Bcl-2基因與惡性腫瘤的研究進展

章 瑩 陳 琦 馮永懷

（遵義醫(yī)學院附屬醫(yī)院血液內(nèi)科 貴州 遵義 563000）

1 腫瘤概述

在醫(yī)學研究領域，腫瘤被定義為：個體在多重致癌因素的誘導下，局部組織的任意細胞失去了基因水平生長的正常控制能力，由此導致該組織發(fā)生了克隆性異常病變或異常增生。

一般來說，腫瘤被界定為惡性和良性兩大類。良性腫瘤對人體的負面影響較小，主要會給人體局部帶來壓迫和阻塞感，良性腫瘤對人體的影響程度一般與發(fā)生的部位和后續(xù)演化有關。惡性腫瘤對人體的負面影響則顯得較大，主要原因為：惡性腫瘤生長較快、分化不成熟，在轉(zhuǎn)移過程中會對人體內(nèi)部的正常器官和結(jié)構(gòu)功能造成負面影響，患有晚期惡性腫瘤的患者可出現(xiàn)消瘦、乏力、全身器官衰竭等癥狀，因此，惡性腫瘤的臨床致死率較高。根據(jù)世界衛(wèi)生組織公布的數(shù)據(jù)，2008年，全球惡性腫瘤的發(fā)病人數(shù)和死亡人數(shù)分別為1266萬人和756萬人，致死率達到59.71%。2013年1月11日，中國腫瘤中心發(fā)布的《2012年中國腫瘤登記年報》顯示：2012年全年，我國新發(fā)腫瘤病例達到321萬，平均每天有8550人，每分鐘有6人被確診為腫瘤。此外，根據(jù)我國衛(wèi)生部公布的數(shù)據(jù)，2008年至2012年，我國惡性腫瘤的發(fā)病率總體仍呈現(xiàn)上升趨勢，發(fā)病概率以年均3.5%-5.5%的速率遞增。

綜上所述，惡性腫瘤是全球較大的公共衛(wèi)生危機之一，極大地危害著人類的健康。因此，結(jié)合基因誘導因素，對腫瘤的致病機理、抗病療法進行深入研究，顯得十分具有現(xiàn)實意義。

2 Bcl-2基因概述

2.1 Bcl-2基因的界定：Bcl-2基因首先在小鼠的B細胞淋巴瘤中被發(fā)現(xiàn)，且為Bcl-2基因家族中的重要成員，因此被稱為Bcl-2。現(xiàn)代醫(yī)學研究表明，Bcl-2基因?qū)θ梭w細胞的凋亡過程有著明顯的控制作用，且該基因蛋白的過表達與磷酸化也會參與到人體組織細胞的增生調(diào)控過程中，因此，該基因與腫瘤的形成和腫瘤的多藥耐藥性有著密切的聯(lián)系。

2.2 Bcl-2基因的發(fā)現(xiàn)歷程：1984年，Tsuji moto［1］等人從小鼠的B細胞濾泡性淋巴瘤染色體的斷裂點中率先發(fā)現(xiàn)了Bcl-2基因，他們通過進一步的試驗證實，該基因?qū)θ梭w細胞的凋亡具有抑制作用，能夠有效延長細胞的壽命，使人體內(nèi)的細胞呈現(xiàn)過度增長，從而造成體內(nèi)細胞數(shù)目的不斷累積。1988年，Vaux［2］通過基因分化試驗證實：Bcl-2基因僅僅能夠使細胞存活的時間得到延長，而對細胞的增殖卻沒有顯著的影響。此后，醫(yī)學界的一些學者通過臨床研究證實：Bcl-2基因能夠使多種組織的細胞凋亡得到有效抑制，因此，該基因能夠應用在抗癌治療中。1990年，Nunez G［3］通過研究確認：Bcl-2基因的凋亡抑制功能能夠在多種腫瘤治療中得到應用，并能夠取得較好的治療效果。

近年來，臨床醫(yī)學的研究表明：惡性腫瘤的誘發(fā)與腫瘤細胞的凋亡抑制有著密切關聯(lián)，因此，Bcl-2基因可作為某些惡性腫瘤早期診斷的標志物。例如，Chen［4］等人應用免疫組化的方法，對11例正常支氣管上皮細胞和40例臨床肺癌標本進行檢測，結(jié)果顯示，支氣管上皮不典型增生的速率與Bcl-2基因蛋白的表達水平呈正比關系，因此，他們認為：在肺癌的早期診斷中，Bcl-2基因是一種極有價值的標志物。

