血培養(yǎng)陽性患者C反應(yīng)蛋白和降鈣素原水平檢測

王志剛，王曉玲，吳景華(.河北省唐山市豐潤區(qū)第二人民醫(yī)院檢驗科，河北 唐山 063030；2.河北聯(lián)合大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗科，河北 唐山 063000)

·論著·

血培養(yǎng)陽性患者C反應(yīng)蛋白和降鈣素原水平檢測

王志剛1，王曉玲1，吳景華2*
(1.河北省唐山市豐潤區(qū)第二人民醫(yī)院檢驗科，河北 唐山 063030；2.河北聯(lián)合大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗科，河北 唐山 063000)

目的觀察血培養(yǎng)陽性患者C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein，CRP)和降鈣素原(plateletcrit，PCT)水平，為臨床快速診斷提供依據(jù)。方法回顧性分析血培養(yǎng)陽性的病例158例，并依據(jù)鑒定結(jié)果分為污染菌組9例，G+細(xì)菌組59例，G-細(xì)菌組77例，念珠菌組13例，檢測各組血漿中CRP和PCT的水平。結(jié)果G+細(xì)菌組和G-細(xì)菌組CRP水平高于污染菌組(P<0.01)；G+細(xì)菌組、G-細(xì)菌組和念珠菌組PCT水平高于污染菌組(P<0.01)；念珠菌組與污染菌組CRP水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；G-細(xì)菌組CRP和PCT水平均較G+細(xì)菌組明顯升高(P<0.01)。結(jié)論CRP和PCT水平對血培養(yǎng)陽性結(jié)果的進(jìn)一步快速分析鑒定具有重要參考價值。

C反應(yīng)蛋白質(zhì)；降鈣素原；細(xì)菌；念珠菌屬

10.3969/j.issn.1007-3205.2014.08.033

C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein，CRP)是由肝臟合成的一種急性時相反應(yīng)蛋白，具有多種生物活性，被認(rèn)為是最敏感的炎癥指標(biāo)之一。CRP可與細(xì)菌多糖結(jié)合，激活補體導(dǎo)致炎性反應(yīng)[1]，炎癥細(xì)胞浸潤并釋放內(nèi)源性遞質(zhì)，刺激肝細(xì)胞加速合成CRP，炎癥感染時可出現(xiàn)大幅升高，尤其對于細(xì)菌性感染敏感。降鈣素原(procalcitonin，PCT)是一種無激素活性的糖蛋白，實驗表明機體感染時在血漿中出現(xiàn)最早的蛋白是PCT[2]。2011年吳華等[3]分析指出PCT對早期識別菌血癥及病情發(fā)展有重要意義，是血培養(yǎng)的重要補充指標(biāo)。血培養(yǎng)是感染菌血癥診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”。普通血培養(yǎng)陽性鑒定及藥敏結(jié)果最快也要72h,不利于臨床及時用藥，影響患者早日康復(fù)，而血培養(yǎng)陽性結(jié)果，結(jié)合CRP和PCT水平，初步分析病原菌種類，反饋臨床，對及時合理用藥,改善患者預(yù)后有重要意義。現(xiàn)將本研究結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：2012年1月—2013年6月唐山市豐潤區(qū)第二人民醫(yī)院血培養(yǎng)陽性且同時測定CRP和PCT的患者158例，男性86例，女性72例，年齡23～82歲，平均(62.3±16.4)歲，依據(jù)鑒定結(jié)果分為污染菌、G+細(xì)菌、G-細(xì)菌、念珠菌4個組。

1.2 試劑儀器：CRP用貝克曼IMMAGE 800全自動特定蛋白分析儀及靈敏度更高的速率散射免疫比濁法[4]定量測定；PCT采用法國生物梅里埃公司mini-VIDAS全自動免疫熒光分析儀與原裝試劑盒進(jìn)行定量檢測；血培養(yǎng)采用BACTEC9120全自動血培養(yǎng)系統(tǒng)，菌種鑒定及藥敏分析采用phoenix 100全自動細(xì)菌分析鑒定系統(tǒng)。嚴(yán)格按照無菌操作技術(shù)[5]在不同部位采集靜脈血做血培養(yǎng)(各10mL)的同時采集靜脈血至抗凝管，離心，分離血漿做CRP和PCT測定。

