川芎中阿魏酸超高壓提取工藝的優化

侯麗麗+陳洪海+張守勤+

摘要：優化川芎（Ｌｉｇｕｓｔｉｃｕｍ ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ Ｈｏｒｔ．）中阿魏酸的常溫超高壓提取條件，應用高效液相色譜法測定提取液中的阿魏酸含量，以阿魏酸提取率為評價指標進行Ｌ９（３４）正交試驗。結果表明，常溫超高壓提取川芎中阿魏酸的最優工藝為乙醇體積分數７０％，壓力３００ ＭＰａ，固液比１∶５０（ｍ∶Ｖ，ｇ∶ｍＬ），時間３．０ ｍｉｎ，提取１次。超高壓提取技術作為一種新的提取方法，提取川芎中阿魏酸穩定、可行。

關鍵詞：川芎（Ｌｉｇｕｓｔｉｃｕｍ ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ Ｈｏｒｔ．）；阿魏酸；超高壓；提取

中圖分類號：Ｒ２８４．2；R282文獻標識碼：Ａ文章編號：0439－８114（２０14）09－2133-03

Ｏｐｔｉｍｉｚing Ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ Ｅｘｔｒａｃｔｉng Ｆｅｒｕｌｉｃ Ａｃｉｄ ｆｒｏｍ Ｌｉｇｕｓｔｉｃｕｍ ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ Ｈｏｒｔ．

ｂｙ Ｕｌｔｒａ－ｈｉｇｈ Ｐｒｅｓｓｕｒｅ

ＨＯＵ Ｌｉ－ｌｉ１，ＣＨＥＮ Ｈｏｎｇ－ｈａｉ２， ＺＨＡＮＧ Ｓｈｏｕ－ｑｉｎ３

（１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ｊｉｌｉｎ Ｂｕｓｉｎｅｓｓ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ １３００６２，Ｃｈｉｎａ； ２． Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ １３００１２， Ｃｈｉｎａ；３．Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ｊｉｌｉｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ １３００２５，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍal Ｕｌｔｒａ－ｈｉｇｈ Ｐｒｅｓｓｕｒｅ （ＵＰＥ） ｐｒｏｃｅｓｓ ｆｏｒ extracting ｆｅｒｕｌｉｃ ａｃｉｄ ｆｒｏｍ Lｉｇｕｓｔｉｃｕｍ ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ Ｈｏｒｔ. ｗａｓ ｓｔｕｄｉｅｄ． Ｔｈｅ ｐｒｏｃｅｓｓ ｗａｓ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｂｙ Ｌ９（３４） ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｄｅｓｉｇｎ using ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｆｅｒｕｌｉｃ ａｃｉｄ ａｓ ｉｎｄｅｘ． Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍal ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｗａｓ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｓｏｌｖｅｎｔ with ７０％ ｅｔｈａｎｏｌ， ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｅｓｓｕｒｅ of ３００ ＭＰａ， ｓｏｌｉｄ／ｌｉｑｕｉｄ ｒａｔｉｏ of １∶５０（ｍ∶Ｖ， ｇ∶ｍＬ）， ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ for ３．０ ｍｉｎ ａｎｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｆｏｒ １ ｔｉｍｅｓ． ＵＰＥ ｉｓ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｅｘｔｒａｃｔｉng ｆｅｒｕｌｉｃ ａｃｉｄ ｆｒｏｍ Lｉｇｕｓｔｉｃｕｍ ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ Ｈｏｒｔ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｌｉｇｕｓｔｉｃｕｍ ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ Ｈｏｒｔ．； ｆｅｒｕｌｉｃ ａｃｉｄ； uｌｔｒａ－ｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ； ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ

川芎（Ｌｉｇｕｓｔｉｃｕｍ ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ Ｈｏｒｔ．） 為傘形科植物，其干燥根莖為常用的活血化瘀中藥，始載于《神農本草經》，味辛、微苦、性溫，有活血化瘀、理氣止痛、降壓、擴張血管、抗血栓、鎮靜及解痙等作用。常用于頭痛、肋痛、脹痛、風濕痹痛及心腦血管等疾病的治療［１，２］。由于其獨特的藥用價值，引起了藥學研究者的廣泛關注，成為中草藥研究的熱點。對川芎化學成分的研究始于２０世紀３０年代［３］。隨著現代分析手段的進步以及波譜學的發展，對川芎的化學成分有了較為完善的了解。川芎主要含有內酯、酚（酸）性成分及含氮化合物。

