乙丙肝重疊感染者血清學及病毒學檢測結果分析

陳繼梅，丁雪芳，許葉虹

(蕪湖市第三人民醫院 檢驗科，安徽 蕪湖241000)

我國是病毒性肝炎高流行地區，乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)是引起慢性肝炎的主要病因，同時由于HBV與HCV具有相同的傳播途徑，發生同時感染或在某一種感染的基礎上重疊另一種病毒感染的現象廣泛存在。隨著檢驗水平的提高，乙丙肝重疊感染病例逐漸升高，此類感染對肝病的重癥化和治療困難化有著不可忽視的影響[1]。本研究對HBV和HCV重疊感染者病毒學及血清學指標進行分析，并以HBV、HCV單獨感染者為對照，旨在了解重疊感染患者血清學及病毒學指標的特點。

1 材料與方法

1.1標本來源所有病例均來自我院2008年6月-2013年4月間就診患者。HCV和HBV重疊感染者33例，男19例，女14例，年齡48.67±12.03；單純HBV感染者60例，男44例，女14例，年齡39.58±16.03；單純HCV感染者61例，男26例,女35例，年齡51.20±12.19。HBV單純感染的診斷，根據血清中檢測到HBsAg和(或)HBeAg和(或)HBVDNA，血清抗-HCV陰性；HCV單純感染的診斷，根據血清中檢測到HCVRNA和(或)抗-HCV抗體，血清乙肝標志物均為陰性；HBV和HCV合并感染的診斷依據血清存在兩種病毒的標志物，其中HBV血清標志物(HBV-M)有一項/一項以上陽性(排除單獨抗-HBs抗體病人)。診斷參照2000年中華醫學會修訂的病毒性肝炎防治方案的臨床診斷標準[2]。

1．2試劑和方法

應用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測研究對象HBV-M、抗-HCV抗體，試劑由上海科華生物有限公司出品，結果在MK3型酶標儀上測定。實時熒光定量PCR法(FQ-PCR)檢測研究對象HBVDNA及HCVRNA，儀器為美國SLAN Real Time PCR Detection System 7300熒光定量檢測儀，試劑購自上海科華生物有限公司，以病毒量≥1*103copies/ml為陽性結果。

1．3統計學處理

2 結果

2.1乙丙肝重疊感染組病毒復制情況乙丙肝重疊感染組共33例,病例病毒復制情況如下：其中HBVDNA(-)/HCVRNA(-)共7例(21.21%)；HBVDNA(+)/HCVRNA(+)共5例(15.16%)；HBVDNA(+)/HCVRNA(-)共7例(21.21%)；HBVDNA(-)/HCVRNA(+)共14例(42.42%)。33病例中有HCVRNA復制病例為(14+5)/33(57.58%)，存在HBVDNA復制病例為(5+7)/33(36.36%)，經卡方檢驗χ2=2.98，P=0.084。重疊感染病例表現出4種病毒學模式，丙肝病毒復制多于乙肝病毒，但兩者并不存在顯著性差異。

2.2重疊感染組與單純乙肝感染組血清HBV-M比較

33例重疊感染者HBV-M中HBsAg、HBeAg陽性率顯著低于單純HBV感染者，抗-HBs陽性率顯著高于單純HBV感染者，抗-HBe、抗-HBc兩者不存在顯著性差異(見表1)。

表1 不同組別血清HBV-M比較(%)

2．3重疊感染者與單純乙肝感染組血清HBVDNA陽性率及病毒載量比較

乙丙肝重疊感染組患者血清HBVDNA陽性率顯著低于單純HBV感染組(χ2=8.88，P=0.003)，其陽性患者病毒載量均值也顯著低于單純HBV感染組(t=5.06，P=0.001)(見表2)。

表2 不同組別患者HBVDNA陽性率及病毒載量比較(%)

2.4重疊感染者與單純丙肝感染組血清HCVRNA陽性率及病毒載量比較

乙丙肝重疊感染組HCVRNA陽性率稍低于單純HCV感染組，差異無統計學意義(χ2=0.427，P=0.514)，但重疊組病毒載量均值顯著低于單純性HCV感染組(t=2.16，P=0.035)(見表3)。

表3 不同組別患者HBVDNA陽性率及病毒載量比較(%)

3 討論

乙丙肝重疊感染者可表現出多樣的病毒復制狀態，從我們調查中顯示，33例重疊感染患者表現出4種病毒學模式[3，4]，HBV/HCV均活躍5例(15.16%)，HBV/HCV均不活躍7例(21.21%)，HBV活躍/HCV不活躍7例(21.21%)，HCV活躍/HBV不活躍14例(42.42%)，與各研究資料[3，4]研究在病毒復制模式相同，構成比不盡相同，主要是因為重疊患者病毒水平不是固定不變，近3成患者體內的病毒學水平呈動態變化，血清HBVDNA/HCVRNA水平在不同時間節點，高于或低于臨界值[3]，病患來源不同，檢測時間段都可能影響到各種模式構成比，重疊感染者的病毒學譜非常復雜。鑒于此，我們建議對重疊感染者應長期動態檢測血清HCVRNA/HBVDNA水平，以便準確了解重疊患者血清中病毒水平。

近年的研究發現，乙丙肝重疊感染時，病毒之間存在相互干擾和抑制現象[5、6]，我們的調查顯示，乙丙肝重疊感染時，合并感染者HBsAg、HBeAg陽性率顯著低于單純HBV感染組(P值分別為0.000、0.0281)，抗-HBs陽性率顯著高于單純HBV感染者(P=0.001)，抗-HBe、抗-HBc兩者不存在顯著性差異(見表1)。同時重疊感染者血清病毒水平也與單純感染者有區別，重疊組HBVDNA陽性率和HBVDNA載量水平明顯低于單純HBV感染組(見表2)。表明乙丙肝重疊患者HBV的復制能力減弱，影響HBsAg、HBeAg的表達，重疊感染者以表達抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc為主，重疊感染后可表現多種血清學指標譜，可能導致重疊感染者出現隱匿性HBV感染[7]。HCV對HBV抑制的機制不明，可能是HCV感染后誘導了IFN、IFN樣物質或其他可溶性介質的釋放，激活特定的細胞，下調HBV表達；也可能是機體細胞免疫應答作用，即HCV促進HBV誘導T細胞免疫反應，從而抑制HBVDNA復制[8]，現階段多數學者支持HCV核心抗原可能在其中起著重要的調控作用[6，9]，Schuttler CG[9]等研究證實HCV通過其完整的核心蛋白抑制HBV增加子1和增強子2，直接抑制HBV轉錄，這種反式抑制作用可能在合并兩種病毒感染的患者中起到抑制HBV復制的作用，因此合并HCV感染的乙型肝炎患者有較低的HBVDNA水平[5]。

乙丙肝重疊組雖然在HCVRNA陽性率上與單純HCV感染組上無差異，但在病毒水平上還是低于單純感染組(見表3)。提示，兩種病毒合并感染時，不但存在HCV抑制HBV復制與表達，同時，HBV也可以一定程度上抑制HCV復制[10]，抑制程度相對較輕，不足以使血清HCVRNA轉為陰性，僅僅降低了重疊組病毒復制水平。

總之，我們研究顯示,HBV/HCV重疊感染在病毒學上是相互干撓和抑制的,但與此相矛盾的是，重疊感染在組織學和臨床失代償程度上肝病表現的更為嚴重[11]。重疊感染的機制非常復雜和不明確，治療可能造成重疊患者病毒間相互作用及抑制的失衡，此消彼長現象會發生[5]，對這類患者的診療是臨床醫生要面臨的挑戰。

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