金福菇母種、原種培養基篩選試驗

李守勉+李明+田景花

摘要：對金福菇母種、原種培養基配方進行了篩選，試驗結果表明：金福菇的最佳母種培養基為4號培養基（馬鈴薯100 g，棉籽殼100 g，玉米面5 g，牛糞40 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，水1 000 mL，pH值自然）；金福菇最佳原種培養基為3號（小麥籽粒98%，石膏2%）。

關鍵詞：金福菇；母種；原種；培養基；篩選

中圖分類號： S646.104文獻標志碼： A文章編號：1002-1302（2014）06-0232-02

收稿日期：2014-02-21

基金項目：河北省現代農業產業技術體系食用菌創新團隊項目。

作者簡介：李守勉（1978—），女，河北泊頭人，碩士，博士研究生，講師，主要從事食用菌生物技術與遺傳育種研究。Tel：（0312）7528487；E-mail：yylsm@hebau.eu.cn。金福菇（Tricholoma lobayensc Heim）別稱巨大口蘑、大白口蘑、洛巴伊口蘑，屬傘菌目口蘑科（白蘑科）口蘑屬（白蘑屬）[1]。金福菇是一種珍貴天然保健食品，是目前我國正處于開發中的珍稀食用菌之一，有“菌中珍品”之美譽[2]。金福菇屬高溫型食用菌，在夏季缺菇時節上市，為夏季食用菌市場的一枝獨秀，極具市場前景。到目前為止，金福菇的人工馴化栽培仍停留在試驗性階段，經濟效益并不十分理想，主要原因是金福菇出菇率低，生物學效率不高，經濟效益不理想[3]。目前栽培技術方面最主要的問題是栽培周期長，尤其是發菌時間長[4]。選擇合適的培養基是提高金福菇產量及品質的關鍵措施之一。金福菇菌絲雖然能在常規PDA培養基、常規原種培養基上生長，但長速慢，菌絲稀疏、長勢差[5]。本試驗對金福菇母種、原種培養基進行了配方篩選試驗，旨在獲得金福菇最適母種、原種培養基，解決生產中金福菇菌絲生長緩慢的難題，縮短栽培周期，為栽培金福菇培養料的選擇提供理論依據，使經濟效益最大化。

1材料與方法

1.1試驗供試菌株

供試菌株為“金福菇1號”，引自河北大學食藥用菌研究所。

1.2培養基配方

1.2.1母種培養基配方

1.2.1.1母種培養基初選配方A（PDA培養基）：馬鈴薯 200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，水 1 000 mL，pH值自然；B：馬鈴薯100 g，棉籽殼100 g，玉米面 5 g，葡萄糖20 ，瓊脂20 g，水 1 000 mL，pH值自然；C：馬鈴薯100 g，棉籽殼100 g，玉米面5 g，牛糞20 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，水1 000 mL，pH值自然；D：馬鈴薯100 g，棉籽殼100 g，玉米面5 g，牛糞20 g，葡萄糖 20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀 3 g，硫酸鎂1.5 g，水1 000 mL，pH值自然；E：馬鈴薯100 g，棉籽殼100 g，玉米面5 g，牛糞 50 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，水1 000 mL，pH值自然；F：馬鈴薯100 g，棉籽殼100 g，玉米面5 g，牛糞50 g，葡萄糖20 g，瓊脂 20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，水1 000 mL，pH值自然。

1.2.1.2母種培養基復選配方1號：馬鈴薯100 g，棉籽殼100 g，玉米面5 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，水1 000 mL，pH值自然；2號：馬鈴薯100 g，棉籽殼100 g，玉米面5 g，牛糞20 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，水1 000 mL，pH值自然；3號：馬鈴薯100 g，棉籽殼100 g，玉米面5 g，牛糞30 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，水1 000 mL，pH值自然；4號：馬鈴薯100 g，棉籽殼100 g，玉米面5 g，牛糞40 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，水 1 000 mL，pH值自然；5號：馬鈴薯100 g，棉籽殼100 g，玉米面5 g，牛糞45 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，水1 000 mL，pH值自然；6號：馬鈴薯100 g，棉籽殼100 g，玉米面5 g，牛糞100 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，水1 000 mL，pH值自然。

1.2.2原種培養基配方Ⅰ號：棉籽殼83%，麩皮15%，石膏1%，蔗糖1%；Ⅱ號：木屑83%，麩皮15%，石膏1%，蔗糖1%；Ⅲ號：小麥籽粒98%，石膏2%；Ⅳ號：小麥籽粒93%，木屑5%，石膏2%；Ⅴ號：小麥籽粒93%，牛糞5%，石膏2%。