超高壓常溫提取技術是新興的提取技術，具有高效、節能、保護提取物生物活性等優點。目前已經被應用于提取多種中藥的有效成分，如人參［４，５］、西洋參［６］、荔枝皮［７］、龍眼皮［８］、蜂膠［９］、綠茶［１０－１２］等。本試驗主要研究川芎中阿魏酸的超高壓最優提取工藝，為川芎有效成分的研究提供一定的依據。

１材料與方法

１．１試驗材料與儀器

川芎（吉林修正藥業集團股份有限公司）；阿魏酸標準品（江西本草天工科技有限責任公司）；甲醇、冰乙酸均為色譜純；其他試劑均為分析純。

ＬＣ２０型高效液相色譜儀［島津國際貿易（上海）有限公司］；ＤＬ７００型超高壓設備（上海大隆機器廠）。

１．２試驗方法

１．２．１色譜條件色譜柱，Ｃ１８（１５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ）；流動相，冰醋酸－甲醇－水（１∶６５∶３４）；檢測波長，３１３ ｎｍ；流速，０．４ ｍＬ／ｍｉｎ；柱溫，４０ ℃。

１．２．２標準曲線的繪制精確稱取阿魏酸標準品３．８ ｇ置于１００ ｍＬ容量瓶中，加甲醇定容至刻度，搖勻，即得阿魏酸標準溶液（０．０３８ ｍｇ／ｍＬ）。吸取該對照品溶液２、４、６、８、１０ μＬ，分別注入高效液相色譜儀，測得峰面積，以對照品為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線（圖１）。得到的回歸方程為Ｙ＝７５２ １８５．３Ｘ－３７５ ９，ｒ２＝ ０．９９９ ９。阿魏酸標準品液相色譜圖見圖２。

１．２．３超高壓提取方法將處理好的原料與溶劑混合后，用塑料袋封好放入高壓容器內，在常溫、適當壓力下保持一定時間后卸壓取出，離心，取上清液備用。

１．２．４回流提取方法參照文獻［１３］精確稱取川芎樣品２．０ ｇ，按１∶８（m∶V，g∶ｍＬ）的固液比加入７０％乙醇，提取２次，每次１．５ ｈ，提取液離心，取上清液備用。

１．２．５測定方法精確吸取待測液１０ μＬ，注入高效液相色譜儀測定峰面積，由標準曲線計算其含量。

阿魏酸提取率（ｍｇ／ｇ）＝■×■

式中，Ｓ為峰面積；Ｖ為定容體積（ｍＬ）；ｖ為進樣量（μＬ）；ｗ為樣品質量（ｇ）。

１．３單因素試驗

通過試驗分別確定常溫超高壓提取的溶媒乙醇體積分數、提取壓力、溶劑用量、提取時間對川芎阿魏酸提取率的影響。①精確稱取１．０ ｇ樣品粉末６份，按固液比１∶５０，分別加入體積分數為２０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９５％的乙醇溶液，在２００ ＭＰａ壓力下保壓２．０ ｍｉｎ，取出后離心，取上清液；②精確稱取１．０ ｇ樣品粉末４份，按固液比１∶４０加入體積分數６０％的乙醇溶液，分別在１００、２００、３００、４００ ＭＰａ下保壓２．０ ｍｉｎ，取出后離心，取上清液；③精確稱取１．０ ｇ樣品粉末４份，分別按固液比１∶２０、１∶４０、１∶６０、１∶８０加入體積分數６０％的乙醇溶液，在２００ ＭＰａ壓力下保壓２．０ ｍｉｎ，取出后離心，取上清液；④精確稱取１．０ ｇ樣品粉末４份，按固液比１∶４０加入體積分數６０％的乙醇溶液，在２００ ＭＰａ下分別保壓１．０、２．０、３．０、４．０ ｍｉｎ，取出后離心，取上清液。

各試驗根據提取液的不同，稀釋到一定的體積，超濾膜過濾后測定阿魏酸提取率。

１．４正交試驗

根據單因素試驗結果，正交試驗主要考察提取壓力、乙醇體積分數、提取時間、固液比４個因素對超高壓提取工藝的影響，每個因素取３個水平，以阿魏酸提取率為考察指標，采用Ｌ９（３４）進行正交試驗，篩選最佳工藝。正交試驗因素和水平見表1。

