馬錢子堿、馬錢子粉及九分散抗炎鎮痛的藥效學比較研究

鄭德俊，潘婭，李晶

(1.廣州市第一人民醫院，廣東 廣州 510600;2.華南理工大學化學與化工學院，廣東 廣州 510640)

馬錢子(semen strychnine)是馬錢科植物馬錢(Strychnos nuxvomica L)的成熟種子［1］，具散結消腫、通絡止痛之功效［2］，是治療類風濕性關節炎(RA)的有效藥物，其質地堅硬，臨床常粉碎后使用，其所含生物堿類成分毒性大，常配伍其他藥物作為復方運用。九分散是以馬錢子為君藥，配伍麻黃、乳香、沒藥組成的復方［3］，具活血散瘀、消腫止痛之功，用于治療風濕痹癥［4］。類風濕性關節炎以關節腫脹、疼痛難忍為臨床表現，臨床治療主要以抗炎、鎮痛為主，馬錢子、九分散中起鎮痛、抗炎作用的有效成分及毒性成分是其生物堿類，包含馬錢子堿(Brucine)、士的寧堿［5－6］，其中馬錢子堿的毒性比士的寧堿小。現有研究也表明，馬錢子堿有良好鎮痛、抗炎作用，但馬錢子堿與原藥、復方療效對比如何，提純之后的單體成分藥效是增強還是減弱，尚未見相關報道。

本研究通過經典抗炎鎮痛實驗對單體成分(馬錢子堿)、單味藥(馬錢子粉)及其復方(九分散)進行了藥效學實驗比較。在同劑量條件下，比較馬錢子堿與原藥及復方在鎮痛、抗炎作用上的優劣，研究單體成分藥效作用的特點，兼顧安全性及有效性，為進一步合理運用、開發治療RA鎮痛藥提供理論依據。

1 材料

馬錢子購于廣州清平藥材市場，經廣州中醫藥大學鑒定教研室鑒定符合《中國藥典》相關規定，馬錢子粉由馬錢子直接粉碎成粗粉制成;馬錢子堿由馬錢子經提取濃縮精制而成(自制，含量97.8%);九分散(北京同仁堂股份有限公司同仁堂制藥廠);其余試劑均為分析純。

昆明種小鼠，體質量(20±2)g，由廣州中醫藥大學實驗動物中心提供，動物許可證號 SCXK(粵)2008－0020。

2 實驗方法

2.1 對熱板法［7］致痛小鼠的鎮痛作用 取雌性小鼠，放入(55±0.5)℃熱板水浴中，以舔后足作為疼痛反應指標，預測小鼠痛閾值以大于5s、小于30s為合格小鼠，將痛閾合格的40只小鼠隨機分為四組。在室溫條件下，分別口服灌胃生理鹽水、馬錢子粉、馬錢子堿、九分散，生理鹽水組灌服等量生理鹽水，其他三組劑量以臨床劑量為標準，按照人與小鼠劑量換算，確定馬錢子堿劑量為0.48mg/kg，以含馬錢子堿量計算馬錢子粉、九分散劑量，分別為 20.38mg/kg、17.46mg/kg。四組連續給藥7天，每天1次，于末次給藥0.5h、1h分別測定每只小鼠痛閾值。如60s仍無舔足反應，則以60s計。

2.2 對冰醋酸［8］致痛小鼠扭體反應的鎮痛作用 取小鼠40只，雌雄各半，分組及給藥方法同2.1項下。連續給藥7天，于第7天腹腔注射0.6%醋酸0.2ml/10g，同時用秒表計時，記錄各鼠出現第1次扭體反應的時間(即潛伏期)及10min內各鼠的扭體次數。以下列公式計算藥物的鎮痛百分率(%)。

