血清淀粉樣蛋白A與類風濕關節炎疾病活動度的相關性研究*

沈 忱 穆 云 劉 娜 邢冬紅 洪程程 魏 蔚 鄭 芳△

血清淀粉樣蛋白A與類風濕關節炎疾病活動度的相關性研究*

沈 忱1穆 云2劉 娜1邢冬紅1洪程程1魏 蔚3鄭 芳1△

目的探討血清淀粉樣蛋白A（SAA）與類風濕關節炎（RA）疾病活動度的相關性及臨床意義。方法收集44例RA患者、35例系統性紅斑狼瘡（SLE）患者、18例骨關節炎（OA）患者及30例正常對照者血清。采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）定量檢測血清中SAA的濃度；魏氏法檢測紅細胞沉降率（ESR）；免疫比濁法檢測C反應蛋白（CRP）的濃度。將血清SAA水平與疾病活動度評分（DAS28）及ESR、CRP等進行相關分析。結果RA患者血清中SAA的水平均高于其他3組（P＜0.05），血清ESR和CRP的濃度分別高于OA和正常對照組，與SLE組相比差異無統計學意義（P ＞0.05）。血清SAA水平分別與DAS28、ESR及CRP水平呈正相關，rs分別為0.790、0.674和0.679（均P＜0.001）。結論SAA可作為評估RA疾病活動度的新的血清學指標。

關節炎,類風濕；血清淀粉樣蛋白A；血沉；C反應蛋白質；紅斑狼瘡,系統性；骨關節炎；疾病活動度

類風濕關節炎（RA）是一種以進行性、侵襲性關節炎為主要臨床表現的慢性炎癥性疾病[1]。RA的治療目標是達到臨床緩解或低疾病活動度。因此，定期監測和評估RA疾病活動度對RA治療方案的選擇、療效評估及預后具有十分重要的意義。目前有多種指標用于測量RA活動度。血清淀粉樣蛋白A（SAA）是一種急性時相蛋白，在炎癥性疾病患者血清中含量明顯升高。目前關于SAA與RA活動度之間關系的研究報道較少。本研究通過分析RA患者血清中SAA水平與28個關節疾病活動度評分（DAS28）等活動度指標的相關性，探討SAA作為評估RA活動度新指標的臨床意義。

1 對象與方法

1.1 研究對象 收集2012年1月—2013年1月于天津醫科大學總醫院風濕免疫科就診的住院患者。活動期RA患者44例，女31例，男13例，年齡56～79歲，平均（57.62±11.45）歲。疾病對照組：同期住院的骨關節炎（OA）患者18例，女14例，男4例，年齡55～67歲，平均（57.31±12.07）歲；系統性紅斑狼瘡（SLE）患者35例，女26例，男9例，年齡56～71歲，平均（56.95±11.34）歲。診斷根據1987年美國風濕病學會（ACR）修訂的RA分類標準、1995年ACR修訂的OA分類標準和1982年ACR修訂的SLE分類標準。正常對照組（HC）：均為同期的健康體檢者，女23例，男7例，年齡54～69歲，平均（57.06±11.71）歲。各組間年齡（F=1.853）、性別（χ2=0.377）差異均無統計學意義（P＞0.05）。本研究已通過天津醫科大學倫理委員會的審查批準，并取得了受試對象的知情同意。

1.2 主要儀器與試劑 SAA檢測使用Multiskan MK3酶標儀，購自上海熱電儀器有限公司。SAA試劑盒購自上海鑫悅生物科技有限公司。C反應蛋白（CRP）檢測使用日立全自動生化分析儀及其配套試劑。

1.3 方法 所有研究對象均于清晨空腹采集靜脈血2 mL，3 000 r/min離心10 min，分離血清，保存于-80℃。血清SAA檢測采用酶聯免疫吸附法（ELISA）。血清紅細胞沉降率（ESR）采用魏氏法檢測，男＜15 mm/1h，女＜20 mm/1h為正常參考值。血清CRP水平采用免疫比濁法檢測，CRP＜8 mg/L為正常參考值。檢查患者雙側近端指間關節、掌指關節、腕關節、肘關節、肩關節及膝關節中疼痛關節數（TJC）和腫脹關節數（SJC），并記錄患者疾病總體疼痛VAS評分，計算疾病活動度評分（DAS28）。DAS28-ESR=0.56×sqrt(TJC)+0.28×sqrt(SJC)+0.7Ln(ESR)+0.014×(VAS)。DAS28范圍從0～10分，得分越高提示疾病活動度越高。

1.4 統計學方法 所有數據采用SPSS 17.0軟件包進行數據分析。計量資料以xˉ±s表示。多組間比較采用單因素方差分析，組間多重比較采用SNK-q檢驗。相關性分析采用Spearman相關。檢驗水準為雙側α=0.05。