２結果與分析

２．１單因素試驗結果

２．１．１乙醇體積分數對川芎阿魏酸提取率的影響從圖３可以看出，乙醇體積分數對川芎阿魏酸提取率的影響比較明顯，隨著乙醇體積分數的增加阿魏酸提取率增加，在乙醇體積分數為７０％、８０％時提取率較高，當乙醇體積分數高于８０％時阿魏酸提取率下降。因此，選擇乙醇體積分數為６０％～８０％作為阿魏酸的提取溶劑。

２．１．２提取壓力對川芎阿魏酸提取率的影響從圖４可以看出，在１００～３００ ＭＰａ下，隨著提取壓力的增大川芎阿魏酸提取率也隨之升高，當提取壓力超過３００ ＭＰａ后，阿魏酸的提取率變化不明顯。可能在３００ ＭＰａ壓力下川芎細胞壁已被破壞，溶劑在壓力作用下已完全進入細胞內，并將有效成分基本溶出，所以加大壓力提取率變化不大。因此，選擇壓力２００～４００ ＭＰａ為宜。

２．１．３固液比對川芎阿魏酸提取率的影響從圖５可以看出，隨著固液比的變化，川芎阿魏酸提取率逐漸升高，在固液比為１∶４０后，阿魏酸提取率變化緩慢，基本影響不大，說明在４０倍乙醇用量時，阿魏酸已經基本被溶解出來。因此，選擇固液比為１∶４０為最佳。

２．１．４提取時間對川芎阿魏酸提取率的影響通過試驗發現，隨著提取時間的延長，阿魏酸的提取率基本沒有變化，提取時間對其基本無影響。高壓提取過程中當壓力升高，溶劑在壓力下進入到細胞內部，溶解有效成分，當壓力在瞬間消失后，在壓力差的作用下細胞膨脹爆炸，有效成分被溶出，因此提取時間長短對阿魏酸提取率影響不大。

２．２正交試驗結果

由表２可以看出，根據極差分析，影響川芎阿魏酸提取率的主次因素為Ｂ、Ａ、Ｄ、Ｃ，乙醇體積分數對川芎阿魏酸提取率的影響最大，其次是提取壓力和固液比，提取時間的影響最小，得到的最優組合為Ａ２Ｂ２Ｃ３Ｄ２，即高壓提取最優條件為提取壓力３００ ＭＰａ、體積分數７０％乙醇溶液、提取時間３．０ ｍｉｎ、固液比１∶５０。

２．３驗證試驗

按正交試驗最優工藝條件重復驗證提取３ 次，川芎阿魏酸的提取率依次為０．５２０、０．５２４、０．５２６ ｍｇ／ｇ，平均為０．５２３ ｍｇ／ｇ。說明最優工藝穩定、可行。

２．４與回流提取方法對比試驗

取相同重量的川芎樣品，分別按回流提取和超高壓提取的最優工藝，得到２種提取液。通過測定２種提取方法所得到的阿魏酸含量基本相同，無顯著差異（表４）。從表４可以看出，超高壓提取與回流提取相比，具有提取時間短、提取次數少、不需要加熱，節省能源并避免加熱對成分的破壞。但是從溶劑用量上超高壓提取方法較回流提取要多。

３小結

根據正交試驗結果，結合節約能源等綜合考慮，確定常溫超高壓提取川芎阿魏酸的最優工藝為提取溶劑體積分數７０％乙醇溶液、提取壓力３００ ＭＰａ、固液比１∶５０、提取時間３．０ ｍｉｎ。在最優工藝下，通過測定阿魏酸提取率為０．５２３ ｍｇ／ｇ。與回流提取方法相比較，超高壓提取技術具有常溫不加熱、提取時間短、雜質少、穩定性高、節約能源等優點，作為一種新型的提取工藝，其應用前景廣闊。

參考文獻：

［１］ 范宋玲，張建軍，熊帶水，等．川芎微波提取工藝優選［Ｊ］．中國實驗方劑學雜志，２０１１，１７（１８）：４６－４８．

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［３］ 余昕，朱燁，張春，等．不同干燥方法對川芎不同部位阿魏酸含量的影響［Ｊ］．中國實驗方劑學雜志，２０１２，１８（６）：１００－１０３．