1.3 結(jié)果判定：CRP正常參考值0.0～10.0mg/L，PCT正常參考值0.0～0.5μg/L；血培養(yǎng)以轉(zhuǎn)種平皿有菌落生長為陽性,污染菌的判斷標(biāo)準(zhǔn)參照文獻(xiàn)[6]進(jìn)行并結(jié)合臨床。致病菌依據(jù)鑒定結(jié)果分為G+細(xì)菌、G-細(xì)菌、念珠菌。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法：應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料因非正態(tài)分布，以中位數(shù)(四分位數(shù)間距)[M(QR)]表示,組間比較采用秩和檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組病原菌分布：158例血培養(yǎng)陽性標(biāo)本按病原菌種類分為4個組，污染菌組9例，G+細(xì)菌組59例，G-細(xì)菌組77例，念珠菌組13例。各組菌種分布見表1。

表1 158例血培養(yǎng)陽性的病原菌種類統(tǒng)計

2.2 各組CRP和PCT檢測結(jié)果：G+細(xì)菌組、G-細(xì)菌組CRP均較污染菌組明顯升高(P<0.01)，G-細(xì)菌組CRP又較G+細(xì)菌組明顯升高(P<0.01)；G+細(xì)菌組、G-細(xì)菌組和念珠菌組PCT均較污染菌組明顯升高(P<0.01)；G-細(xì)菌組PCT又較G+細(xì)菌組明顯升高(P<0.01)。見表2。

表2 各組CRP和PCT檢測結(jié)果比較 [M(QR)]

*P<0.01與污染菌組比較 #P<0.01與G+細(xì)菌組比較(秩和檢驗)

3 討 論

血培養(yǎng)是診斷細(xì)菌感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但標(biāo)本易受污染，陽性率低，結(jié)果滯后。嚴(yán)格按照無菌操作技術(shù)，通過靜脈穿刺而不是靜脈導(dǎo)管抽取血標(biāo)本[5]，可有效降低血培養(yǎng)污染率，提高病原菌檢出陽性率，但結(jié)果滯后的問題難以突破。CRP是一種急性時相反應(yīng)蛋白，正常合成率1～10mg/d，急性炎癥和創(chuàng)傷每天合成>1g，且濃度水平與持續(xù)時間和感染創(chuàng)傷程度呈正相關(guān)。CRP≤0.0mg/L可基本排除細(xì)菌感染，CRP>11.0～100.0mg/L提示局灶性細(xì)菌感染或菌血癥，CRP>100.0mg/L提示感染嚴(yán)重[7]。當(dāng)機體發(fā)生敗血癥時，CRP水平急劇增高，因而有學(xué)者稱CRP是敗血癥的靈敏指標(biāo)。PCT主要是由甲狀腺C細(xì)胞產(chǎn)生的一種炎性反應(yīng)標(biāo)記物，且PCT對細(xì)菌的敏感性和特異性較其他炎性指標(biāo)高[8],當(dāng)嚴(yán)重感染以及膿毒癥和多臟器功能衰竭時PCT在血漿中的水平升高。自1993年國外首次報道PCT水平與細(xì)菌感染有關(guān)以來，PCT已作為一個新的炎癥指標(biāo)，廣泛應(yīng)用于感染性疾病的診斷和鑒別診斷，國外學(xué)者已將PCT作為細(xì)菌感染的指標(biāo)[9]。