2.3 Bcl-2基因的功能結(jié)構(gòu)：現(xiàn)在醫(yī)學研究證實，Bcl-2基因不僅存在于B細胞淋巴瘤中，在很多正常的組織中也能夠發(fā)現(xiàn)它們的蹤影。經(jīng)過克隆和序列檢測顯示，Bcl-2基因的結(jié)構(gòu)主要由3個外顯子構(gòu)成，在不同RNA的剪接作用下，產(chǎn)生了2個開讀框。基因內(nèi)部還包含了Bcl-2α和Bcl-2β兩種蛋白，其中，Bcl-2α蛋白由239個氨基酸構(gòu)成，而Bcl-2β蛋白則由205個氨基酸構(gòu)成。此外，錨泊結(jié)構(gòu)是Bcl-2基因附著于細胞內(nèi)膜的主要表現(xiàn)形式，其G末端呈現(xiàn)疏水性片段，該片段則由19個氨基酸組成。

Bcl-2蛋白是一種較為穩(wěn)定的蛋白，它與細胞器、線粒體膜有著緊密的關聯(lián)，主要分布在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜、核被膜和線粒體外膜上。通過現(xiàn)代醫(yī)學中的電鏡研究證實，Bcl-2與線粒體中復合物的內(nèi)外膜呈現(xiàn)“接壤”的關系，它與核微孔復合物有著高密度的連接關系，因此，Bcl-2蛋白在核膜中的分布十分規(guī)律，并不是無序分布的，Bcl-2的這種分布特性與其抗細胞死亡功能的發(fā)揮有著緊密聯(lián)系。

3 Bcl-2基因與惡性腫瘤

近年來，國內(nèi)外大量的研究均證實，Bcl-2基與多種惡性腫瘤的發(fā)生有著密切關系。例如，Bcl-2基因在很多惡性腫瘤組織中都呈現(xiàn)陽性表達，這說明Bcl-2基因與腫瘤的發(fā)生有著一定的相關性。此外，一些學者通過研究發(fā)現(xiàn)，Bcl-2基因在抑制細胞凋亡過程中，會呈現(xiàn)過度表達的狀況，因此，會大大增加細胞染色體突變的幾率，也會使正常細胞感染病毒的幾率得到提升，這可能是正常細胞發(fā)生癌變的關鍵原因。綜上所述，惡性腫瘤的發(fā)生、演化、病變與Bcl-2基因密切相關，研究Bcl-2與惡性腫瘤之間的聯(lián)系不僅能夠為現(xiàn)代腫瘤的診斷、治療提供新的思路，也能夠豐富基因治療學的理論研究體系，具有很強的現(xiàn)實價值。以下，我將通過文獻查閱法的形式，對國內(nèi)外醫(yī)學界關于Bcl-2基因與惡性腫瘤的研究成果進行綜述。

3.1 Bcl-2基因與肺癌：早在1998年，我國學者洪磊、錄洪芬［5］等人就對Bcl-2基因在非小細胞肺癌中的表達及其意義進行了深入研究，他們指出：正常肺組織的Bcl-2表達比例約為0.6%-0.7%，而Bcl-2基因在肺癌組織中的表達比例要遠遠高于這個指標。

2001年，馬冬春［6］等人則通過臨床試驗進一步證實了肺癌組織中，Bcl-2基因存在過表達的狀況。他們提取了臨床中82例肺癌患者的患病肺組織，并將其與40例正常肺組織進行Bcl-2基因表達對比研究，結(jié)果顯示：肺癌組織中的Bcl-2基因表達率為36.7%，而正常肺組織中的Bcl-2基因表達率則僅為7.7%。

2005年，李文琦，廖靜等［7］人研究發(fā)現(xiàn)，Bcl-2基因能夠?qū)Ψ伟┗熕幬锏恼T發(fā)凋亡起到抑制作用。利用該特性，可有效提升肺癌治療藥物的敏感程度，降低多藥耐藥的發(fā)生幾率，從而對肺癌的治療起到積極的促進作用。

2008年，我國學者李樹鈞［8］等人采用免疫組織化學法對人耐藥小細胞肺癌抗凋亡基因的Bcl-2表達進行了研究，并成功構(gòu)建了新耐藥相關基因的反義基因逆轉(zhuǎn)錄病毒載體。此外，通過試驗表明：新的耐藥相關基因的反義基因能夠有效抑制抗凋亡基因的Bcl-2表達，能在肺癌MDR的發(fā)生中起到關鍵效應。

最近幾年，關于Bcl-2基因與非小細胞肺癌發(fā)生和治療的研究成為了新的學術(shù)熱點。2012年，我國學者戴國光［9］對Fas、Fasl和Bcl-2基因在非小細胞肺癌中的表達進行了深入研究。他采用流式細胞分析檢測技術(shù)對60例非小細胞肺癌腫瘤的組織和10例肺癌旁正常組織中的Bcl-2表達率進行了測定，結(jié)果顯示Bcl-2在肺癌組織中的表達率為65.5%，在正常肺部組織中的表達率僅為15.2%，兩者呈現(xiàn)出明顯的差異化。因此，他得出結(jié)論：Bcl-2基因的表達水平對非小細胞肺癌惡性程度、病例分期的判定有著重要的參考價值，該基因有可能成為治療非小細胞肺癌的新靶點。