［４］ ＣＨＥＮ Ｒ Ｚ， ＭＥＮＧ Ｆ Ｌ， ＺＨＡＮＧ Ｓ Ｑ， ｅｔ ａｌ． Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｕｌｔｒａｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｎ ｙｉｅｌｄｓ ａｎｄ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ ｆｒｏｍ ｇｉｎｓｅｎｇ［Ｊ］． Ｓｅｐ Ｐｕｒｉｆｉｃ Ｔｅｃｈｎｏｌ， ２００９，６６（2）：３４０－３４６．

［５］ 陳瑞戰，張守勤，王長征．常溫超高壓提取人參皂苷［Ｊ］．化工學報，２００５，５６（５）：９１１－９１４．

［６］ 陳瑞戰，張守勤，王長征，等．超高壓提取西洋參皂苷工藝研究［Ｊ］．農業工程學報，２００５，２１（５）：１５０－１５４．

［７］ ＰＲＡＳＡＤ Ｋ Ｎ， ＹＡＮＧ Ｂ， ＺＨＡＯ Ｍ Ｍ， ｅｔ ａｌ． Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ uｌｔｒａｓｏｎｉｃａｔｉｏｎ ｏｒ hｉｇｈ－ｐｒｅｓｓｕｒｅ eｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ fｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ Lｉｔｃｈｉ ｆｒｕｉｔ ｐｅｒｉｃａｒｐ［Ｊ］． Ｊ Ｆｏｏｄ Ｐｒｏｃｅｓｓ Ｅｎｇ，２００９，３２（6）：８２８－８４３．

［８］ ＰＲＡＳＡＤ Ｋ Ｎ， ＹＡＮＧ Ｅ， ＹＩ Ｃ， ｅｔ ａｌ． Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｍ ｙｉｅｌｄ， ｔｏｔａｌ ｐｈｅｎｏｌｉｃ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｌｏｎｇａｎ ｆｒｕｉｔ ｐｅｒｉｃａｒｐ［Ｊ］． Innovative Food Science & Emerging Technologies，２００９，１０（2）：１５５－１５９．

［９］ ＺＨＡＮＧ Ｓ Ｑ， ＸＩ Ｊ， ＷＡＮＧ Ｃ Ｚ． Ｈｉｇｈ ｈｙｄｒｏｓｔａｔｉｃ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ flａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ ｐｒｏｐｏｌｉｓ［Ｊ］． Ｊ Ｃｈｅｍ Ｔｅｃｈｎｏｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，２００５，８０（1）：５０－５４．

［１０］ ＸＩ Ｊ．Ｃａｆｆｅｉｎｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｇｒｅｅｎ ｔｅａ ｌｅａｖｅｓ ａｓｓｉｓｔｅｄ ｂｙ ｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， ２００９，９４（1）：１０５－１０９．

［１１］ ＸＩ Ｊ， ＳＨＥＮ Ｄ Ｊ，ＺＨＡＯ Ｓ，ｅｔ ａｌ． Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ ｆｒｏｍ ｇｒｅｅｎ ｔｅａ ｌｅａｖｅｓ ｕｓｉｎｇ ａ ｈｉｇｈ ｈｙｄｒｏｓｔａｔｉｃ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ［Ｊ］． Ｉｎｔｅｒ Ｊ Ｐｈａｒｍ，２００９，３８２（1-2）：１３９－１４３．

［１２］ ＸＩ Ｊ， ＺＨＡＯ Ｓ， ＬＵ Ｂ Ｂ， ｅｔ ａｌ． Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｍａｊｏｒ ｃａｔｅｃｈｉｎｓ ｆｒｏｍ ｇｒｅｅｎ ｔｅａ ｂｙ ｕｌｔｒａｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｉｎｔｅｒ Ｊ Ｐｈａｒｍ，２０１０，386（1-２）：２２９－２３１．

［１３］ 崔麗娟，劉玉明．正交試驗法優選川芎中阿魏酸的提取工藝［Ｊ］． 齊魯藥事，２００５，２４（１９）：５６０－５６１．

２結果與分析

２．１單因素試驗結果

２．１．１乙醇體積分數對川芎阿魏酸提取率的影響從圖３可以看出，乙醇體積分數對川芎阿魏酸提取率的影響比較明顯，隨著乙醇體積分數的增加阿魏酸提取率增加，在乙醇體積分數為７０％、８０％時提取率較高，當乙醇體積分數高于８０％時阿魏酸提取率下降。因此，選擇乙醇體積分數為６０％～８０％作為阿魏酸的提取溶劑。

