CD105在結直腸癌組織中的表達及與血管生成的關系

曹懷宇 成雪梅 魏磊彬

·論著·

CD105在結直腸癌組織中的表達及與血管生成的關系

曹懷宇 成雪梅 魏磊彬

目的分析CD105在結直腸癌組織中的表達并探討其與血管生成的關系。方法應用免疫組織化學方法檢測60例原發性結直腸癌組織、20例結直腸腺瘤組織、10例結直腸黏膜組織中CD105的表達。結果60例結直腸癌標本平均微血管計數為(30±8)條。結直腸癌CD105標記的MVD值明顯高于結直腸腺瘤組織(P<0.01)。CD105標記的MVD值與腫瘤分期、淋巴結轉、遠處轉移明顯差異有統計學意義(P<0.01)，而與患者的年齡、性別、腫瘤直徑、大體類型、病理類型及組織學分級均差異無統計學意義(P>0.05)。結論MVD在TNM分期、淋巴結轉移情況和遠處轉移情況有明顯差異，提示CD105表達密度增強的患者浸潤轉移率高、預后差。

結直腸腫瘤；CD105；臨床病理特征；微血管密度

結直腸癌是消化道中常見的惡性腫瘤之一，通過測定微血管密度(MVD)，發現腫瘤中新生血管數量越多癌組織發生轉移的可能性越大[1]；研究表明，CD105在腫瘤組織及其周圍的血管內皮細胞中表達豐富，可以成功標記新生血管[2]，且明顯優于CD34、Ⅴ Ⅲ因子血管標記物[3]。本研究通過免疫組化檢測結直腸癌組織中CD105表達情況并探討其與血管生成的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2008至2012年我院就診的的原發性結直腸癌術后標本60例，均有明確的病理組織學診斷結果，所有患者在術前均未經任何治療，所有病例資料完整。隨機從60例結直腸癌標本中選取10例，距結直腸癌組織邊緣10 cm處經病理切片證實的正常黏膜組織為癌旁組織。同時選取結直腸腺瘤組織20例作為對照組。60例結直腸癌患者中，男35例，女25例，年齡45～65歲。臨床分型：隆起型10例，潰瘍型36例，浸潤型5例，其他類型9例。組織學類型依照2003版美國腫瘤聯合會(AJCC)分類標準分類：高分化腺癌14例，中分化腺癌23例，低分化腺癌23例；根據國際抗癌聯盟(UICC)制定的TNM分類標準(2003)分期：Ⅰ期5例，Ⅱ期17例，Ⅲ期20例，Ⅳ期18例。病理證實伴有淋巴結轉移41例，無淋巴結轉移19例。

1.2 試劑 鼠抗人CD105單克隆抗體(即用型)、LSAB免疫組化試劑盒及DAB顯色試劑盒均購自北京中杉金橋生物技術有限公司。

1.3 方法 將所選取的病例標本常規行HE染色確定病理類型。免疫組化染色程序按LSAB免疫組化染色試劑盒說明書進行。

1.4 結果判定 CD105表達呈陽性的血管內皮細胞多為不規則排列方式，較少見到明顯的血管管腔，血管管壁較薄且極少見到平滑肌組織。在被染色的組織切片中，微血管的分布不均勻，許多部位的陽性內皮細胞數明顯多于其他部位，比如在腫瘤實質邊緣的間質即新生血管生成區CD105表達呈陽性的血管內皮細胞數明顯多于其他部位。微血管計數參照Weidner方法[4]。

1.5 統計學分析 應用SPSS 17.0統計軟件，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 CD105在結直腸癌組織中的表達 CD105陽性細胞著色部位主要位于血管內皮細胞的胞膜和胞質，胞膜著色強于胞質。CD105標記的MVD所顯示的血管多為新生薄壁、管徑小的血管，大的厚壁血管未見CD105的表達。結直腸癌CD105標記的MVD值明顯高于結直腸腺瘤組織(P<0.01)。見圖1、表1。

2.2 CD105表達與結直腸癌血管生成的關系 CD105標記的MVD值與結直腸癌腫瘤分期、淋巴結轉、遠處轉移明顯相關: (Ⅲ+Ⅳ)期的MVD值明顯高于(Ⅰ+Ⅱ)期MVD值，差異有統計學意義(P<0.01)；在結直腸癌，有淋巴結轉移組的血管數為(33±7)，無淋巴結轉移組為(23±4)，微血管數目與淋巴結是否轉移，差異有統計學意義(P<0.01)。伴有遠處轉移組的血管數為(37±7)，無遠處結轉移組為(26±5)，微血管數目與患者是否有遠處轉移，差異有統計學意義(P<0.01)。而與年齡、性別、腫瘤直徑、大體類型、病理類型及組織學分級，差異無相關性(P>0.05)。見表2。

a：結直腸癌；b：癌旁正常組織

表1 CD105在不同結直腸組織中的表達

表1 CD105在不同結直腸組織中的表達

組別CD105結直腸癌組(n=60)30±7*對照組(n=20)19±4 正常黏膜組(n=10)0

注：與腺癌組比較，*P<0.01

表2 CD105表達與結直腸癌血管生成的關系

3 討論

CD105是內皮細胞表達的糖蛋白，分子量為180kD，由兩個單體通過二硫鍵連接而成，編碼基因位于9號染色體長臂(9q34-qter)，氨基酸序列含有精氨酸-甘氨酸一天門冬氨酸三肽序列[5]。血管生成在惡性腫瘤的生長和發展中起著重要的作用， 新生的腫瘤微血管在結構 上不完善 ， 具有高通透性的特性， 因此它比正常生理下產生的微血管抵抗腫瘤侵襲的能 力差，更容易發生血管侵襲和血行肝轉移的發生[6,7]。