1.3試驗方法

1.3.1母種培養基配方篩選試驗[6]按常規母種培養基方法進行配制，將馬鈴薯、棉籽殼、玉米面、牛糞等按照配方要求稱取一定量，加入一定比例水中小火煮沸30 min，用8層紗布過濾，將設計的6種培養基按照配方配制好，分裝到直徑為 9 cm 的培養皿（培養基量為30 mL）中，每個配方設置6個重復，滅菌40 min。冷涼后接種，從同步活化的母種中取直徑 3 mm、厚0.4 mm的金福菇菌絲圓片接種于培養皿中央，置于 27 ℃ 恒溫培養箱中培養。當任意一個培養基配方中的菌絲長滿培養皿時，結束培養，記錄菌絲生長時間，測量菌落半徑，計算菌絲生長速度，觀察菌絲形態及其長勢，結果作方差分析，進行顯著性測驗。

菌絲生長速度（mm/d）=菌落半徑（mm）/ 生長時間（d）。

1.3.2原種培養基配方試驗[7]原種采用750 mL菌種瓶，每瓶裝150 g干料，松緊度為上緊下松，高壓滅菌2 h，冷卻至室溫時接種，每支母種接5瓶原種，每個配方接20瓶，接種后在27 ℃培養室黑暗下培養，定時記錄菌絲生長速度，觀察菌絲形態及其長勢，結果作方差分析，綜合分析確定最適配方。endprint

菌絲生長速度（mm/d）=培養料高度（mm）/滿瓶時間（d）。

2結果與分析

2.1母種培養基配方篩選試驗

2.1.1母種培養基配方初篩結果從表1可以看出，金福菇菌絲在不同配方的母種培養基上均能生長，但生長速度和長勢不同。不同母種培養基上菌絲生長由快到慢的順序為F>A>E>D>B>C，F與A培養基生長最快且兩者差異不顯著，而B、C菌絲長速最慢且極顯著慢于F、A培養基配方。從菌絲顏色和長勢來看，D、F培養基的菌絲潔白、濃密，生長勢最好，A培養基的菌絲灰白、稀疏，生長勢最差。

金福菇菌絲在不同母種培養基上的生長速度及生長勢比較

培養基生長速度

（cm/d）菌絲生長勢菌絲色澤差異顯著性0.050.01FAEDBC0.2700.2600.2550.2450.2450.240++++++++++++++++++潔白灰白潔白潔白白潔白aabbcbcccAABBCBCCC注：“++++”菌絲濃密，“+++”菌絲較濃密，“++”菌絲一般，“+”菌絲稀疏。

2.1.2母種培養基配方的復篩結果通過初篩F培養基為最佳培養基，其次是D培養基，在D、F培養基基礎上，進一步調整牛糞的添加量，進行配方設計，試驗結果見表2。從表2可以看出，金福菇菌絲在不同比例牛糞母種培養基上，除1號培養基生長勢較差外，其他幾種配方在菌絲密度、色澤、生長勢等方面差異均不明顯；4號培養基菌絲長速最快，并顯著快于其他培養基配方，其次為3號、6號培養基菌絲長速較快，4號牛糞母種培養基最適宜金福菇菌絲的生長。

金福菇不同母種復篩培養基的生長速度及生長勢比較

培養基生長速度

（cm/d）菌絲生長勢菌絲色澤差異顯著性0.050.014號3號6號1號2號5號0.300.280.280.260.250.24+++++++++++++++++++++++潔白潔白潔白潔白潔白潔白abbbcccAABABBBB注同表1。

2.2原種培養基配方篩選結果

，金福菇菌絲體在不同原種培養基上生長有所差異。菌絲長速由快到慢依次為Ⅲ號>Ⅴ號>Ⅳ號>Ⅰ號>Ⅱ號，且Ⅲ號、Ⅴ號、Ⅳ號原種培養基菌絲生長速度均較快，三者之間無顯著性差異，但均顯著快于Ⅰ號、Ⅱ號培養基。從菌絲生長勢和菌絲顏色來看，Ⅴ號培養基菌絲潔白濃密、生長勢最好，Ⅰ號、Ⅲ號培養基菌絲較白、生長勢較好，Ⅱ號、Ⅳ號培養基菌絲灰白、生長勢較差。 不同培養基菌絲污染率由低到高為Ⅳ號<Ⅲ號<Ⅱ號<Ⅰ號<Ⅴ號，Ⅳ號培養基污染率最低，其次是Ⅲ號培養基，且Ⅲ號、Ⅳ號培養基污染率顯著低于其他培養基。從菌絲長速、生長勢、污染率和菌絲色澤綜合起來比較，Ⅲ號培養基菌絲長速最快、污染率低，為金福菇最佳原種培養基。