當(dāng)CRP和PCT水平較低或僅是輕微升高時，血培養(yǎng)可以考慮為假陽性，即有污染菌的存在。某些菌種如表皮葡萄球菌，既可為污染菌也可是致病菌，對污染菌的判定，目前還沒有“金標(biāo)準(zhǔn)”，可參照文獻(xiàn)[6]標(biāo)準(zhǔn)區(qū)分：①一份血標(biāo)本接種到2個或2個以上的培養(yǎng)瓶中,而其中只有1瓶為陽性,且經(jīng)鑒定菌落為凝固酶陰性葡萄球菌，需氧和厭氧類白喉桿菌、微球菌、桿菌屬和草綠色鏈球菌可能為污染；②只做1份血培養(yǎng)且結(jié)果陽性，結(jié)果可能為污染，需結(jié)合臨床判斷。本研究結(jié)果提示，污染菌CRP和PCT水平與致病菌CRP和PCT水平差異較大，CRP和PCT水平無疑對污染菌的鑒定是一個很好的補充。本研究結(jié)果還顯示，當(dāng)血流感染菌為念珠菌時PCT可增高達(dá)正常值十幾倍甚至幾十倍,而CRP則基本上變化不大，因此，對于念珠菌性血流感染，CRP與PCT聯(lián)合應(yīng)用是很好的鑒別指標(biāo)；G-細(xì)菌組與G+細(xì)菌組之間，CRP和PCT水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義，G-細(xì)菌較G+細(xì)菌CRP和PCT水平高，這可能與G-細(xì)菌的內(nèi)毒素有關(guān)[10]。Elson等[11]研究表明，細(xì)菌內(nèi)毒素(脂多糖)和多種細(xì)胞因子等可以刺激誘導(dǎo)PCT或CRP的釋放，G+細(xì)菌與G-細(xì)菌均可通過釋放各種細(xì)胞因子，從而導(dǎo)致血清PCT或CRP水平的升高，但同時G-細(xì)菌的重要成分——內(nèi)毒素可以在無細(xì)胞因子的情況下，在體外直接誘導(dǎo)人培養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)生高水平的PCT或CRP，而G+細(xì)菌的細(xì)胞壁成分無此作用[12]。患者的自身免疫、藥物的應(yīng)用可能會對患者的CRP和PCT測定有一定影響，但二者的聯(lián)合應(yīng)用，基本能排除一些因素的干擾。對血培養(yǎng)陽性結(jié)果的進(jìn)一步快速分析鑒定具有重要的參考價值。對抗生素的及時合理快速使用，改善患者預(yù)后能起到很好的指導(dǎo)作用。

[1] 沈紅紅，袁秀麗，陳斌斌.新生兒感染性疾病血清C-反應(yīng)蛋白和前白蛋白檢測意義探討[J].中國實用醫(yī)藥，2010，5(1):44.

[2] 楊玉霞.降鈣素原在新生兒敗血癥診斷中的應(yīng)用價值[J].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2006，21(6)：74-75.

[3] 吳華，卿文衡，楊良勇.血培養(yǎng)聯(lián)合降鈣素原與超敏C反應(yīng)蛋白在新生兒敗血癥早期診斷中的應(yīng)用[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2010,7(21)：2328-2329.

[4] 曹慧，曹正欣.兩種CRP檢測方法的靈敏度比較[J].臨床醫(yī)學(xué)工程,2011,18(12):1865-1866.

[5] 李美蘭，周國花，何菁菁.血培養(yǎng)污染的發(fā)生率調(diào)查及對策[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2012,22(13):2853-2854.

[6] 蔡蕓.血培養(yǎng)污染及判定[J].醫(yī)學(xué)信息：下旬刊，2009,1(10):221.

[7] 符佩華.小兒急性上呼吸道感染C反應(yīng)蛋白檢測的意義[J].臨床薈萃，2010，25(21):1899-1900.

[8] 馬炳永，潘榮明，呂大回.急性胰腺炎患者血清降鈣素原及C反應(yīng)蛋白的變化及意義[J].河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2011,32(7)：807-809.

[9] 鄭雅琴，姜建春.降鈣素原測定在兒科發(fā)熱患兒中的應(yīng)用價值[J].河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2013，34(1)：47-49.

[10] 王凱飛，沈定霞，劉朝軍,等.血清降鈣素原定量檢測與血培養(yǎng)結(jié)果的比較[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2012，35(3):243-246.

[11] ELSON G,DUNN-SIEGRIST I,DAUBEUF B,et al.Contribution of Toll-like receptors to the innate immune response to Gram-negative and Gram-positive bacteria[J].Blood,2007,109(4):1574-1538.

[12] TAVARES E,MALDONADO R,OJEDA ML,et al.Circulating inflammatory mediators during start of fever in differential diagnosis of gram-negative and gram-positive infections in leukopenic rats[J].Clin Diagn Lab Immunol,2005,12(9):1085-1093.

(本文編輯：許卓文)

2013-10-30；

2013-12-19

唐山市科學(xué)技術(shù)研究與發(fā)展指導(dǎo)計劃項目(13130211b)

王志剛(1979-)，男，河北豐潤人，河北省唐山市豐潤區(qū)第二人民醫(yī)院主管檢驗技師，醫(yī)學(xué)學(xué)士，從事臨床醫(yī)學(xué)檢驗研究。

*通訊作者。E-mail:tswujinghua@163.com

R446.5

B

1007-3205(2014)08-0957-03