美國金星大圓葉橡皮樹的組培研究

作者簡介：田松英（1964—），女，山東諸城人,研究員,主要從事園林綠化工作。中圖分類號：S688文獻標識碼：B文章編號：16749944(2014)05009702

1引言

橡皮樹是桑科榕屬植物,在北方為盆栽觀賞花卉,橡皮樹因管理粗放,適應性強,葉片光亮等優(yōu)點備受人們喜歡。美國金星大圓葉是中科院篩選的優(yōu)良橡皮樹品種,其株型美觀,葉橢圓近圓形,葉片橢圓近圓形,長6~8cm,寬5~7cm,深綠色,有光澤。托葉紅色。適于中小型盆栽,是優(yōu)良的室內(nèi)觀葉植物。對其擴繁推廣具有較高的經(jīng)濟效益和社會效益。為此筆者選擇了組培途徑批量生產(chǎn)橡皮樹脫毒種苗,滿足園藝栽培的大量需求。

2材料與方法

2.1實驗材料來源和培養(yǎng)

實驗材料來源于北京中科院種苗,引進的種苗經(jīng)過1個月的正常管理,生長正常后取其生長飽滿的嫩莖和芽尖做外植體。

2.2外植體的處理方法

用刀片采取外植體后先用清水加洗潔精清洗干凈,再用蒸餾水沖洗5遍,瀝干水后用0.1%氯化汞水溶液消毒5min,用蒸餾水沖洗干凈放入無菌室的超凈工作臺上準備接種。

2.3培養(yǎng)基的篩選

分化培養(yǎng)基的篩選:選用基本培養(yǎng)基MS+蔗糖40g+瓊脂條8g+不同濃度的6-BA+KT+2-4D。

生根培養(yǎng)基的篩選:選用基本培養(yǎng)基1/2MS+20g蔗糖+8g克瓊脂條+不同濃度的IAA和IBA。

2.4試驗流程

母液的配制(大量元素、微量元素、鐵鹽、有機物、激素)→制培養(yǎng)基→外植體選擇處理→消毒→接種→培養(yǎng)→數(shù)據(jù)匯總→分析討論。

2.5實驗內(nèi)容

根據(jù)表1和表2的培養(yǎng)基配比進行最佳培養(yǎng)基篩選,篩選出橡皮樹分化和生根的最佳植物激素濃度配比。確定最佳配方后進行增殖繼代培養(yǎng),繼代苗達到一定數(shù)量后可進行批量生根培養(yǎng),獲得栽培種苗。

表1分化培養(yǎng)基激素濃度(mg/L)配比

配比序號6-BAKT2-4.D10.50.250.121.00.750.131.51.00.140.51.00.151.00.50.161.50.750.1

表2生根培養(yǎng)基激素濃度(mg/L)配比

配比序號IAAIBA10.250.120.50.130.250.240.50.2

3組織培養(yǎng)實驗結(jié)果與分析

3.1增殖培養(yǎng)階段

通過多次實驗數(shù)據(jù)記錄,通過加權(quán)平均分析獲得表3,從表中可見配比5應是最佳培養(yǎng)方案,即:MS+蔗糖40g/L+瓊脂條8g/L+6-BA1.0mg/L+KT0.5mg/L+2-4D0.1 mg/L 為繼代增殖培養(yǎng)基。培養(yǎng)基pH值6.0。

表3不同激素濃度(mg/L)配比分化效果

培養(yǎng)序號分化程度繼代周期繼代系數(shù)1差501.52較好2453一般4044一般3535好2076一般303

3.2誘導生根階段

在生根培養(yǎng)時采用MS(大量元素1/2)+ 20g蔗糖+8g克瓊脂條+不同濃度的IAA和IBA。通過交叉實驗(表4)獲得最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS大量元素+IAA05mg/L+IBA01-02mg/L+蔗糖20g/L+瓊脂8g/L,pH值58~60。

3.2煉苗與移栽階段

生根培養(yǎng)基中的小苗根系發(fā)育完好,半數(shù)根長達到1.2cm以上時可準備煉苗。將煉苗的試管苗取出,洗凈培養(yǎng)基后移入珍珠巖獲蛭石中培養(yǎng)。初期的試管苗比較嬌嫩,一定要注意溫度、光照和濕度的調(diào)節(jié),這一時期是成功的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。在珍珠巖(蛭石)培養(yǎng)15~20d后,正式移栽到消毒后的培養(yǎng)基質(zhì)中進行栽培管理。

表4不同濃度(mg/L2)激素對生根的誘導

IAAIBA生根時間生根率0.250.112700.50.17960.250.210830.50.2795

4結(jié)論與討論

通過對不同激素濃度的培養(yǎng)基的實驗對比,篩選出了最佳橡皮樹分化的培養(yǎng)基配方是:MS+2.4-D0.1mg/L+6-BA1.0mg/L+KT0.5mg/L+蔗糖40g/L+瓊脂條8g/L。pH值為5.8~6.0。培養(yǎng)室溫度18~25°的條件下30d可繼代一次,平均每瓶可繼代5瓶以上。最佳生根的培養(yǎng)基配方是:1/2MS大量元素+IAA0.5mg/L+IBA0.1~0.2mg/L+蔗糖20g/L+瓊脂8g/L。pH值5.8~6.0。

鐵鹽的配制:在配制鐵鹽時一定注意水浴加熱慢慢融化螯合。

最佳培養(yǎng)流程:母液的配制、培養(yǎng)基的制作(包括培養(yǎng)基的pH值調(diào)試)、培養(yǎng)基消毒(消毒后穩(wěn)定12h以后接種最好)接種室用紫外線消毒20min以上,接種前20min打開超凈工作臺的風機,需接種的外植體在接種后放入緩沖間,然后在培養(yǎng)室內(nèi)進行分化(生根)培養(yǎng)。

煉苗:組培苗的煉苗方式應該遵循循序漸進式,先打開培養(yǎng)器皿的封口膜,幾小時后用鑷子小心取出植株用清水清洗干凈根部的培養(yǎng)基,再用蛭石或珍珠鹽在栽植育苗盤內(nèi),噴水后在實驗室內(nèi)穩(wěn)定3~4d,然后放入溫室內(nèi)煉苗(不能暴曬),兩周后脫毒苗生長正常,可以入消毒后的培養(yǎng)土中正常養(yǎng)護。成活率在95%以上。為了節(jié)約成本可以對生根培養(yǎng)基進行回收利用。根據(jù)實驗數(shù)據(jù)分析,經(jīng)過脫毒的橡皮樹繁殖速度快,根系發(fā)達,抗性強,植株整齊,株型美觀,長勢旺盛,且易形成批量生產(chǎn),生根苗當年生長量在15cm左右,兩年就能成為商品出售。

參考文獻：

［1］ 陶秀冬,李康,楊秀文,等.橡皮樹組織培養(yǎng)及快繁技術(shù)研究［J］.新疆農(nóng)業(yè)科學,1996(6).

［2］ 黃毅.食用菌生產(chǎn)理論與實踐［M］.

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