金福菇菌絲在不同原種培養基上生長速度及生長勢比較

培養基生長速度

（cm/d）菌絲生長勢菌絲色澤污染率

（%）Ⅲ號Ⅴ號Ⅳ號Ⅰ號Ⅱ號0.18a0.17a0.16ab0.15b0.11c+++++++++]++++++較白潔白灰白較白灰白9d35a8d20b15bc

3結論與討論

金福菇母種培養基比較試驗結果表明，金福菇在添加牛糞的草腐菌母種培養基上長勢明顯好于其他培養基，菌絲長速也較快。試驗又設計了添加不同比例的牛糞量進一步對金福菇母種培養基進行篩選，篩選出配方中加入40 g的牛糞和微量元素使金福菇菌絲的生長速度最快，長勢也較好；但試驗中牛糞添加量設計梯度為10 g，需進一步設計將牛糞添加量梯度降為5 g進行試驗。

金福菇原種階段試驗結果表明，金福菇的最適原種培養基為小麥籽粒+石膏的配方。加牛糞的培養基雖然生長速度也較快，生長勢也最好，但是可能由于牛糞含氮量高，添加牛糞后氮源過多，培養料抗雜菌能力差，污染率升高[8]，所以該配方不適于生產。但可進一步降低牛糞添加量，或將牛糞和秸稈腐熟后再添加，以降低污染率，此結論需進一步試驗進行驗證。

參考文獻：

[1]王桂芹，王志. 金福菇菌株間品比試驗[J]. 中國林副特產，2008（2）：32-34.

[2]項壽南，鄭巧平，劉德云，等. 金福菇栽培技術要點探討[J]. 食用菌，2008，30（3）：48-48.

[3]高珠清. 巨大口蘑優質高產栽培技術[J]. 食用菌，2004，26（5）：33.

[4]劉鴻高，李濤，王元忠.不同培養基對巨大口蘑菌絲生長的影響[J]. 中國食用菌，2006，25（6）：34-35.

[5]劉鴻高，沙本才，張紅粉，等. 大白口蘑生物學特性研究[J]. 中國食用菌，2007，26（1）：46-49.

[6]姚太梅. 平菇單孢雜交及后代篩選[D]. 保定：河北農業大學，2008：13-15.

[7]王賀祥，李明. 食用菌栽培學[M]. 北京：中國農業大學出版社，2008：42.

[8]田景花，楊旭，李明，等. 黃傘菌種培養基配方篩選研究[J]. 北方園藝，2013（2）：137-140.黃文娟，張越，梁繼業，等. 光-溫耦合條件對3種豆科植物種子萌發特性的影響[J]. 江蘇農業科學，2014，42（6）：234-237.endprint

菌絲生長速度（mm/d）=培養料高度（mm）/滿瓶時間（d）。

2結果與分析

2.1母種培養基配方篩選試驗

2.1.1母種培養基配方初篩結果從表1可以看出，金福菇菌絲在不同配方的母種培養基上均能生長，但生長速度和長勢不同。不同母種培養基上菌絲生長由快到慢的順序為F>A>E>D>B>C，F與A培養基生長最快且兩者差異不顯著，而B、C菌絲長速最慢且極顯著慢于F、A培養基配方。從菌絲顏色和長勢來看，D、F培養基的菌絲潔白、濃密，生長勢最好，A培養基的菌絲灰白、稀疏，生長勢最差。

金福菇菌絲在不同母種培養基上的生長速度及生長勢比較

培養基生長速度

（cm/d）菌絲生長勢菌絲色澤差異顯著性0.050.01FAEDBC0.2700.2600.2550.2450.2450.240++++++++++++++++++潔白灰白潔白潔白白潔白aabbcbcccAABBCBCCC注：“++++”菌絲濃密，“+++”菌絲較濃密，“++”菌絲一般，“+”菌絲稀疏。

