和社會問題，是我國重點控制的重大疾病之一[1-2]。衛(wèi)生部2011年3月公布我國肺結(jié)核疫情現(xiàn)狀，目前我國結(jié)核病年發(fā)病人數(shù)約為130萬，位居全球第2位[3]。新生兒卡介苗預(yù)防接種是我國目前結(jié)核病預(yù)防的一種重要措施，為了考核卡介苗免疫接種效果，目前多采用結(jié)核菌素純蛋白衍生物(TB-PPD)做結(jié)核菌素試驗，以使結(jié)核菌素的效價更穩(wěn)定，反應(yīng)更具特異性，但隨著臨床的廣泛應(yīng)用，文獻(xiàn)報道PPD試驗不良反應(yīng)亦隨之增加[4]。為研究和評價結(jié)核菌素純蛋白衍生物(TBPPD)的臨床安全性，本研究選擇河南省新鄉(xiāng)市為研究現(xiàn)場，于2013年1月～2013年5月對TB-PPD進(jìn)行了臨床觀察和評價，結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 依照知情同意、自愿參加的原則，在新鄉(xiāng)市選擇≥3歲健康者50例，選擇標(biāo)準(zhǔn)為無肺內(nèi)、外結(jié)核病，無呼吸道癥狀及全身不適癥狀者，無各種急、慢性疾病，無急性傳染病，無皮膚病或各種原因引起的皮膚過敏者，無結(jié)核病密切接觸史者，胸片證實無結(jié)核病病灶者，且皮試前7 d各項指標(biāo)體檢正常。體檢項目包括：血、尿常規(guī)和生化檢查；拍攝胸片；心電圖檢查；基本體征檢查：心率、血壓、體溫等；腫瘤標(biāo)志物檢查：甲胎蛋白和癌胚抗原兩項。

1.2 產(chǎn)品與注射方法

1.2.1 結(jié)核菌素純蛋白衍生物（TB-PPD）由北京祥瑞生物制品有限公司生產(chǎn)，為液體劑型，規(guī)格為50 IU/mL，批號為2013年1月1日（原液批號為：20120701），有效期至2014年1月30日。成品經(jīng)中國藥品生物制品檢定所注冊檢定，其質(zhì)量符合《中華人民共和國藥典》（三部2010版）的要求。

1.2.2 經(jīng)體檢符合受試要求的觀察對象在簽署知情同意書后，于其左側(cè)前臂掌側(cè)前1/3處，經(jīng)75%酒精消毒，待皮膚微干后，用1 mL注射器(25-26號針頭)皮內(nèi)注射TB-PPD 0.1 mL，針頭斜面向上成5°刺入皮內(nèi)，注射深度要合適，使局部出現(xiàn)一圓形隆起的皮丘。

1.3 安全性評價 對每個觀察對象皮試后留觀30 min，記錄局部和全身反應(yīng)情況。接種后24 h、48 h、72 h、7 d采用米尺測量并記錄變態(tài)反應(yīng)原所致皮膚硬結(jié)的2個直徑（最大徑和最大徑的垂直徑），以及局部(皮疹、疼痛、瘙癢、淋巴結(jié)病變等)和全身(發(fā)熱、心動過速或過緩、高血壓、低血壓等)反應(yīng)，對有反應(yīng)的觀察對象，追蹤至反應(yīng)消失。相關(guān)反應(yīng)分級標(biāo)準(zhǔn)見表1、表2。

表1 局部反應(yīng)分級

表2 生命體征分級

對于上面分級表中未涉及的臨床異常情況，按照下列標(biāo)準(zhǔn)對不良反應(yīng)進(jìn)行強(qiáng)度分級評估：0級，未出現(xiàn)；1級，輕度，短時間的不適（＜48 h），無需醫(yī)療；2級，中度，輕度～中度，需要日常限制日常活動，不需要或只需要少量的醫(yī)療干預(yù)；3級，重度，顯著地限制日常活動，生活需要照顧，需要醫(yī)療，可能需要住院；4級，危及生命，極度限制日常活動，日常生活顯著地需要照顧，需要醫(yī)療和住院。從皮試起詳細(xì)記錄7 d內(nèi)出現(xiàn)的局部或全身不良反應(yīng)，如皮試7 d后體檢異常，于皮試后14 d再復(fù)查1次。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用EpiData 3.02雙份錄入數(shù)據(jù)，由2人分別獨(dú)立完成，采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果