2 結果

2.1 各組血清SAA、ESR及CRP比較 見表1。4組間血清SAA含量差異有統計學意義（P＜0.01）。RA組高于SLE、OA及HC組，SLE組高于OA及HC組（均P＜0.05），OA與HC組SAA差異無統計學意義。RA和SLE組血清ESR和CRP值均高于OA和HC組，而RA和SLE組之間、OA和HC組間ESR和CRP差異無統計學意義。

2.2 SAA、DAS28、ESR和CRP相關性分析 SAA與DAS28呈正相關（rs=0.790，P ＜0.001）。 ESR、CRP與DAS28呈正相關（rs分別為0.679和0.431，均P＜0.01），且SAA與ESR和CRP也呈正相關（rs分別為0.674和0.679，均P ＜ 0.01），見圖1。

Table 1 Comparison of serum SAA,ESR and CRP levels between four groups表1 各組間血清SAA、ESR及CRP比較（±s）

Table 1 Comparison of serum SAA,ESR and CRP levels between four groups表1 各組間血清SAA、ESR及CRP比較（±s）

＊＊P ＜ 0.01；a與RA組比較，b與SLE組比較，P＜0.05

組別RA組SLE組OA組HC組F n 44 35 18 30 SAA（μg/L）565.18±346.29 243.37±95.16a134.44±97.51ab144.84±71.93ab19.383**ESR（mm/1h）50.36±14.71 42.33±19.46 20.55±16.13ab11.70±10.65ab26.924**CRP（mg/L）40.85±29.31 38.79±20.55 26.24±18.49ab4.72±3.52ab31.363**

Figure 1 The scatter plots showing the relationship between SAA and DAS28,ESR and CRP圖1 SAA與DAS28、ESR及CRP的相關分析散點圖

3 討論

3.1 RA與疾病活動度 RA具有較高的致畸、致殘率，其治療需密切結合患者的疾病活動程度，因此準確判斷RA的疾病程度和活動性對RA治療、預后及療效評估具有重要的臨床意義。RA疾病活動度的評估工具主要有DAS28、類風濕關節炎疾病活動指數（RADAI）、臨床疾病活動指數（CDAI）等，另外也依靠ESR和CRP等血清學標志物。盡管DAS28是應用最廣泛的活動度評價指標，但目前臨床依然沒有公認的金標準。此外，臨床需要更頻繁地評估RA活動度以監測療效，且臨床評估更趨向于RA患者個性化及多生物標志物綜合應用，即需要更多的血清學指標從多方面進行評估。近年來越來越多的報道指出生物標志物如鈣網織蛋白[2]、白介素（IL）-17[3]等，可用來評判RA的活動程度。

3.2 SAA參與RA炎癥反應 本研究顯示RA患者血清SAA水平高于SLE、OA及正常對照組，與本課題組之前研究結果[4]及O’Hara等[5]報道均一致，提示SAA可能是參與RA炎癥反應的蛋白。SAA是一種高度保守的載脂蛋白，分子質量約為12 ku，主要由肝臟產生。SAA作為主要的急性時相反應物在炎癥刺激4～6 h后，其在血清中的濃度迅速升高1 000倍左右，是非常敏感的炎癥指標。SAA具有多種生物學功能，可作為多種免疫細胞的趨化物，如T細胞、中性粒細胞；同時，SAA還可以顯著增強促炎細胞因子如IL-1、腫瘤壞死因子（TNF）等在患者體內的表達。Okamato等[6]研究發現SAA可通過結合滑膜成纖維細胞表面的糖基化終產物受體（RAGE）激活核因子（NF）-κB途徑，進而誘導IL-6和IL-8的生成。

3.3 SAA與DAS28的關系 O’Hara等[5]研究發現血清SAA水平能夠很好地反映RA的疾病進展，提示SAA可能與RA的疾病活動度相關。DAS28被歐洲抗風濕聯盟（EULAR）推薦用來監測和評估RA疾病活動度[7]。DAS28評分主要根據患者疼痛及腫脹關節數、ESR或CRP計算得出，綜合反映了RA的疾病活動程度。本研究將RA患者血清SAA水平與DAS28進行相關性分析，結果顯示SAA與DAS28呈正相關，提示SAA可作為評估RA疾病活動度的潛在指標。SAA作為一種急性時相反應蛋白已經被用于評估其他各種風濕性疾病的活動度，如強直性脊柱炎[8]、幼年特發性關節炎[9]等。