2.1.2母種培養基配方的復篩結果通過初篩F培養基為最佳培養基，其次是D培養基，在D、F培養基基礎上，進一步調整牛糞的添加量，進行配方設計，試驗結果見表2。從表2可以看出，金福菇菌絲在不同比例牛糞母種培養基上，除1號培養基生長勢較差外，其他幾種配方在菌絲密度、色澤、生長勢等方面差異均不明顯；4號培養基菌絲長速最快，并顯著快于其他培養基配方，其次為3號、6號培養基菌絲長速較快，4號牛糞母種培養基最適宜金福菇菌絲的生長。

金福菇不同母種復篩培養基的生長速度及生長勢比較

培養基生長速度

（cm/d）菌絲生長勢菌絲色澤差異顯著性0.050.014號3號6號1號2號5號0.300.280.280.260.250.24+++++++++++++++++++++++潔白潔白潔白潔白潔白潔白abbbcccAABABBBB注同表1。

2.2原種培養基配方篩選結果

，金福菇菌絲體在不同原種培養基上生長有所差異。菌絲長速由快到慢依次為Ⅲ號>Ⅴ號>Ⅳ號>Ⅰ號>Ⅱ號，且Ⅲ號、Ⅴ號、Ⅳ號原種培養基菌絲生長速度均較快，三者之間無顯著性差異，但均顯著快于Ⅰ號、Ⅱ號培養基。從菌絲生長勢和菌絲顏色來看，Ⅴ號培養基菌絲潔白濃密、生長勢最好，Ⅰ號、Ⅲ號培養基菌絲較白、生長勢較好，Ⅱ號、Ⅳ號培養基菌絲灰白、生長勢較差。 不同培養基菌絲污染率由低到高為Ⅳ號<Ⅲ號<Ⅱ號<Ⅰ號<Ⅴ號，Ⅳ號培養基污染率最低，其次是Ⅲ號培養基，且Ⅲ號、Ⅳ號培養基污染率顯著低于其他培養基。從菌絲長速、生長勢、污染率和菌絲色澤綜合起來比較，Ⅲ號培養基菌絲長速最快、污染率低，為金福菇最佳原種培養基。

金福菇菌絲在不同原種培養基上生長速度及生長勢比較

培養基生長速度

（cm/d）菌絲生長勢菌絲色澤污染率

（%）Ⅲ號Ⅴ號Ⅳ號Ⅰ號Ⅱ號0.18a0.17a0.16ab0.15b0.11c+++++++++]++++++較白潔白灰白較白灰白9d35a8d20b15bc

3結論與討論

金福菇母種培養基比較試驗結果表明，金福菇在添加牛糞的草腐菌母種培養基上長勢明顯好于其他培養基，菌絲長速也較快。試驗又設計了添加不同比例的牛糞量進一步對金福菇母種培養基進行篩選，篩選出配方中加入40 g的牛糞和微量元素使金福菇菌絲的生長速度最快，長勢也較好；但試驗中牛糞添加量設計梯度為10 g，需進一步設計將牛糞添加量梯度降為5 g進行試驗。

金福菇原種階段試驗結果表明，金福菇的最適原種培養基為小麥籽粒+石膏的配方。加牛糞的培養基雖然生長速度也較快，生長勢也最好，但是可能由于牛糞含氮量高，添加牛糞后氮源過多，培養料抗雜菌能力差，污染率升高[8]，所以該配方不適于生產。但可進一步降低牛糞添加量，或將牛糞和秸稈腐熟后再添加，以降低污染率，此結論需進一步試驗進行驗證。

參考文獻：

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[3]高珠清. 巨大口蘑優質高產栽培技術[J]. 食用菌，2004，26（5）：33.

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[8]田景花，楊旭，李明，等. 黃傘菌種培養基配方篩選研究[J]. 北方園藝，2013（2）：137-140.黃文娟，張越，梁繼業，等. 光-溫耦合條件對3種豆科植物種子萌發特性的影響[J]. 江蘇農業科學，2014，42（6）：234-237.endprint

菌絲生長速度（mm/d）=培養料高度（mm）/滿瓶時間（d）。

2結果與分析

2.1母種培養基配方篩選試驗

2.1.1母種培養基配方初篩結果從表1可以看出，金福菇菌絲在不同配方的母種培養基上均能生長，但生長速度和長勢不同。不同母種培養基上菌絲生長由快到慢的順序為F>A>E>D>B>C，F與A培養基生長最快且兩者差異不顯著，而B、C菌絲長速最慢且極顯著慢于F、A培養基配方。從菌絲顏色和長勢來看，D、F培養基的菌絲潔白、濃密，生長勢最好，A培養基的菌絲灰白、稀疏，生長勢最差。