2.1 基本情況 共有50名受試者參加TB-PPD皮試，12人中止了實驗。其中，因違背實驗方案1人，失訪2人，ST-T異常1人，AST異常1人，血紅蛋白異常1人，心肌供血不足1人，白細(xì)胞分類中中性粒細(xì)胞高1人，胸片提示異常4人。38名成功受試者中，年齡21～54歲，平均年齡（40.42±8.029）歲，平均體質(zhì)量（68.76±11.015）kg，平均身高（166.08±7.899）cm；男女比例1.24∶1（見表3）。

表3 研究對象的基本情況

2.2 安全性研究

2.2.1 38名觀察對象TB-PPD皮試后30 min內(nèi)未觀察到即時反應(yīng)。

2.2.2 在TB-PPD后皮試24 h內(nèi)，2人（5.3%）出現(xiàn)了異常的硬結(jié)現(xiàn)象，1人（2.6%）出現(xiàn)了異常的紅腫現(xiàn)象，但均無臨床意義；體溫均正常，最高體溫為：36.9℃；心率均正常，最低為59次/min，最高為96次/min；收縮壓和舒張壓各有1人出現(xiàn)輕度異常，分別為148 mmHg和92 mmHg，但均無臨床意義。

2.2.3 在TB-PPD皮試后48 h內(nèi)，1人（2.6%）出現(xiàn)了異常的硬結(jié)現(xiàn)象，3人（7.9%）出現(xiàn)了異常的紅腫現(xiàn)象，但均無臨床意義；有1人（2.63%）出現(xiàn)水泡現(xiàn)象，反應(yīng)分級是3級；體溫均正常，最高體溫為：36.9℃；收縮壓和舒張壓各有1人出現(xiàn)輕度異常，分別為149 mmHg和94 mmHg，但均無臨床意義。

2.2.4 在TB-PPD皮試后72 h內(nèi)，1（2.6%）人出現(xiàn)了異常的紅腫現(xiàn)象，但無臨床意義；體溫均正常，最高體溫為：36.8℃；舒張壓有2人出現(xiàn)輕度異常，分別為93 mmHg和100 mmHg；有1人出現(xiàn)水泡，反應(yīng)分級是5級；但此接種TB-PPD的反應(yīng)者未經(jīng)任何處理，水泡于72 h內(nèi)消失。

2.2.5 在TB-PPD皮試后7 d的安全性體檢，38名受試者體征全部正常。

3 討論

近年來，世界結(jié)核病疫情均呈上升趨勢，我國結(jié)核病疫情在全球?qū)儆诟吡餍械貐^(qū)，是全球22個結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國家之一，位居第2位[3]。該病具有發(fā)病率高、致死率高、傳染率高等特點。據(jù)統(tǒng)計，全球每年大約有200萬人死于結(jié)核病。導(dǎo)致該病的死亡率居高不下的主要原因是缺乏快速有效的檢測方法，未及時發(fā)現(xiàn)的患者一般病變嚴(yán)重，菌量較多，體質(zhì)較差，失去了最佳的治療時期，影響療效，同時也必然導(dǎo)致結(jié)核菌的繼續(xù)傳染[5]，早發(fā)現(xiàn)早治療對控制結(jié)核病疫情有重要意義。

結(jié)核菌素蛋白純化衍生物(TB-PPD)是將結(jié)核桿菌培養(yǎng)于由甘油、天門冬素和枸櫞酸鹽等組成的培養(yǎng)基6～8周后經(jīng)分離獲得的純結(jié)核菌蛋白質(zhì)，皮下注射可引起特異的皮膚變態(tài)反應(yīng)，目前主要用于機(jī)體免疫功能評價。結(jié)核菌素試驗是基于四型變態(tài)反應(yīng)原理的一種皮膚試驗，用來檢測機(jī)體有無感染過結(jié)核桿菌。凡感染過結(jié)核桿菌的機(jī)體，會產(chǎn)生相應(yīng)的致敏淋巴細(xì)胞，具有對結(jié)核桿菌的識別能力，當(dāng)再次遇到少量的結(jié)核桿菌或結(jié)核菌素時，致敏T淋巴細(xì)胞受相同抗原再次刺激會釋放出多種可溶性淋巴因子，導(dǎo)致血管通透性增加，巨噬細(xì)胞在局部集聚。約在48～72 h內(nèi)，局部出現(xiàn)紅腫、硬節(jié)的陽性反應(yīng)。若受試者未感染過結(jié)核桿菌，則注射局部無變態(tài)反應(yīng)發(fā)生[6]。