3.4 SAA與ESR、CRP的關系 ESR和CRP是廣泛應用于臨床的急性時相反應蛋白，在評估RA疾病活動度方面發揮重要作用。本研究結果顯示，ESR和CRP在RA患者血清中表達較高，且均與DAS28存在相關關系，與文獻報道一致[2]。同時，本研究發現RA患者血清SAA水平與ESR、CRP水平也呈正相關，提示SAA作為急性時相反應蛋白與ESR、CRP一同參與RA的炎癥過程，即SAA可作為評估RA活動度的新指標。

綜上所述，RA患者血清SAA的含量顯著高于對照組，其與RA疾病活動度評分DAS28及ESR、CRP均呈正相關，提示SAA可作為評估RA疾病活動度的新的血清學指標。

[1]ScottDL,WolfeF,HuizingaTW.Rheumatoid arthritis[J].Lancet,2010,376(9746):1094-1108.

[2] Ni M,Wei W,Wang Y,et al.Serum levels of calreticulin in correlation with disease activity in patients with rheumatoid arthritis[J].J Clin Immunol,2013,33(5):947-953.

[3]Metawi SA,Abbas D,Kamal MM,et al.Serum and synovial fluid levels of interleukin-17 in correlation with disease activity in patients with RA[J].Clin Rheumatol,2011,30(9):1201-1207.

[4] 穆云,魏蔚,孫續國,等.血清淀粉樣蛋白A在類風濕關節炎患者體內表達的研究[J].中華風濕病雜志,2011,15(10):69-72.

[5] O’Hara R,Murphy EP,Whitehead AS,et al.Acute-phase serum amyloid a production by rheumatoid arthritis synovial tissue[J].Arthritis Res,2000,2(2):142-144.

[6]Okamoto H,Katagiri Y,Kiire A,et al.Serum amyloid A activates nuclear factor-κB in rheumatoid synovial fibroblasts through binding to receptor of advanced glycation end-products[J].J Rheumatol,2008,35(5):752-756.

[7] Aletaha D,Landewe R,Karonitsch T,et al.Reporting disease activity in clinical trials of patients with rheumatoid arthritis:EULAR/ACR collaborative recommendations[J].Arthritis Rheum,2008,59(10):1371-1377.

[8] Jung SY,Park MC,Park YB,et al.Serum amyloid a as a useful indicator of disease activity in patients with ankylosing spondylitis[J].Yonsei Med J,2007,48(2):218-224.

[9] Cantarini L,Giani T,Fioravanti A,et al.Serum amyloid a circulating levels and disease activity in patients with juvenile idiopathic arthritis[J].Yonsei Med J,2012,53(5):1045-1048.

（2013-08-27收稿 2013-10-25修回）

（本文編輯 李鵬）

The Correlation between Serum Amyloid A and Disease Activity in Patients with Rheumatoid Arthritis

SHEN Chen1,MU Yun2,LIU Na1,XING Donghong1,HONG Chengcheng1,WEI Wei3,ZHENG Fang1
1 School of Laboratory Medicine,Tianjin Medical University,Tianjin 300203,China；2 Tianjin Children’s Hospital；3 General Hospital of Tianjin Medical University

ObjectiveTo investigate the correlation between serum amyloid A(SAA)and disease activity(DAS28)in patients with rheumatoid arthritis(RA).MethodsForty-four patients with RA,35 patients with systemic lupus erythematosus(SLE),18 patients with osteoarthritis(OA)and 30 healthy controls(HC)were enrolled in this study.The levels of SAA were measured by ELISA.Erythrocyte sedimentation rate(ESR)was measured by the Westergren method.The value of serum C reactive protein(CRP)was examined by immunonephelometry assay.The correlation between SAA and DAS28,ESR and CRP was assessed,respectively.ResultsThe SAA levels were significantly higher in RA group than those of SLE,OA,and HC groups(P＜0.05).The serum ESR and CRP levels were both higher in RA group than those of OA and HC groups(P＞0.05),but there was no significant difference between RA group and SLE group.There was positive correlation between SAA and DAS28,ESR,and CRP levels(rs=0.790,P＜0.001;rs=0.674,P＜0.001;rs=0.679,P=0.004),respectively.Conclusion SAA may be a new serological marker to assess disease activity in RA.

arthritis,rheumatoid；serum amyloid A protein；blood sedimentation；C-reactive protein；lupus erythematosus,systemic；osteoarthritis；disease activity

R593.22 【

】 A 【DOI】 10.3969/j.issn.0253-9896.2014.03.016

*教育部博士點基金資助項目（項目編號：20101202110008）

1天津醫科大學醫學檢驗學院（郵編300203）；2天津市兒童醫院檢驗科；3天津醫科大學總醫院風濕免疫科

△通訊作者 E-mail:zhengfang@tijmu.edu.cn