２．１．２提取壓力對川芎阿魏酸提取率的影響從圖４可以看出，在１００～３００ ＭＰａ下，隨著提取壓力的增大川芎阿魏酸提取率也隨之升高，當提取壓力超過３００ ＭＰａ后，阿魏酸的提取率變化不明顯。可能在３００ ＭＰａ壓力下川芎細胞壁已被破壞，溶劑在壓力作用下已完全進入細胞內，并將有效成分基本溶出，所以加大壓力提取率變化不大。因此，選擇壓力２００～４００ ＭＰａ為宜。

２．１．３固液比對川芎阿魏酸提取率的影響從圖５可以看出，隨著固液比的變化，川芎阿魏酸提取率逐漸升高，在固液比為１∶４０后，阿魏酸提取率變化緩慢，基本影響不大，說明在４０倍乙醇用量時，阿魏酸已經基本被溶解出來。因此，選擇固液比為１∶４０為最佳。

２．１．４提取時間對川芎阿魏酸提取率的影響通過試驗發現，隨著提取時間的延長，阿魏酸的提取率基本沒有變化，提取時間對其基本無影響。高壓提取過程中當壓力升高，溶劑在壓力下進入到細胞內部，溶解有效成分，當壓力在瞬間消失后，在壓力差的作用下細胞膨脹爆炸，有效成分被溶出，因此提取時間長短對阿魏酸提取率影響不大。

２．２正交試驗結果

由表２可以看出，根據極差分析，影響川芎阿魏酸提取率的主次因素為Ｂ、Ａ、Ｄ、Ｃ，乙醇體積分數對川芎阿魏酸提取率的影響最大，其次是提取壓力和固液比，提取時間的影響最小，得到的最優組合為Ａ２Ｂ２Ｃ３Ｄ２，即高壓提取最優條件為提取壓力３００ ＭＰａ、體積分數７０％乙醇溶液、提取時間３．０ ｍｉｎ、固液比１∶５０。

２．３驗證試驗

按正交試驗最優工藝條件重復驗證提取３ 次，川芎阿魏酸的提取率依次為０．５２０、０．５２４、０．５２６ ｍｇ／ｇ，平均為０．５２３ ｍｇ／ｇ。說明最優工藝穩定、可行。

２．４與回流提取方法對比試驗

取相同重量的川芎樣品，分別按回流提取和超高壓提取的最優工藝，得到２種提取液。通過測定２種提取方法所得到的阿魏酸含量基本相同，無顯著差異（表４）。從表４可以看出，超高壓提取與回流提取相比，具有提取時間短、提取次數少、不需要加熱，節省能源并避免加熱對成分的破壞。但是從溶劑用量上超高壓提取方法較回流提取要多。

３小結

根據正交試驗結果，結合節約能源等綜合考慮，確定常溫超高壓提取川芎阿魏酸的最優工藝為提取溶劑體積分數７０％乙醇溶液、提取壓力３００ ＭＰａ、固液比１∶５０、提取時間３．０ ｍｉｎ。在最優工藝下，通過測定阿魏酸提取率為０．５２３ ｍｇ／ｇ。與回流提取方法相比較，超高壓提取技術具有常溫不加熱、提取時間短、雜質少、穩定性高、節約能源等優點，作為一種新型的提取工藝，其應用前景廣闊。

參考文獻：

［１］ 范宋玲，張建軍，熊帶水，等．川芎微波提取工藝優選［Ｊ］．中國實驗方劑學雜志，２０１１，１７（１８）：４６－４８．

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［１０］ ＸＩ Ｊ．Ｃａｆｆｅｉｎｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｇｒｅｅｎ ｔｅａ ｌｅａｖｅｓ ａｓｓｉｓｔｅｄ ｂｙ ｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， ２００９，９４（1）：１０５－１０９．