2.3 對小鼠耳腫脹［9］的抗炎作用 取雄性小鼠40只，分組及給藥方法同2.1項下。連續給藥7天后，第8天每只小鼠右耳均勻涂二甲苯0.05ml/只，致炎15min，將小鼠脫頸椎處死，用直徑8mm的打孔器沖下左右耳廓，分別在電子天平上稱重后，按以下公式計算耳腫脹度和抑制率。

2.4 統計學處理

所有數據均輸入SPSS 15.0軟件進行統計分析，各組計量數據以(s)表示，兩組之間的比較采用t檢驗，P＜0.05表示差異具有統計學意義。

3 結果與討論

3.1 對熱板法致痛小鼠的鎮痛作用 馬錢子粉、馬錢子堿與九分散對熱板致痛小鼠的鎮痛作用影響結果見表1。

表1 對熱板法致痛小鼠的鎮痛作用(n=10，s)

表1 對熱板法致痛小鼠的鎮痛作用(n=10，s)

注:與生理鹽水組相比，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01;組間比較，#P ＜0.05，##P ＜0.01。

組別 給藥前的痛閾(s)給藥后的痛閾(s)0.5h 1h生理鹽水組16.2 ±1.67 18.7 ±1.56 16.2 ±1.95馬錢子粉組 15.3 ±1.72 23.31 ±0.93＊＊ 22.5 ±0.42＊＊馬錢子堿組 16.7 ±1.34 38.3 ±1.33＊＊## 35.2 ±1.74＊＊##九分散組 16.5 ±2.39 25.4 ±3.40＊＊# 22.9 ±0.26＊＊

與生理鹽水組相比，給藥前各組小鼠的基礎痛閾值差異無統計學意義(P＞0.05)，給藥后組間具有顯著差異，有統計學意義(P＜0.01)。三組給藥組相比，三組制劑均于0.5h后提高熱板致痛小鼠的痛閾值，1h后降低，其中0.5、1h后馬錢子堿的鎮痛作用均優于馬錢子粉組及九分散組(P＜0.01)，而0.5h九分散組作用優于馬錢子粉組(P＜0.05)，1h后兩組鎮痛作用相當，無顯著性差異(P＞0.05)。結果表明，馬錢子堿是鎮痛作用的主要成分，能明顯提高小鼠痛閾值，具顯著鎮痛作用，且起效時間快，維持時間久，單藥及復方配伍對熱板法致痛小鼠的鎮痛作用不及單體成分，復方的鎮痛作用優于單藥。

3.2 對冰醋酸致痛小鼠扭體次數的鎮痛作用 對冰醋酸致痛小鼠扭體次數的鎮痛作用結果見表2。

表2 對冰醋酸致痛小鼠扭體次數的鎮痛作用(n=10，s)

表2 對冰醋酸致痛小鼠扭體次數的鎮痛作用(n=10，s)

注:與生理鹽水組相比，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01;組間比較，#P ＜0.05，##P ＜0.01。

組別 扭體次數 鎮痛百分率(%)45.8 38.4 ±1.61 －馬錢子粉組 21.5±4.32＊＊ 44.0馬錢子堿組 15.3 ±1.37＊＊## 60.2九分散組 20.8 ±1.84＊＊生理鹽水組

結果表明，與生理鹽水組相比，給藥組均具顯著性差異，能抑制冰醋酸所致的小鼠扭體反應，減少小鼠扭體次數，差異具統計學意義(P＜0.01)。三組給藥組相比，馬錢子堿組鎮痛百分率最高為60.2%，優于九分散組的45.8%及馬錢子粉組的44.0%，具顯著性差異(P＜0.01)，而九分散組與馬錢子粉組作用相當，無顯著性差異(P＞0.05)，說明單味馬錢子堿具有明顯的鎮痛作用，單藥及復方配伍對冰醋酸致痛小鼠扭體次數的鎮痛作用不及單體成分，復方與單藥作用相當。

3.3 對小鼠耳腫脹的抗炎作用 對小鼠耳腫脹的抗炎作用結果見表3。

表3 對小鼠耳腫脹的抗炎作用(n=10，s)