3.2 Bcl-2基因與消化道惡性腫瘤：消化道惡性腫瘤的范疇較為廣泛，致死率也十分高。近年來，國內(nèi)外科研人員關于Bcl-2基因與消化道惡性腫瘤發(fā)展、治療、預后等方面的研究成果也十分豐富。相關的研究資料顯示，Bcl-2基因在胃癌、肝癌、大腸癌等消化道惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起著重要的作用。

2005年，我國學者侯振江［10］等人在《Bcl-2基因在消化道腫瘤研究中的應用》一文中詳細闡述了Bcl-2基因在胃癌、食管鱗癌、肝癌、胰腺癌、大腸癌等消化道惡性腫瘤中發(fā)生發(fā)展中的作用。例如，他指出：Bcl-2表達率的下降能夠?qū)κ彻苷衬まD(zhuǎn)化為腺癌起到促進作用，因此，Bcl-2基因能夠成為食管癌的預后因素。同時，他的研究成果顯示：在胃癌、肝癌和大腸癌的治療過程中，通過Bcl-2基因的負調(diào)控表達，阻斷Bcl-2基因產(chǎn)物的效應，并結(jié)合反義RNA抑制Bcl-2基因的表達作用，可以增加腫瘤細胞凋亡的敏感程度，使得放化療的成效大大提升。此外，他也指出：Bcl-2基因在消化道惡性腫瘤中發(fā)生發(fā)展的作用機制尚不明確，因此，相關的研究仍待繼續(xù)。

2012年，學者任磊［11］對Bcl-2基因與Bid在胃癌中差異性表達的意義進行了研究。他采用免疫組織化學SP檢測法，對42例已進行胃癌根治術(shù)患者胃切緣上皮組織和癌組織中的Bcl-2和Bid蛋白表達水平進行了測定，結(jié)果顯示：Bcl-2在樣本胃切緣上皮組織和癌組織中的陽性率分別為69.05%和21.43%，Bcl-2蛋白的表達水平與Bid蛋白的表達水平呈現(xiàn)負相關。由此他得出結(jié)論：Bcl-2蛋白的表達與患者年齡、性別、浸潤深度無明顯關系，但與患者的分化程度、疾病分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移卻有明顯統(tǒng)計學意義，因此，Bcl-2蛋白的表達率升高使得胃癌細胞凋亡的途徑不斷演化，對胃癌演進和預后有一定的意義。

此外，學者張曙光［12］在《Bcl-2基因與大腸癌》一文中得出結(jié)論：Bcl-2與大腸癌中的PgP、GSTл、To PoⅡ的表達呈現(xiàn)正相關，Bcl-2蛋白的高表達率與大腸癌的療效、耐藥性以及預后有著明顯關聯(lián)，因此，在臨床大腸癌的治療中，研究如何抑制Bcl-2蛋白的高表達，能夠為治療耐藥性腸癌提供全新的思路。

3.3 Bcl-2基因與血液系統(tǒng)惡性腫瘤：血液系統(tǒng)惡性腫瘤也是一類常見的腫瘤疾病，醫(yī)學界關于Bcl-2基因與血液腫瘤的研究成果也較為豐富，很多學者從不同的角度提出了自身的看法。

早在2000年，我國學者周誼輝、陳方平［13］等人就對急性白血病患者體內(nèi)Bcl-2基因的表達水平和臨床表現(xiàn)進行了相應研究。他們通過半定量RT-PCR方法對38例急性白血病患者體內(nèi)的Bcl-2基因表達進行了檢測，結(jié)果顯示：患者體內(nèi)的Bcl-2基因表達與臨床復發(fā)難治呈正相關，因此，他們得出結(jié)論：Bcl-2基因的高表達是急性白血病難以根治的原因之一，且Bcl-2基因的表達水平對于衡量急性白血病患者抗腫瘤藥物的敏感性有一定幫助。

2000年，學者向直富、李慧玉［14］等人則將研究的視角集中于淋巴細胞性白血病中Bcl-2基因重排這一問題上。他們應用多聚酶鏈反應檢測技術(shù)對9種惡性淋巴細胞性白血病標本中的Bcl-2基因重排情況進行了測定，結(jié)果顯示：Bcl-2基因的重排是惡性淋巴細胞白血病中常見的染色體異常情況，且與低度惡性NHL有密切關系。