金福菇菌絲在不同母種培養基上的生長速度及生長勢比較

培養基生長速度

（cm/d）菌絲生長勢菌絲色澤差異顯著性0.050.01FAEDBC0.2700.2600.2550.2450.2450.240++++++++++++++++++潔白灰白潔白潔白白潔白aabbcbcccAABBCBCCC注：“++++”菌絲濃密，“+++”菌絲較濃密，“++”菌絲一般，“+”菌絲稀疏。

2.1.2母種培養基配方的復篩結果通過初篩F培養基為最佳培養基，其次是D培養基，在D、F培養基基礎上，進一步調整牛糞的添加量，進行配方設計，試驗結果見表2。從表2可以看出，金福菇菌絲在不同比例牛糞母種培養基上，除1號培養基生長勢較差外，其他幾種配方在菌絲密度、色澤、生長勢等方面差異均不明顯；4號培養基菌絲長速最快，并顯著快于其他培養基配方，其次為3號、6號培養基菌絲長速較快，4號牛糞母種培養基最適宜金福菇菌絲的生長。

金福菇不同母種復篩培養基的生長速度及生長勢比較

培養基生長速度

（cm/d）菌絲生長勢菌絲色澤差異顯著性0.050.014號3號6號1號2號5號0.300.280.280.260.250.24+++++++++++++++++++++++潔白潔白潔白潔白潔白潔白abbbcccAABABBBB注同表1。

2.2原種培養基配方篩選結果

，金福菇菌絲體在不同原種培養基上生長有所差異。菌絲長速由快到慢依次為Ⅲ號>Ⅴ號>Ⅳ號>Ⅰ號>Ⅱ號，且Ⅲ號、Ⅴ號、Ⅳ號原種培養基菌絲生長速度均較快，三者之間無顯著性差異，但均顯著快于Ⅰ號、Ⅱ號培養基。從菌絲生長勢和菌絲顏色來看，Ⅴ號培養基菌絲潔白濃密、生長勢最好，Ⅰ號、Ⅲ號培養基菌絲較白、生長勢較好，Ⅱ號、Ⅳ號培養基菌絲灰白、生長勢較差。 不同培養基菌絲污染率由低到高為Ⅳ號<Ⅲ號<Ⅱ號<Ⅰ號<Ⅴ號，Ⅳ號培養基污染率最低，其次是Ⅲ號培養基，且Ⅲ號、Ⅳ號培養基污染率顯著低于其他培養基。從菌絲長速、生長勢、污染率和菌絲色澤綜合起來比較，Ⅲ號培養基菌絲長速最快、污染率低，為金福菇最佳原種培養基。

金福菇菌絲在不同原種培養基上生長速度及生長勢比較

培養基生長速度

（cm/d）菌絲生長勢菌絲色澤污染率

（%）Ⅲ號Ⅴ號Ⅳ號Ⅰ號Ⅱ號0.18a0.17a0.16ab0.15b0.11c+++++++++]++++++較白潔白灰白較白灰白9d35a8d20b15bc

3結論與討論

金福菇母種培養基比較試驗結果表明，金福菇在添加牛糞的草腐菌母種培養基上長勢明顯好于其他培養基，菌絲長速也較快。試驗又設計了添加不同比例的牛糞量進一步對金福菇母種培養基進行篩選，篩選出配方中加入40 g的牛糞和微量元素使金福菇菌絲的生長速度最快，長勢也較好；但試驗中牛糞添加量設計梯度為10 g，需進一步設計將牛糞添加量梯度降為5 g進行試驗。

金福菇原種階段試驗結果表明，金福菇的最適原種培養基為小麥籽粒+石膏的配方。加牛糞的培養基雖然生長速度也較快，生長勢也最好，但是可能由于牛糞含氮量高，添加牛糞后氮源過多，培養料抗雜菌能力差，污染率升高[8]，所以該配方不適于生產。但可進一步降低牛糞添加量，或將牛糞和秸稈腐熟后再添加，以降低污染率，此結論需進一步試驗進行驗證。

參考文獻：

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[8]田景花，楊旭，李明，等. 黃傘菌種培養基配方篩選研究[J]. 北方園藝，2013（2）：137-140.黃文娟，張越，梁繼業，等. 光-溫耦合條件對3種豆科植物種子萌發特性的影響[J]. 江蘇農業科學，2014，42（6）：234-237.endprint