膜式液基薄層細(xì)胞（TCT）制片的影響因素和對(duì)策

黃黎明

摘 要：目的：討論江元JY-1200膜式液基薄層細(xì)胞（TCT）制片系統(tǒng)使用的影響因素和對(duì)策。方法：選取2017年7月1日至2017年10月31日我院門診、住院和體檢中心1047例TCT標(biāo)本為研究對(duì)象，分為兩組，第一組為7月1日至8月31日共505例標(biāo)本，按廠家培訓(xùn)方法制片；第二組為9月1日至10月31日共542例標(biāo)本，按改進(jìn)后方法制片。所有液基制片均用巴氏染色、中性樹脂膠封片后鏡檢。根據(jù)2001版TBS報(bào)告系統(tǒng)的要求，對(duì)兩組TCT制片滿意度進(jìn)行評(píng)估。結(jié)果：發(fā)現(xiàn)第一組不滿意制片49例（9.70%），第二組不滿意制片13例（2.40%）。兩組比較，改進(jìn)后方法制片不滿意率明顯降低，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：通過對(duì)制片方法的改進(jìn)，能夠有有效提高TCT制片的滿意率。

關(guān)鍵詞：TCT；TBS報(bào)告系統(tǒng)；不滿意制片

液基薄層細(xì)胞制片技術(shù)是指薄層制片自動(dòng)裝置，制備細(xì)胞學(xué)標(biāo)本（涂片或印片）的技術(shù)[1]，根據(jù)其制片原理分為膜式、離心式和自然沉降式。該方法制成的細(xì)胞膜片具有傳統(tǒng)涂片無法比擬的優(yōu)點(diǎn)[2]。作為宮頸疾病三階梯式診斷程序中的第一步， 即細(xì)胞學(xué)篩查-陰道鏡下活檢-病理學(xué)檢查[3]，在女性早期宮頸病變的發(fā)現(xiàn)和診斷中有非常重要的價(jià)值。我科自2017年7月引進(jìn)廣州江元公司的JY-1200膜式液基薄層細(xì)胞制片系統(tǒng)，經(jīng)過一段時(shí)間的使用，發(fā)現(xiàn)不滿意制片率較高。后經(jīng)過探索和嘗試，在原制片方法的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改進(jìn)，提高了制片滿意率。現(xiàn)將制片方法進(jìn)行介紹，并對(duì)兩組標(biāo)本的制片效果進(jìn)行比較，重點(diǎn)探討影響制片效果的因素和對(duì)策。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1一般資料研究對(duì)象為2017年7月1日至2017年10月31日我院門診、住院和體檢中心1047例婦科宮頸液基細(xì)胞標(biāo)本，將其分為兩組，第一組為7月1日至8月31日共505例，按廠家培訓(xùn)方法制片。第二組為9月1日至10月31日共542例，按改進(jìn)后的方法制片。

1.1.2設(shè)備 JY-1200膜式液基薄層細(xì)胞制片機(jī)；F96-2型震蕩儀；巴氏染缸；OLYMPUS CX-31型顯微鏡；江元TCT報(bào)告系統(tǒng)。

1.2方法

1.2.1第一組制片：1.標(biāo)本用震蕩儀震蕩5分鐘，將細(xì)胞打散形成懸液；2.吸取約1.2mL細(xì)胞懸液加入膜杯中，啟動(dòng)儀器制片；3.制好的細(xì)胞薄片用95%酒精固定15分鐘，巴氏染色、中性樹脂膠封片。