2002年，朱廣榮［15］等人則對Bcl-2基因與急性白血病患者年齡、性別、復發(fā)性和原幼細胞數(shù)進行了研究。他們應用了逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應（RT-PCR）技術(shù)對40例急性白血病患者細胞中的Bcl-2基因表達進行了研究，結(jié)果顯示：患者體內(nèi)Bcl-2基因的表達水平與其年齡、性別、出血、白血病分型及復發(fā)性無明顯關聯(lián)。但與患者骨髓中的原幼細胞數(shù)目正比關系。因此，他們得出結(jié)論：對于急性白血病患者來說，Bcl-2基因的表達與疾病耐藥、預后判斷、化療評估及治療方案選擇有著密切關聯(lián)。

2003年，曲建華［16］等人研究了Bcl-2基因與急性髓系白血病（A ML）的預后聯(lián)系。他們應用ISH-SAG法對57例AML患者單個核細胞中的Bcl-2基因表達水平進行了評估，并對初治組、緩解組、難治復發(fā)組患者的Bcl-2基因表達水平進行了比對，結(jié)果顯示：Bcl-2基因的表達與疾病的臨床緩解密切相關，陰性組緩解率為76.2%，陽性組緩解率為42.1%，該基因可作為AML預后判斷和疾病治療方案制定的重要依據(jù)。

2005年，宋愛琴［17］等人將研究的視角放在了Bcl-2基因與兒童急性淋巴細胞白血病的聯(lián)系中。他們利用細胞原位雜交技術(shù)對30例ALL患兒不同時期的Bcl-2 mRNA陽性表達水平進行了測定，結(jié)果顯示：93.3%的患兒存在Bcl-2 mRNA陽性表達，由此他們得出結(jié)論：ALL患者普遍存在Bcl-2 mRNA陽性表達現(xiàn)象，Bcl-2 mRNA陽性表達與潑尼松治療反應關系密切，對Bcl-2 mRNA陽性表達水平進行動態(tài)監(jiān)測可作為判斷ALL化療敏感性的指標，亦可為ALL的預后判斷提供科學依據(jù)。此后，更多學者也將研究的視角放在了Bcl-2基因與兒童急性白血病的關系上，例如，2007年，學者陳浩［18］等人對兒童急性白血病 WT1和Bcl-2基因的表達及意義進行了研究，結(jié)果同樣顯示：WT1基因和Bcl-2的表達與兒童急性白血病的發(fā)病和預后有直接關系，上述兩種基因可作為判定ALL患兒預后的關鍵指標。

近兩年，有關急性白血病與Bcl-2基因關系的研究成果仍然層出不窮，相關的研究切入點也呈現(xiàn)不斷創(chuàng)新的局面。2011年，潘陽瓊［19］在其碩士論文《TAp63及Bcl-2在急性白血病中的表達及意義》中便深入研究了Bcl-2基因與急性白血病的關系。他采用RT-PCR檢測法對急性白血病患者骨髓單個核細胞中的Bcl-2 mRNA表達水平進行了測定，結(jié)果顯示：Bcl-2基因在急性白血病患者中的表達要明顯高于非惡性血液并患者，TAp63及Bcl-2在急性白血病患者中的表達呈現(xiàn)正相關。同時，Bcl-2在A ML和ALL中的表達沒有顯著差別。因此他認為：急性白血病細胞中Tap63可能通過調(diào)節(jié)Bcl-2發(fā)揮抗凋亡作用，以此參與到急性白血病的發(fā)生與發(fā)展中。

2012年，學者陳連香［20］對急性白血病患者mdr-1基因與Bcl-2基因的表達進行了研究。他應用熒光定量PCR法對37例白血病患者的mdr-1基因與Bcl-2基因表達進行了測定，結(jié)果顯示：mdr-1基因與Bcl-2基因在AL組與正常組中的表達分別為2.319和1.420；在AL組與NR組中的表達分別為1.420和3.084；在初發(fā)組與NR組中的表達分別為0.456和3.084。其結(jié)論表明：BCL-2基因的高表達是白血病治療效果差的主要原因，易誘導疾病耐藥、易復發(fā)等狀況。

4 結(jié)束語

本文通過充分調(diào)研國內(nèi)外學術(shù)文獻，對Bcl-2基因與惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展、治療以及預后等研究成果進行了闡述。通過國內(nèi)外學者的研究分析不難發(fā)現(xiàn)，Bcl-2基因?qū)τ趷盒阅[瘤的治療及預后判定有著重要的參考價值，因此，結(jié)合相應的研究成果，研發(fā)基于Bcl-2基因的抗腫瘤藥物顯得勢在必行，而相應的深入探索也必將任重而道遠。

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