安全性評價內(nèi)容主要是觀察TB-PPD皮試后的全身反應(yīng)、局部反應(yīng)和由TB-PPD皮試引起的其它不良事件。PPD試驗不良反應(yīng)發(fā)生與多因素有關(guān)，如患者年齡、體質(zhì)、精神因素等，故應(yīng)注意PPD合理保存和正確使用，在做PPD試驗前應(yīng)當(dāng)注意個體差異，詳細(xì)詢問其過敏史，對發(fā)熱、體弱、嚴(yán)重衰竭者以及對其他預(yù)防免疫注射有過過敏者禁作該試驗[7]；同時，患急性傳染病(麻疹、百日咳、流行性感冒、肺炎等)、急性眼結(jié)膜炎、急性中耳炎、廣泛皮膚病患者及過敏體質(zhì)者也不宜使用[8]；本次TB-PPD皮試后的局部反應(yīng)發(fā)生率較低，僅為2.63%，且為輕度反應(yīng)（水泡），未觀察到重度反應(yīng)和其它不良事件。TB-PPD皮試引起的局部反應(yīng)未經(jīng)任何處理均在72 h內(nèi)消失，同時引起的局部反應(yīng)均無臨床意義，這說明TB-PPD具有較好的臨床安全性，也再次證明了TB-PPD純度高，性質(zhì)穩(wěn)定，不良反應(yīng)少，只要早期發(fā)現(xiàn)，不良反應(yīng)預(yù)后良好，一般不會發(fā)生死亡事件[4]。

[1] 張立新．依法控制結(jié)核,防治結(jié)核蔓延[J]．中國防癆雜志,1999, 21(3)：36．

[2] 馮淑范,吳建林．四川省結(jié)核病控制項目社會經(jīng)濟(jì)學(xué)評價[J]．預(yù)防醫(yī)學(xué)情報雜志,2002,18(5)：403-404．

[3] 衛(wèi)生部疾病預(yù)防控制局．衛(wèi)生部介紹全國肺結(jié)核預(yù)防現(xiàn)狀[EB/OL]．2011-03-21．

[4] 王瑜,吳逢波,代國友．PPD致不良反應(yīng)文獻(xiàn)分析[J]．現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2007,34(5)：942-945．

[5] 譚云洪,成詩明,楊華林,等．肺結(jié)核病人延誤及其影響因素分析[J]．實用預(yù)防醫(yī)學(xué),2007,14(3)：965-968．

[6] 馬玙,朱莉貞,潘毓萱．結(jié)核病[M]．北京：人民衛(wèi)生出版社,2006．

[7] 鄭桃英,沈小花．結(jié)核菌素試驗引起全身過敏性皮疹2例報告[J]．浙江預(yù)防醫(yī)學(xué),2003,15(12)：74．

[8] 楊光華．病理學(xué)[M]．北京：人民衛(wèi)生出版社,2001：355-356．

Objective To evaluate the safety of TB-PPD in humans. Methods A randomized clinical trial was conducted in 50 healthy volunteers. The subjects were intradermal injected with TB-PPD (0.1 mL). The adverse events following immunization (AEFIs) were observed after 30 minutes, 24 hours, 48 hours, 72 hours and 7 days of inoculation. Safety was evaluated by observing adverse reaction after inoculation. Results The main AEFIs were fever, local pain and scleroma. There were no other severe AEFIs. Conclusion The TB-PPD has good safety.

TB-PPD; Tuberculosis; Tuberculin test; Safety

10.3969/j.issn.1009-4393.2014.29.089

2011年度河南省衛(wèi)生廳政策研究重點課題 （YWZYZ 2011018）

河南 450016 河南省疾病預(yù)防控制中心 （張延煬 肖占沛王長雙 馬雅婷 路明霞 張肖肖）