［１１］ ＸＩ Ｊ， ＳＨＥＮ Ｄ Ｊ，ＺＨＡＯ Ｓ，ｅｔ ａｌ． Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ ｆｒｏｍ ｇｒｅｅｎ ｔｅａ ｌｅａｖｅｓ ｕｓｉｎｇ ａ ｈｉｇｈ ｈｙｄｒｏｓｔａｔｉｃ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ［Ｊ］． Ｉｎｔｅｒ Ｊ Ｐｈａｒｍ，２００９，３８２（1-2）：１３９－１４３．

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［１３］ 崔麗娟，劉玉明．正交試驗法優選川芎中阿魏酸的提取工藝［Ｊ］． 齊魯藥事，２００５，２４（１９）：５６０－５６１．

２結果與分析

２．１單因素試驗結果

２．１．１乙醇體積分數對川芎阿魏酸提取率的影響從圖３可以看出，乙醇體積分數對川芎阿魏酸提取率的影響比較明顯，隨著乙醇體積分數的增加阿魏酸提取率增加，在乙醇體積分數為７０％、８０％時提取率較高，當乙醇體積分數高于８０％時阿魏酸提取率下降。因此，選擇乙醇體積分數為６０％～８０％作為阿魏酸的提取溶劑。

２．１．２提取壓力對川芎阿魏酸提取率的影響從圖４可以看出，在１００～３００ ＭＰａ下，隨著提取壓力的增大川芎阿魏酸提取率也隨之升高，當提取壓力超過３００ ＭＰａ后，阿魏酸的提取率變化不明顯。可能在３００ ＭＰａ壓力下川芎細胞壁已被破壞，溶劑在壓力作用下已完全進入細胞內，并將有效成分基本溶出，所以加大壓力提取率變化不大。因此，選擇壓力２００～４００ ＭＰａ為宜。

２．１．３固液比對川芎阿魏酸提取率的影響從圖５可以看出，隨著固液比的變化，川芎阿魏酸提取率逐漸升高，在固液比為１∶４０后，阿魏酸提取率變化緩慢，基本影響不大，說明在４０倍乙醇用量時，阿魏酸已經基本被溶解出來。因此，選擇固液比為１∶４０為最佳。

２．１．４提取時間對川芎阿魏酸提取率的影響通過試驗發現，隨著提取時間的延長，阿魏酸的提取率基本沒有變化，提取時間對其基本無影響。高壓提取過程中當壓力升高，溶劑在壓力下進入到細胞內部，溶解有效成分，當壓力在瞬間消失后，在壓力差的作用下細胞膨脹爆炸，有效成分被溶出，因此提取時間長短對阿魏酸提取率影響不大。

２．２正交試驗結果

由表２可以看出，根據極差分析，影響川芎阿魏酸提取率的主次因素為Ｂ、Ａ、Ｄ、Ｃ，乙醇體積分數對川芎阿魏酸提取率的影響最大，其次是提取壓力和固液比，提取時間的影響最小，得到的最優組合為Ａ２Ｂ２Ｃ３Ｄ２，即高壓提取最優條件為提取壓力３００ ＭＰａ、體積分數７０％乙醇溶液、提取時間３．０ ｍｉｎ、固液比１∶５０。

２．３驗證試驗

按正交試驗最優工藝條件重復驗證提取３ 次，川芎阿魏酸的提取率依次為０．５２０、０．５２４、０．５２６ ｍｇ／ｇ，平均為０．５２３ ｍｇ／ｇ。說明最優工藝穩定、可行。

２．４與回流提取方法對比試驗

取相同重量的川芎樣品，分別按回流提取和超高壓提取的最優工藝，得到２種提取液。通過測定２種提取方法所得到的阿魏酸含量基本相同，無顯著差異（表４）。從表４可以看出，超高壓提取與回流提取相比，具有提取時間短、提取次數少、不需要加熱，節省能源并避免加熱對成分的破壞。但是從溶劑用量上超高壓提取方法較回流提取要多。

３小結

根據正交試驗結果，結合節約能源等綜合考慮，確定常溫超高壓提取川芎阿魏酸的最優工藝為提取溶劑體積分數７０％乙醇溶液、提取壓力３００ ＭＰａ、固液比１∶５０、提取時間３．０ ｍｉｎ。在最優工藝下，通過測定阿魏酸提取率為０．５２３ ｍｇ／ｇ。與回流提取方法相比較，超高壓提取技術具有常溫不加熱、提取時間短、雜質少、穩定性高、節約能源等優點，作為一種新型的提取工藝，其應用前景廣闊。

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