用酶聯免疫吸附試驗方法評價膠體金測試卡檢測乙型肝炎病毒血清標志物的性能

劉淑芬 劉立群

(河北省遷西縣人民醫院檢驗科，河北 遷西 064300)

用酶聯免疫吸附試驗方法評價膠體金測試卡檢測乙型肝炎病毒血清標志物的性能

劉淑芬 劉立群

(河北省遷西縣人民醫院檢驗科，河北 遷西 064300)

肝炎病毒，乙型；肝炎抗原，乙型；膠體金；酶聯免疫吸附測定

在我國人群中，乙型肝炎病毒(HBV)感染率一直較高，尤其是20世紀80年代中期以前出生的人，HBV感染率超過10%[1]。目前，臨床領域免疫檢測乙肝五項的方法主要有凝聚試驗、放射免疫測定(RIA)、酶聯免疫吸附測定(ELISA)、免疫層析測定以及化學放光免疫測定(TR-FLA)[2]。其中ELISA測定乙肝五項指標具有靈敏度高、特異性好等優點，而被廣泛應用于臨床確診檢驗。膠體金測試卡(GIGA)具有簡便、快捷、不需要特殊儀器的優點，應用于急診和人群篩查更加方便。因此，我們對比分析了ELISA檢測方法和膠體金測試卡在檢測乙肝五項中的符合率，結果如下。

1 材料與方法

1.1 樣本 選取我院門診和住院患者250例，男140例，女110例。

1.2 試劑 GIGA采用英科新創(廈門)科技有限公司產品。ELISA試劑盒購自北京萬泰生物技術有限公司。2種試劑均在有效期內使用。

1.3 儀器 Thermo Multiskan MK3型酶標儀。

1.4 方法及結果判斷

1.4.1 GIGA檢測 采用免疫層析原理，其中乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝e抗原(HBeAg)為雙抗體夾心法，乙肝表面抗體(HBsAb)為雙抗原夾心法，乙肝e抗體(HBeAb)、乙肝核心抗體(HBcAb)為競爭抑制法，按說明書要求進行檢測操作和判定結果。陽性結果判斷：HBsAg、HBsAb、HBeAg測試卡的試紙條分別出現檢測線和質控線，HBeAb、HBcAb測試卡的試紙條只出現質控線，判定為乙型肝炎陽性；測試卡未出現質控線為試劑失效。

1.4.2 ELISA檢測 所有標本均用MK3型自動酶聯免疫系統分析儀檢測。測定HBsAg、HBsAb、HBeAg樣本OD450nm值，計算S/CO≥陰性對照孔均值×2.1為陽性結果，反之為陰性結果；測定HBeAb、HBcAb樣本OD450nm值，計算S/CO≥陰性對照孔均值×0.5為陰性結果，反之為陽性結果。

1.5 對比方法 以ELISA檢測方法檢測結果為參照標準，分別用ELISA法和GIGA法檢測乙肝血清共250份，其中陽性200份，陰性50份。將2種方法對比檢測的陽性血清標本按乙肝五項血清學指標分為8組。數據統計按照每種血清學指標的符合率計算。

2 結 果

分別用ELISA法和GIGA法檢測乙肝血清共250份，其中陽性200份，陰性50份。按乙肝五項陽性血清指標分8組及陰性組，檢測結果見表1。

表1 ELISA法和GIGA法檢測乙肝五項血清指標結果 例

由表1可見，2種方法對比符合率情況，其中HBsAg符合率為98.2%(107/109)，HBsAb符合率為93.10%(54/58)，HBeAg符合率為100%(23/23)，HBeAb符合率為90.48%(76/84)，HBcAb符合率為93.06%(134/144)。而50例ELISA法陰性血清用GIGA法檢測也同樣全部陰性。

3 討 論

HBV對人體有著廣泛的危害，如引起人體免疫紊亂、慢性肝炎、肝硬化、肝腫瘤的發生[3]。目前，確診檢測HBV感染應以ELISA檢測方法為準[4]。從我們統計的檢測結果可以看出，在HBsAg、HBeAg 2項檢測中，GIGA法與ELISA法的符合率較高分別為98.2%和100%。而在HBsAb、HBeAb、HBcAb 3項檢測中，GIGA法與ELISA法的符合率相對要低一些，分別為93.10%、90.48%和93.06%。由于2種方法檢測敏感度的差異，客觀的決定了2種不同檢測方法的不同用途。ELISA檢測抗原(或抗體)在液相中經擴散作用，逐漸與固相表面的抗體(或抗原)結合，同時標記抗體(或抗原)也需要此過程形成標記抗原抗體復合物，中間需要洗滌顯色等過程，檢測時間較長。GIGA法不需要特殊設備，快速檢測單個標本，易于觀察結果，操作簡便，特異性較高，能滿足急診的需要。在臨床就診的患者及小樣本量的確診時，必須應用靈敏度更高的ELISA方法進行乙肝五項的檢測，以便于指導臨床治療和預防；對于大規模的人群篩查和急診檢測中，GIGA法的方便、快捷等優點就顯得特別重要。但從實驗結果表明，由于GIGA的原理及方法學差異，靈敏度稍低于ELISA，不適于住院患者和獻血者，特別是手術患者的檢測，且其成本高于ELISA。因此，實驗室應根據需要，結合工作情況選用實驗方法。

[1]韓麗蓉.乙型肝炎乙肝五項檢查的臨床意義[J].臨床合理用藥雜志，2012，5(8)：109.

[2]郝麗紅，董志杰，吳佩，等.檢驗操作規程[M].2版.南京：京東大學出版社，1997：410-414.

[3]謝韻.淺述中醫藥對慢性乙型病毒性肝炎的治療[J].醫學美學美容：中旬刊，2013，(4)：130-131.

[4]趙秀英，陳俊梅，王文靜，等.電化學發光法和ELISA法檢測HBV表面抗體結果的比較與分析[J].北京醫學，2011，(6)：461-463.

(本文編輯：石 康)

劉淑芬(1963—)，女，副主任技師，學士。從事臨床檢驗工作。

R373.21；R392.11；R512.620.4

A

1002-2619(2014)11-1753-02

2014-03-17)