1.2.2第二組制片：1.標(biāo)本用震蕩儀震蕩5分鐘，將細(xì)胞打散形成懸液；2.評(píng)估標(biāo)本的細(xì)胞量和性狀，細(xì)胞量合適的標(biāo)本外觀為白色微渾濁。外觀清澈透明的標(biāo)本細(xì)胞數(shù)量較少，明顯渾濁的標(biāo)本則細(xì)胞數(shù)量過多，紅色渾濁為血性標(biāo)本，后三種情況的標(biāo)本可能會(huì)對(duì)制片造成影響，將其挑選出來進(jìn)一步處理。3.外觀清澈透明的標(biāo)本倒入5ml懸液至朔料離心管，水平式離心機(jī)1000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘，棄去大部分上清液，留取1.2ml上清液和離心管底部沉淀，混勻；外觀白色明顯渾濁的標(biāo)本用備用的細(xì)胞保存液稀釋成微渾濁懸液；血性標(biāo)本加入10%冰醋酸1滴混勻破壞血細(xì)胞后觀察濁度，再按前述方法選擇是否離心或稀釋制片。4.吸取約1.2ml處理后的細(xì)胞懸液加入膜杯中，啟動(dòng)儀器制片。5.制好的細(xì)胞薄片用95%酒精固定15分鐘，巴氏染色、中性樹脂膠封片。

1.2.3制片效果評(píng)估：所有染好的細(xì)胞薄片用OLYMPUS CX-31型顯微鏡觀察，根據(jù)2001版TBS報(bào)告系統(tǒng)的要求[4]，對(duì)兩組TCT標(biāo)本制片滿意度進(jìn)行評(píng)估，分為滿意和不滿意。

2.結(jié)果

發(fā)現(xiàn)第一組505例標(biāo)本中出現(xiàn)不滿意制片49例，發(fā)生率為9.70%。其中鱗狀上皮細(xì)胞量不足為31例，占6.13 %；排除子宮切除患者標(biāo)本，未見移行區(qū)細(xì)胞（包括宮頸管上皮細(xì)胞、化生細(xì)胞、儲(chǔ)備細(xì)胞）5例，占0.99 %；血細(xì)胞嚴(yán)重遮擋上皮細(xì)胞，無法觀察9例，占1.78%；制片過厚，細(xì)胞重疊造成閱片困難4例，占0.80%。第二組542例標(biāo)本中出現(xiàn)不滿意制片為13例，發(fā)生率為2.40%，其中鱗狀上皮細(xì)胞數(shù)量不足為9例，占1.66%；未見移行區(qū)成分4例，占0.74%，無血細(xì)胞遮擋上皮細(xì)胞、制片過厚標(biāo)本。從表可以看出，第二組制片不滿意率低于第一組，數(shù)據(jù)采用SPSS23.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，兩組制片不滿意率的比較采用？2檢驗(yàn)，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3.討論

近年液基制片技術(shù)的出現(xiàn)大大提高了宮頸癌及癌前病變的檢出率[5]，但TCT 的假陰性，假陽性診斷仍客觀存在[6]，能否制出合格滿意的液基薄片是準(zhǔn)確診斷的關(guān)鍵所在。婦科取材是非常重要的一步，良好的取材能提高制片的滿意率和診斷的準(zhǔn)確性，但在實(shí)際工作中取材因素不是實(shí)驗(yàn)室人員能有效控制的。一方面可以通過加強(qiáng)與臨床醫(yī)師的溝通，使其意識(shí)到規(guī)范取材的重要性，提高取材質(zhì)量。從另一方面，實(shí)驗(yàn)室人員也可通對(duì)制片流程的改進(jìn)來提高制片的滿意率。我科在原廠家方法的基礎(chǔ)上，增加了對(duì)標(biāo)本的評(píng)估和特殊標(biāo)本的處理這兩步，先通過初步觀標(biāo)本察濁度和顏色，挑出細(xì)胞過少、過多和血性標(biāo)本。再對(duì)細(xì)胞過少的標(biāo)本采用離心沉淀的方式富集細(xì)胞，細(xì)胞過多的標(biāo)本用保存液稀釋到合適濁度；血性標(biāo)本用冰醋酸破壞紅細(xì)胞后再處理。改進(jìn)后的方法能夠有效減少或消除因取材不佳造成的影響，提高TCT制片的滿意率，為診斷的準(zhǔn)確性提供可靠的保障。

參考文獻(xiàn)：

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