CD105在腫瘤組織及其周圍的血管內皮細胞中有豐富的表達[8]，可以成功標記新生血管[2]，且明顯優于CD34、ⅤⅢ因子血管標記物[3]，而其在正常組織的血管上無表達。

Takahashi等[9]檢測了110例實體腫瘤患者 (其中34例結直腸癌、16例乳腺癌、51例其他腫瘤)、8例良性疾病患者和31例健康志愿者的血清CD105水平，發現有轉移的腫瘤患者血 清CD105高于無轉移者，且均高于對照組；化療后血清CD105下降。有學者應用逆轉錄-聚合酶反應(RT-PCR)技術檢測32例原發性肝細胞癌(HCC)行根治性切除術后隨訪1年以上患者及20例肝內膽管結石患者(對照組)肝組織CD105mRNA的表達，發現CD105mRNA的高表達與腫瘤大小、臨床病理分期和病理類型無關(P>0.05)，而與術后早期復發轉移有關(P<0.05)，這表明CD105的高表達有可能成為術后早期復發轉移的標志物[10]。Sandlund等[11]通過對腎細胞癌的研究發現，CD105的表達同腎細胞癌的分期、分級、預后密切相關。Chien等[12]通過對舌鱗癌的研究發現，CD105的高度表達同淋巴結轉移以及TNM分期密切相關(P均<0.01)，提示CD105的免疫表達是舌鱗癌的預后指標。相似的研究結果亦見于肺非小細胞癌、口腔癌、胃癌等的研究[13，14]。研究表明，CD105可作為腫瘤診斷、轉移和復發及判斷預后理想指標[5,15]。

本實驗研究結果表明，CD105標記的MVD所顯示的血管多為新生薄壁、管徑小的血管，大的厚壁血管未見CD105的表達。60例結直腸癌標本平均微血管計數為(30±8)條。結直腸癌CD105標記的MVD值明顯高于結直腸腺瘤組織(P=0.005)。

結直腸癌CD105標記的MVD值明顯高于結直腸腺瘤組織(P=0.005)。CD105標記的MVD值與腫瘤分期、淋巴結轉、遠處轉移明顯相關(P均<0.01)，而與患者的年齡、性別、腫瘤直徑、大體類型、病理類型及組織學分級均無明顯相關(P均>0.05)。

本實驗研究結果表明，CD105標記的MVD所顯示的血管多為新生薄壁、管徑小的血管，大的厚壁血管未見CD105的表達。結直腸癌CD105標記的MVD值明顯高于結直腸腺瘤組織。這一結果與Akagi等[4]的研究一致，說明CD105是預測結直腸腺瘤癌變的有效指標，CD105有助于早期診斷疾病。本實驗研究結果還顯示，微血管數目與是否有淋巴結轉移及遠處轉移有顯著的差異性，這與Saad 等[16，17]的研究結果一致。

此外，本研究結果還顯示(Ⅲ+Ⅳ)期的MVD均值明顯高于(Ⅰ+Ⅱ)期的MVD均值，這些均說明了CD105作為血管標志物，可參與血管生長，在結直腸癌血管生長過程中發揮了重要的作用，且與結直腸癌的進展與預后密切相關。由此，本實驗研究結果認為由于CD105與血管內皮細胞的關系密切，人們有望通過CD105這一途徑來抑制血管內皮細胞的生長，從而有效控制結直腸癌的生長和轉移，達到治療結直腸癌的目的。

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ExpressionofCD105incolorectalcarcinomaanditsrelationshipwithangiogenesis

CAOHuaiyu,CHENGXuemei,WEILeibin.DepartmentofAnesthesiology,TheNo.251HospitalofPLA,Hebei,Zhangjiakou075000,China

ObjectiveTo investigate the expression of CD105 in colorectal carcinoma and to explore the relationship between the expression and angiogenesis.MethodsImmunohistochemistry was used to detect the expression of CD105 in 60 cases of primary colorectal carcinomas,20 cases of colorectal adenomas and 10 cases of normal colorectal tissues.ResultsThe average microvessel number labeled with CD105 in 60 cases of colorectal carcinoma was 30±8.The MVD value in primary colorectal carcinomas labeled with CD105 was significantly higher than that in colorectal adenomas (P<0.01),which was closely related to TNM stage,lymph node metastasis and distant metastasis (P<0.01),however,which was not correlated with patient’s sex and age,the tumor’s size,histological type,pathological type and the degree of differentiation (P>0.05).ConclusionMVD has significant differences at the respects of TNM stage,lymph node metastasis and distant metastasis,which suggests that the patients with enhancement of CD105 expression density have higher rates of tumor metastasis and poorer prognosis.

colorectal carcinoma;CD105;clinicopathologic factors;microvessel density

10.3969/j.issn.1002-7386.2014.10.008

075000 河北省張家口市，中國人民解放軍解放軍第251醫院麻醉科

R 735.31

A

1002-7386(2014)10-1463-03

2014-01-12)