表3 對小鼠耳腫脹的抗炎作用(n=10，s)

注:與生理鹽水組相比，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01;組間比較，#P ＜0.05，##P ＜0.01。

組別 耳腫脹度(mg)抑制率(%)55.3 22.6 ±1.22 －馬錢子粉組 15.4±2.71＊＊ 36.6馬錢子堿組 11.7 ±1.01＊＊## 48.2九分散組 10.1 ±1.15＊＊##生理鹽水組

結果表明，與生理鹽水組對比，三組均能明顯抑制二甲苯引起的小鼠耳腫脹，具有顯著性差異，有統計學意義(P＜0.01)。三組相比，九分散的抗炎抑制率作用較優，為55.3%，優于馬錢子堿組的48.2%及馬錢子粉組的 36.6%，具有顯著性差異(P＜0.05，P＜0.01)。而馬錢子堿組抗炎作用明顯優于馬錢子粉組，具有顯著性差異(P＜0.01)，說明復方對小鼠耳腫脹的抗炎作用明顯優于單體成分及單味藥，而馬錢子堿抗炎療效要明顯優于馬錢子粉。

4 結論

馬錢子具有散結消腫止痛功效，是治療風濕痹癥的良藥，因其有大毒，臨床使用安全范圍小。九分散是以馬錢子為主藥的經典方，起效時間快，療效確切，因含有馬錢子口服給藥副作用大，且散劑劑量不易控制易引起中毒。因此無論單藥還是復方，盡管療效顯著，但其毒副作用都影響了在臨床的使用范圍。馬錢子堿是馬錢子的有效成分，其毒性只有同類生物堿士的寧堿的1/8 ～1/30［10］，安全性高，因此對馬錢子堿的鎮痛、抗炎作用進行研究更具有開發意義和價值。

本研究通過經典鎮痛實驗，比較了馬錢子堿與原藥粉及其復方的鎮痛作用。研究表明，馬錢子堿鎮痛作用顯著，起效快，維持時間久，0.5、1h后對熱板致痛小鼠及冰醋酸致痛小鼠扭體反應的鎮痛作用均優于原藥粉及九分散(P＜0.01)，提示鎮痛是馬錢子堿的主要功效，提純的單體優于未提純的原藥，也優于復方配伍的九分散，在鎮痛作用上，可單獨運用馬錢子堿進行止痛治療。

抗炎實驗結果表明，馬錢子堿對二甲苯引起的小鼠耳腫脹抗炎抑制率為48.2%，低于九分散的55.3%(P＜0.05)，優于原藥粉及生理鹽水組，具有顯著性差異(P＜0.01)，表明中藥的復方配伍增強了抗炎作用，方中其余三藥通過協同促進作用增強了馬錢子的抗炎療效，體現出中藥復方配伍的優勢。抗炎結果說明，在抗炎作用上，九分散具有綜合優勢，要優于單體成分或單藥，提純的單體成分的抗炎作用要顯著優于原藥粉。

從藥效結果考慮，馬錢子堿、馬錢子粉、九分散均具有抗炎、鎮痛作用，其中馬錢子堿的鎮痛作用顯著，而九分散的抗炎作用較強，兩者的抗炎、鎮痛作用均優于馬錢子粉，表現出單一成分和復方的各自優勢，可根據臨床用藥的目的分別選擇單體或復方進行對癥治療。從制劑成型角度考慮，復方成分復雜，提取、制備、純化、成型工藝均較為復雜，散劑劑量不易準確控制，而單體成分制備、工藝、劑型設計簡便，劑量容易準確控制。從安全性角度考慮，采用單體成分用藥可減少原藥粉及復方中其他生物堿類成分的毒性反應，同時也能克服劑量不準造成的毒副作用。綜合比較，馬錢子堿在鎮痛作用上具有顯著優勢，可提高安全性及有效性，具有較好的研究價值，有望進一步開發成鎮痛制劑，發揮其高效的止痛作用。

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